马氏珠母贝F8代4种壳色选育群体的EST-SSR遗传多样性分析     

谭杰  孙宗红  陶雅晋  姚高友  刘付少梅  刘锦上  刘志刚 《水产科学》2018,(4)

利用10对EST-SSR分子标记研究红、白、黑、黄4种壳色马氏珠母贝F8代人工选育群体的遗传多样性。结果显示,10个位点共扩增出46个等位基因,各位点的等位基因数为2~7。红、黑、白、黄4种壳色群体的平均等位基因数分别为4.0、3.7、3.6、3.5;平均观测杂合度和平均期望杂合度分别为0.445~0.627和0.479~0.580;Shannon多样性指数为0.850~1.042;平均多态信息含量为0.423~0.509。黄壳色群体中各遗传参数值最小,而红壳色群体中除有效等位基因数外,其余参数(等位基因数、观测杂合度、期望杂合度、多态信息含量、Shannon多样性指数)值均最大。40个群体—位点组合中有31个组合显著偏离平衡(P0.05),占总位点的77.5%。群体间的遗传分化指数为0.0101~0.3025,平均值为0.1206(0.05遗传分化指数0.15),处于中等程度分化,这与课题组8年定向选育有关。群体间的基因流值为0.5764~24.5841,平均值为1.8225。红壳色群体和黑壳色群体的遗传相似系数最大(0.8418),遗传距离最小(0.1722),最先聚为一类;白壳色群体和黄壳色群体的遗传相似系数最小(0.7107),遗传距离最大(0.3415)。经8代群体继代选育,4种壳色马氏珠母贝群体仍保持着较高的遗传多样性,其中红壳色群体的遗传多样性最高,黄壳色群体的遗传多样性最低。  相似文献   

达氏鲟精巢细胞消化分离和超低温冷冻保存   总被引：1，自引：0，他引：1  

颉璇  厉萍  席萌丹  郭威  乔新美  杜浩  刘志刚  危起伟 《淡水渔业》2016,(5):19-24

通过研究两种酶对精巢细胞的消化效果,探究抗冻剂、降温程序、糖类和卵磷脂对达氏鲟(Acipenser dabryanus)精巢细胞冻存效果的影响,获得消化冻存后高存活率的细胞。实验使用0.25%胰蛋白酶和2 mg/m L胶原酶H+500 U/m L中性酶II的组合酶对达氏鲟精巢细胞进行消化,获得不同消化时间内的活细胞数量。另外,还研究了冷冻稀释液中分别添加10%二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)、甲醇(MET)作为抗冻剂,采用-1℃/min慢速降温以及直接投入液氮中的快速降温方法冻存,冷冻稀释液采用D-海藻糖或同浓度D-蔗糖,以及添加5%、8%、11%卵磷脂对冻存效果的影响。结果显示:两种消化酶在同一时间消化所得的活细胞数和活细胞率无显著差异,并且都在3 h获得最多活细胞。慢速降温的冻存效果极显著地好于快速降温(P=0.01)。不同抗冻剂的保存效果差异显著,复苏后细胞相对存活率EG(51.70%±5.24%)MET(45.09%±3.15%)DMSO(40.18%±3.90%)。不同糖对达氏鲟精巢细胞冻存效果无显著影响;不同浓度的卵磷脂冻存效果有极显著差异。含8%卵磷脂的冻存液对细胞的冻存效果最好,细胞存活率可达(93.55±2.56)%,培养10 d后细胞数目为0 d时的3.19倍。  相似文献   

温度与比重互作对施獭蛤稚贝成活与生长的影响     

吕晓露  孙宗红  刘志刚  白成  刘锦上 《南方水产科学》2015,(3):59-66

在室内条件下,采用2因素5水平的正交试验方法研究了温度(16.0℃、20.0℃、24.0℃、28.0℃和32.0℃)与海水比重(1.016 0、1.020 0、1.024 0、1.028 0和1.032 0)互作对施獭蛤(Lutraria sieboldii)稚贝成活与生长的影响。结果表明:1)在最适宜的比重范围内,稚贝的适宜成活温度是17.0~32.7℃,最适宜成活温度是24.0~28.0℃;适宜生长温度是16.4~32.7℃,最适宜生长温度是24.0~30.0℃;2)在最适宜温度范围内,稚贝适宜的成活比重是1.016 5~1.031 8,最适宜的成活比重是1.024 0;适宜生长比重是1.016 3~1.031 8,最适宜的生长比重是1.021 3~1.028 6;3)温度与比重对稚贝成活与生长存在联合效应,适宜和最适宜的温度、比重随着比重与温度向2个极端移动而逐渐变小。  相似文献   

