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猪瘟病毒RT-PCR核酸检测与ELISA抗原检测试验应用研究 总被引:2,自引:1,他引:1
本试验根据NCBI公布的猪瘟病毒石门毒株E2基因序列,设计、合成了1对检测猪瘟病毒E2基因的PCR引物。以120份疑似猪瘟病料为试验材料,使用RT-PCR核酸检测与ELISA抗原检测2种方法,分别用这2种方法检测疑似病料,并且比较这2种方法在猪瘟病料检测中的实际差别。通过猪瘟病毒RT-PCR核酸检测结果及ELISA抗原检测结果相互印证,为云南猪瘟的诊断及防制提供了技术支持。 相似文献
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为了使干扰素-γ(interferon γ,IFN-γ)在牛结核等疾病的诊断和防制方面取得更有效的应用,试验采用RT-PCR法从云南本地黄牛外周血淋巴细胞总RNA中扩增牛IFN-γ(BoIFN-γ)基因,测序并进行序列分析;然后亚克隆至pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。序列分析结果表明,克隆的IFN-γ基因与GenBank中荷斯坦牛IFN-γ序列同源性达99.60%。表达产物经SDS-PAGE分析,在大小约23 ku处可见目的蛋白表达条带,与预期结果一致;用ELISA检测,表达的蛋白具有明显的生物学活性,在菌体中的含量为244 ng/mL。本试验结果为牛IFN-γ蛋白的进一步研究和应用奠定了基础。 相似文献
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对不同产地、不同厂家、不同形状、不同类型、不同生产日期的14种普洱茶作为样品,检测主要有害菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和沙门氏菌(Salmonellaspp.)。结果表明:所有茶样中均未检出金黄色葡萄球菌和沙门氏菌,结果均符合国家标准。 相似文献
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信鸽新城疫病是由鸽副粘病毒型(又称鸽新城疫病毒)引起的一种急性传染病,该病传播迅速,死亡率高,给养鸽业造成了巨大的经济损失。1999年4月,昆明市某信鸽养殖场发生了一起以神经症状和排黄色稀粪为主要特征的疾病,经临床和实验室检验,初步诊断为信鸽新城疫。现将诊治情况报告如下。1 发病情况 昆明市某信鸽场有信鸽400余只,1999年4月,该群信鸽逐渐出现了排黄绿色或淡绿色稀粪等症状,在疾病的后期,还表现出较为严重的神经症状。用多种抗生素,磺胺类药、氟哌酸和痢特灵等,均无明显效果。2 临床症状 病鸽食欲减少,精神萎靡,羽毛松乱,呈进行… 相似文献
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为建立快速、敏感、特异的评价猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)活疫苗中病毒含量的方法,根据GenBank中登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因序列设计合成了标准品引物和定量引物,RT-PCR扩增PRRSV基因片段并连接到pMD19-T载体上,构建标准品质粒pMD19-T-PRRSV。采用SYBR GreenⅠ染料法进行荧光定量PCR检测,分析标准曲线并进行特异性、稳定性、重复性试验。结果显示,该方法检测病毒含量为7.43×100~7.43×108拷贝/μL,标准品各稀释度质粒拷贝数与Ct值之间相关系数高(R2=0.9989),引物特异性强。应用该方法对6个厂家PRRS活疫苗中的病毒含量进行测定,发现不同厂家生产的疫苗中病毒含量差异较大,最高差异可达47.9倍。本试验建立的检测PRRS活疫苗病毒含量的荧光定量PCR方法可用于疫苗生产过程中及免疫动物前疫苗质量的评价。 相似文献
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对鸡嗉囊内容物中的乳杆菌进行调查.从11份样品中,共分离到41株乳杆菌,鉴定为10个种,其中唾液乳杆菌,卷曲乳杆菌,双发酵乳杆菌3个种占58%,确认为是鸡嗉囊内容物中的优势种群. 相似文献