畜禽支原体耐药性及耐药机制研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

宫晓炜  马文瑛  陈启伟  郑福英  刘永生 《中国畜牧兽医》2017,44(8):2489-2495

支原体感染给畜禽养殖造成的危害已受到国内外科研人员的广泛重视。目前控制畜禽支原体感染、降低畜禽养殖经济损失的切实有效方法是大量使用抗生素,其中四环素、大环内酯类及喹诺酮类药物是现阶段临床兽医首选的3类抗菌药。但短短几十年的临床实践表明,滥用抗生素已经严重威胁畜禽健康,许多畜禽支原体临床分离株不仅仅对单一抗生素产生耐药性,而且同时对多种抗生素耐药。作者从药物靶位点改变、外排泵系统形成、抗菌药物灭活酶产生等方面对上述抗畜禽支原体药物的耐药机制进行阐述,以期为建立支原体耐药性检测体系、指导临床合理用药、开发新的药物等提供理论依据和策略。  相似文献   

穴位注射疗法治疗仔猪消化不良的研究     

赵峰  张杰  刘永生 《黑龙江畜牧兽医》2010,(1):96-97

<正>穴位注射疗法是在穴位注射某些药物,通过针刺和药物的双重作用,达到治疗疾病的目的。此法是在祖国医学经络理论基础上发展起来的一种新疗  相似文献   

口蹄疫核酸疫苗的研究进展     

王猛  刘永生  张杰 《浙江农业科学》2010,1(3):651-653

核酸疫苗不仅引起体液免疫反应,而且诱导较高水平的细胞免疫应答,尤其是细胞毒T淋巴细胞(CTL)反应,被认为在抗病毒、胞内菌、寄生虫等病原体感染中具有更大的优势。随着对核酸疫苗研究的深入,越来越多的科研人员将其运用到口蹄疫防治研究中,并获得了一定的成效。  相似文献   

牛朊蛋白在COS-7细胞中的表达     

丁耀忠  张杰  刘永生  陈豪泰  马丽娜  马艳平  杨生海  王猛  刘文倩  殷宏 《江苏农业学报》2010,26(4)

为研究重组蛋白pCI-PrP27-30在COS-7细胞中的表达,用pCI-PrP27-30重组表达载体转染COS-7细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot技术检测目的蛋白的表达。结果表明目的蛋白在COS-7细胞中成功表达。  相似文献   

红富士密植低产果园的改造技术     

刘永生  高炯 《农业科技通讯》2008,(4):145-146

天水市秦州区太京镇田家庄村、西口镇六十铺村1994年在藉河川道地区建立红富士乔砧密植园1900多亩,株行距为1.5m×4m,亩栽植110株。由于管理技术跟不上,仍延用传统稀植园的管理方法,造成树体高大,枝条稠密,树冠郁闭,通风透光条件恶化,致使树体生长过旺,花芽形成少,产量低品质差。本文作者在两村蹲点近4年,指导果农实施了树形改造和综合管理,实现亩产果品1500～2600kg,一、二级果率占60%～70%,亩收入达到2700～5100元。现将红富士密植低产果园的改造技术做一总结,供同行参考。  相似文献   

人、牛和羊叠朊基因的表达及牛叠朊蛋白抗血清的制备     

刘永生  唐江山  路伟  陈豪泰  孙德惠  才学鹏  张杰 《中国农业大学学报》2008,13(3):14-18

叠朊（Dpl）是朊蛋白（PrP）的横向同源物,两者的功能密切相关。本研究旨在制备能够特异检测重组表达的或者动物组织中Dpl的抗血清,以用于研究Dpl的功能及其与PrP的关系。根据已克隆的汉族人、中国黄牛、甘肃土种羊的Dpl基因,将其Dpl成熟蛋白编码区分别定向克隆到表达载体pET-30a（4-）上,将重组表达载体转入E.coli BL21（DE3）pLys S,IPTG诱导表达。将表达并纯化的牛重组Dpl免疫4只青紫蓝兔,制备牛Dpl的抗血清,SDS—PAGE分析表明人、牛和羊的重组Dpl在E．coli中获得了高效表达。用Ni—NTA树脂亲和层析和胶洗脱法纯化了上述表达产物,ELISA和West—blot分析表明,制备的牛Dpl抗血清与重组人、牛和羊的Dpl以及牛和羊睾丸组织的Dpl发生了特异性反应,却不与重组人、牛和羊的PrP发生反应。上述结果表明制备的Dpl抗血清可以作为人、牛和羊Dpl的检测试剂和研究材料。  相似文献   

