伪狂犬病病毒Bartha株TK-/LacZ+突变株的构建及其生物学特性研究   总被引：3，自引：1，他引：2  

刘正飞  陈焕春  周复春  方六荣  何启盖 《畜牧兽医学报》2002,33(3):304-307

本研究将伪狂犬病病毒Bartha株基因组与含有LacZ标志基因的TK基因转移质料pUEKPZ共转染猪肾传代细胞PK－5，细胞出现病变后，反复冻融3次收毒，按1：5稀释接种于IBRS－2细胞。在X－gal存在下挑取蓝斑，蓝斑筛选3次，再进行空斑试验，同时用PCR扩增LacZ基因，经3次空斑纯化，随机挑取的空斑均能扩增出LacZ基因，证实所获得的重组病毒为伪狂犬病病毒Bartha株TK^-/LacZ^ 突变株。TCID50试验表明，TK失活对Bartha株在细胞上增殖无影响；Balb/C小鼠试验表明，该突变对Balb/C小鼠的安全性明显高于Bartha亲本毒株。  相似文献   

用ELISA方法进行猪圆环病毒病血清学调查   总被引：1，自引：0，他引：1  

琚春梅  陈焕春  刘正飞  曹胜波  何启盖  敖艳华 《养殖与饲料．饲料世界》2003,(10):41-42

本研究用猪2型圆环病毒ORF2基因的表达产物包被酶标板，建立ELISA诊断方法，用此方法对临床1257份送检血清进行了检测，其总阳性率为57．28%(720／1257)，仔猪阳性率为30．83％(119／386)，肥猪阳性率为64．93％(137／211)，母猪阳性率为71．50％(419／586)，公猪阳性率为70．27％(52／74)。这一结果表明猪圆环病毒在我国流行较普遍，且抗体阳性率随猪体年龄的增长而升高。  相似文献   

伪狂犬病病毒Ea株UL54基因在BHK-21细胞上的表达     

徐引弟  陈焕春  何启盖  肖少波  钱平  汪超 《中国预防兽医学报》2002,24(2):96-99

  相似文献   

伪狂犬病病毒感染诱导和抑制细胞凋亡   总被引：3，自引：0，他引：3  

金梅林  李祥敏  陈焕春  何启盖  吴斌  方六荣  吴美洲 《中国兽医学报》2002,22(3):244-247

用伪狂犬病病毒 (pseudorabies virus,PRV)鄂 A株感染非免疫健康初生仔猪 ,5 d后出现典型的伪狂犬病临床症状。从感染 PRV鄂 A株仔猪的肾脏、肝脏、扁桃体、胸腺、腹股沟淋巴结、颈部淋巴结等组织细胞提取的 DNA,经琼脂糖凝胶电泳呈现大小不等的 180～ 2 0 0 bp整倍数的寡核苷酸片段梯状条带 ,经 PCR方法鉴定为 PRV DNA。末端脱氧核苷转移酶原位标记 [terminal deoxynucleotidyl transferase(Td T) - conjugated d UTP nick end labelling,TUNEL ]法显示 ,部分凋亡的阳性细胞呈现染色质凝聚、细胞核固缩、染色质靠核膜边聚集等形态学变化 ,说明 PRV诱导细胞凋亡是造成急性感染时组织器官广泛损伤的重要原因之一 ;而 PRV感染的大脑、小脑、嗅球及脊髓等神经系统组织中未观察到上述细胞凋亡特征 ,说明 PRV可以抑制急性感染时神经细胞发生凋亡。本试验结果显示 ,在 PRV急性感染状态下 ,病毒诱导细胞凋亡是杀伤细胞的重要途径之一 ,同时这一过程又可通过神经系统病毒基因隐性感染及潜伏期的建立而受到抑制  相似文献   

胶体磨辅助酶法提取金针菇根蛋白的工艺研究     

魏书信  刘丽娜  王安建  李静  李顺锋 《保鲜与加工》2015,15(3):58-61

为充分利用金针菇资源,提升其采后价值,以金针菇根为试材,通过单因素试验和正交试验,优化胶体磨辅助酶法提取金针菇根蛋白质的工艺条件。得到最佳提取工艺参数为:胶体磨磨齿间隙20μm,纤维素酶添加量40 mg/g,液料比10∶1(m L/g),酶解时间100 min,金针菇根蛋白提取率为1.326%。胶体磨辅助酶法提取金针菇根蛋白操作简单,提取条件温和,便于工业化生产,具有实际推广价值。  相似文献   