尼罗罗非鱼MHC Іα全长cDNA的克隆、多态性及组织表达特征     

黎建平  高风英  卢迈新  曹建萌  朱华平  可小丽  刘志刚 《中国水产科学》2014,21(6):1134-1145

通过同源克隆和末端快速扩增(RACE)方法,, 获得尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)的MHC Іα全长cDNA,, 分析其多态性和组织表达特征。获得的尼罗罗非鱼MHC Іα cDNA全长为1 533 bp, , 其ORF为1 053 bp。编码的蛋白质分子包含信号肽、MHC结构域、IGc1结构域和跨膜区,, 并存在丰富的磷酸化位点。与其他硬骨鱼类和哺乳类的相似性在26.86%~74.0%。从6尾鱼中共分离得到6条不同的MHC Іα cDNA序列,, 其序列中存在多个单核苷酸多态性位点,, 说明MHC Іα cDNA存在丰富的多态性。qPCR检测表明,, MHC Іα基因在脾和心中表达量较高,, 中等程度表达于鳃、肠和肾中,, 在脑、肝、胃、皮肤和肌肉中表达量较低。对尼罗罗非鱼进行人工感染无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)后,, MHC Іα基因的mRNA表达水平在鳃、肾、心脏和脾4个组织中均发生了不同程度的变化。结果表明MHC Iα基因参与罗非鱼免疫反应,, 在免疫应答中发挥重要功能。本研究通过研究尼罗罗非鱼MHC Іα的生物学活性、功能和表达调控,, 旨在为揭示尼罗罗非鱼免疫抗感染机制提供基础资料,, 并为利用MHC Іα作为候选基因筛选尼罗罗非鱼抗病相关分子标记、辅助抗病品系的选育奠定基础。

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中国花生全程机械化发展状况及其在新疆的应用   总被引：5，自引：1，他引：4  

王亮  魏建军  李艳  王桥江  韩萍  关群才  刘志刚 《中国农学通报》2014,30(2):161-168

为了提高新疆花生全程机械化生产水平,促进花生产业的进一步发展和壮大。回顾和总结了国 外花生机械化收获的发展状况,从中归纳出国外发展花生机械化生产的主要经验,同时分析中国花生种 植概况与生产特点、全程机械化生产发展现状和当前存在的主要问题。提出了新疆花生全程机械化发 展对策和建议,并对发展前景进行展望,最后整理介绍了新疆天鹰生物科技有限公司在新疆率先实现花 生种植全程机械化的成功范例。新疆是中国西部花生单产最高的地区,通过农艺技术和机械化生产技 术紧密结合,从花生新品种（系）培育、推广标准化和规模化的田间栽培管理技术、建设（成）绿色有机花 生原料生产基地、形成南北疆花生种植产业带、研制或引进适用的花生播种与收获机械、培育一批以花 生深加工为主的大型龙头企业等方面努力,必将推动新疆花生全程机械化的快速发展。  相似文献   

大豆主要过敏原Gly m Bd30K蛋白单克隆抗体的制备与应用     

邹菊  刘志刚 《大豆科学》2011,30(5):723-726

利用大豆主要过敏原Gly m Bd 30K蛋白抗原表位蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合.采用半固体培养基法和有限稀释法相结合的方法快速筛选获得稳定分泌的特异性杂交瘤细胞,用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行抗体纯化.采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体...  相似文献   

生物有机复合肥对作物的增产效果及提高作物品质的研究     

杨波  刘志刚  胡家俊  胡征 《耕作与栽培》2009,(4):14-16

为了研究生物有机复合肥在农业上的增产效果及其开发利用价值,于2006--2008年进行了田间试验。结果表明：以禽畜粪肥为原料接种功能微生物发酵,配以氮、磷、钾化肥制成的生物有机复合肥与等养分的化肥相比,对作物的增产作用更为显著。同时该肥对作物生长发育和产品品质亦有不同程度的促进和改善。  相似文献   

不同种植密度对甜高粱糖分积累的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨相昆  田海燕  陈树宾  刘志刚  刘涛 《西南农业学报》2009,22(1)

本研究从甜高粱的种植密度入手,研究了同一地区不同种植密度甜高粱茎秆糖分累积的规律,以选择该地区甜高粱的适宜种植密度。结果表明：在石河子地区种植的3个甜高粱品种在不同种植密度下,其茎秆中总糖含量均经历先升、后降、再升、再降的＂M＂形变化趋势。但各品种在不同密度下的茎秆汁液含糖量（锤度）有差异,通过方差分析以及相关性分析发现,不同品种间茎秆汁液含糖量差异显著,但不同密度间茎秆汁液含糖量差异不显著,茎秆汁液含糖量（锤度）与密度的相关性也不显著。  相似文献   

斑马鱼原肌球蛋白基因克隆表达及免疫学鉴定     

李荔  陈樱麟  闫浩  刘志刚 《水产科学》2013,32(1):26-30

克隆斑马鱼原肌球蛋白的基因并表达纯化出重组蛋白,对其免疫学特性进行鉴定。提取斑马鱼总RNA,采用RT-PCR克隆斑马鱼原肌球蛋白的全长基因,根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增斑马鱼原肌球蛋白基因的完整开放阅读框,连入载体pET-28a,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中通过IPTG诱导得到重组斑马鱼原肌球蛋白。重组蛋白经Ni 2+亲和层析柱纯化后进行Western-blot检测。获得斑马鱼原肌球蛋白基因,Western-blot结果显示重组蛋白具有良好的免疫活性。本研究成功克隆并表达了斑马鱼原肌球蛋白基因,经免疫学鉴定发现其具有过敏原性。  相似文献   

模块化数控编程在复杂零件中的应用     

刘志刚  王相 《农业装备与车辆工程》2012,50(4):66-69

编程人员在进行手工编程时,遇到复杂零件往往无从下手,用常规的编程方法进行编程,数值计算相当繁琐,工作量大,很容易出错,且程序很难校对.针对此类问题,本文提出了一种模块化数控编程,并以一薄壁零件为例对模块化数控编程在复杂零件中的应用进行了探讨和阐述.在进行模块化编程时,首先对复杂零件进行分析,确定加工工艺过程,之后对零件进行模块化分析,将零件分成若干个模块,分别对每个模块进行编程,通过分析可以发现模块化编程省时快速,不容易出错,且程序容易校对,极大地提高了编程效率.  相似文献