深点食螨瓢虫生物学特性及捕食功能反应初探   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘永生  匡银近 《湖北林业科技》2000,(3):24-26

深点食螨瓢虫 ( Stethorus punctillum Weise)在湖北桔园近年种群数量逐年上升 ,成为柑桔红蜘蛛的主要天敌之一 ;由于多年的化学防治 ,红蜘蛛抗药性提高 ,控制其为害己成为柑桔生产中急待解决的问题。笔者1996～ 1998年对柑桔红蜘蛛的主要天敌——深点食螨虫进行了观察和捕食功能的初步研究 ,目的是为柑桔红蜘蛛的综合防治提供依据。1　材料和方法1.1　田间观察每年从 3月下旬开始在桔园观察生活习性和捕食行为 ,5月～ 10月用 80网目纱笼网罩 2～ 3个枝条 ,10 0片叶调查种群数量。1.2　室内饲养从桔园采回深点食螨瓢虫的成虫放置罐头瓶中饲…  相似文献   

羊种布鲁氏菌wzt基因的原核表达及间接ELISA方法的建立     

赵鹭  葛志毅  刘永生  李学瑞  曹小安 《中国畜牧兽医》2019,46(12):3707-3714

为建立检测血清中布鲁氏菌抗体的间接ELISA方法,本试验采用PCR技术从羊种布鲁氏菌QY1菌株中扩增得到wzt基因片段,连接到pET-30a载体上,构建质粒pET-30a-wzt,将鉴定正确的质粒转化E.coli BL21（DE3）感受态细胞,经原核表达系统对其进行表达,表达产物用SDS-PAGE和Western blotting进行分析后,用亲和层析镍柱纯化wzt重组蛋白备用。以wzt重组蛋白为检测抗原,逐步优化条件后建立布鲁氏菌间接ELISA检测方法。结果显示,试验成功构建了pET-30a-wzt原核表达载体,并在BL21（DE3）宿主菌中表达;SDS-PAGE和Western blotting结果表明,重组蛋白约为35 ku,表达形式为上清,条带单一、无杂带,有很好的反应原性和特异性。ELISA优化试验确定了最佳包被浓度为15 μg/mL,血清最佳稀释度为1：80,酶标抗体的最佳稀释度为1：5 000;通过检测24份阴性样品确定临界值,当样品D_{450 nm}值≥ 0.30为阳性,样品D_{450 nm}值<0.30时为阴性;特异性试验表明,该方法不与小肠耶尔森菌、大肠杆菌发生交叉反应;批内及批间变异系数均<10%;用该方法对120份血清样本进行检测,并与虎红凝集试验进行相符性验证,符合率为96%。本试验建立的间接ELISA方法为布鲁氏菌病的检测提供了可靠的技术手段。  相似文献   

牛支原体黏附宿主细胞间接免疫荧光检测方法的建立     

李明霞  陈胜利  郝华芳  赵萍  季文恒  王展慧  刘永生  殷宏  储岳峰 《中国兽医学报》2018,(7)

牛支原体可引起牛肺炎、乳腺炎和关节炎等多系统炎症,关于其黏附宿主细胞的机理有待深入研究。本试验以牛支原体08M株和牛肾细胞MDBK为研究对象,抗牛支原体多克隆抗体为一抗,FITC标记的兔抗牛IgG为二抗,通过优化牛支原体黏附滴度、黏附时间及一抗、二抗工作浓度,建立牛支原体黏附宿主细胞的间接免疫荧光检测方法。最终确定牛支原体的最适黏附滴度为1×109 CFU/mL,黏附时间为4h,一抗最适工作浓度为1∶250,二抗最适工作浓度为1∶250。本试验建立的间接免疫荧光方法可用于牛支原体黏附宿主细胞的检测,为牛支原体体外感染的检测及黏附机理的研究提供有效的技术手段。  相似文献   

欧洲鳗鲡白苗培育成功的三大要素     

刘永生 《科学养鱼》2008,(10)

我国是养鳗大国,产量居世界前列。自从1994年引进欧鳗试养成功后,现已成为福建省渔业产业结构调整和农村经济中的又一个新的增长点,以及闽西北山区出口创汇的最大宗拳头水产品。众所周知,要取得欧鳗养殖的成效,首先要抓好白苗培育,  相似文献