新型基因工程亚单位菌苗对猪传染性胸膜肺炎的保护效力研究   总被引：12，自引：0，他引：12  

刘建杰  陈焕春  李冲  何启盖  吴斌 《中国农业科学》2005,38(3):596-600

 利用分泌毒素ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ的重组表达产物和胸膜肺炎放线杆菌7型菌，研制了一种新型的基因工程亚单位菌苗并对此疫苗的免疫效力进行了研究。利用该疫苗免疫断奶仔猪，间隔3周加强1次，同时设空白对照组和一种商品化的三价细菌灭活苗组。首免后每周采血检测ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ的ELISA抗体和7型菌的血凝抗体，第2次免疫两周后用猪胸膜肺炎放线杆菌1型菌株进行气管攻毒。从攻毒后症状、细菌分离、抗体检测、死后剖检对免疫效果进行评价。结果显示亚单位菌苗对于猪传染性胸膜肺炎有显著的保护力，能明显减轻临床症状和降低肺部损伤，效果优于商品化的细菌灭活苗。  相似文献   

25%阿米西达对秋花生的增产效应     

郭玉棋  陈益明  刘丽娜 《勤云标准版测试》2007,(12):37-39

25％阿米西达是瑞士先正达公司研制的超高级杀菌剂。在花生上使用，既可防病治病；又可调节植物生长、强壮植株、增强抗性、延缓衰老，以及增加功能叶叶片厚度和叶面积来提高光合作用和养分的积累，以达到增产增效。  相似文献   

猪流行性腹泻病的历史、现状和展望     

陈芳洲翻译库旭钢  何启盖校对 《动物保健》2011,(8):73-73

猪流行性腹泻病（PED）是一种灾难性的病毒性传染病,以急性肠炎和伴有脱水的水样腹泻为特征,各种年龄的猪均易感。该病对不同年龄易感猪群的致死率不同,以哺乳仔猪的致死率最高。该病最先于1971年在英格兰被发现,此后,欧洲和亚洲也报道了很多该病的暴发。该病的病原是猪流行性腹泻病病毒,属于冠状病毒科,于1978年被首次描述。  相似文献   

新近小麦病虫害现代化防治技术探讨     

刘丽娜 《农技服务》2015,(2):101

随着我国经济的快速发展,我国的农业结构也发生了很大的变化,尤其是小麦的产量在不断提高,为种植人员获取更多的经济收益,但是,在种植的过程中,小麦经常会出现病虫害,这会严重影响小麦的产量。长期以来,种植人员也在不断完善病虫害防治技术,虽然取得一些成效,但是仍旧存在诸多问题,影响小麦的生长进程。本文主要阐述了小麦在生长的过程中,存在的主要病虫害以及防治的对策,以为种植人员获得较高的产量。  相似文献   

间接ELISA检测猪伪狂犬病血清抗体   总被引：9，自引：0，他引：9  

邱德新  陈焕春  何启盖  吴斌  曹胜波 《中国兽医学报》2002,22(2):149-152

用猪肾传代细胞IBRS－2增殖猪伪狂犬病病毒（PRV）鄂A株，病毒培养上清液经硫酸铵沉淀、聚乙二醇（Mr20000）浓缩后作为包被抗原。用纯化的猪血清IgG免疫家兔，HRP村记撮的兔抗猪IgG，制备出高效价的酶标抗体，酶标抗体工作浓度为1：50000；经各种条件的选择，建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的间接ELISA。所建立的间接ELISA抗原包被浓度为39.2mg/L，血清最佳稀释度为1：20，与猪细小病毒、猪、O型口蹄疫、猪衣原体标准阳性血清呈阴性反应，与标准阴性血清和临床未感染PRV的猪血清呈阴性反应；与猪伪狂犬病标准阳性血清、免疫猪血清和临床发病猪血清呈明显的阳性反应；与美国进口的PRV抗体检测ELISA诊断试剂盒检测结果比较，45份猪血清的阴、阳性检出符合率均为100％。表明建立的间接ELISA具有敏感性高、特异性强、重复性好的优点，可用于猪伪狂犬病血清抗体的定性和定量检测。  相似文献