猪胸膜肺炎放线杆菌Ⅱ型分泌蛋白基因的克隆与表达     

杨建德  刘燕霏  刘畅  徐军 《黑龙江畜牧兽医》2009,(8)

研究通过筛选猪胸膜肺炎放线杆菌3～8 kb随机基因组文库获得1株阳性克隆.测序拯救质粒得到序列,通过BLAST分析确定此片段为猪胸膜肺炎放线杆菌Ⅱ型分泌蛋白基因,预计成熟蛋白分子质量为45.716 ku.根据序列设计特异性引物PCR扩增该基因,分子克隆表达该Ⅱ型分泌蛋白.Western-blot结果表明,该蛋白能与猪胸膜肺炎放线杆菌康复期血清发生反应.  相似文献   

香猪SRY基因的克隆及序列分析     

刘畅 《贵州畜牧兽医》2009,33(4):1-3

试验参照猪SRY基因保守序列设计了1对引物,对香猪基因组DNA进行PCR扩增。将扩增产物通过T—A互补法克隆到质粒pGEM—T载体中,筛选阳性克隆进行DNA测序。测序结果显示,香猪SRY基因开放阅读框全长627bp,编码227个氨基酸。其中核心区域HMG—box长237bp,并且编码79个氨基酸。与白鲸、人、牛、绵羊4种哺乳动物的SRY基因序列相比较,香猪和白鲸的SRY序列具有较高的相似性,相似度达82．1％。序列相似性和邻接法聚类树的结果均显示,在SRY基因中香猪和白鲸有着较近的亲缘关系,表明以白鲸为代表的鲸目和以香猪为代表的偶蹄目有较近的亲缘关系。  相似文献   

草茎点霉粗毒素的产生条件及活性测定     

纪明山 刘聃谷祖敏  吴德财王毅婧 刘畅 《中国农学通报》2011,27(10):153-156

为了寻求能够充分发挥草茎点霉粗毒素活性的最佳培养条件,笔者利用有机溶剂萃取草茎点霉发酵液,获得粗毒素,采用针刺法、种子萌发法确定草茎点霉毒素合适的提取条件及对鸭跖草的致病性。结果表明：草茎点霉胞外毒素活性较高,3种有机溶剂中乙酸乙酯萃取效果最好,产毒的最佳条件为：培养温度32℃、培养时间14天、培养方式为150 r/min震荡培养。粗毒素浓度在1000 μg/mL时种子萌发抑制率为26.09%,病斑面积达到6.85 mm2。萃取毒素采用有机溶剂的种类以及培养温度、培养时间、培养方式对草茎点霉粗毒素的活性影响很大。  相似文献   

高效液相色谱同时检测鱼肉组织中4种磺胺与甲氧苄啶的残留量     

朱晓华  翁棋兰  王静  刘畅  吴光红 《南京农业大学学报》2009,32(4)

建立了同时测定鱼肉组织中4种磺胺(磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲恶唑)和甲氧苄啶残留量的高效液相色谱法.鱼肉组织用乙腈提取后经乙腈饱和的正己烷去脂,过HLB柱净化,甲醇洗脱,减压浓缩蒸干,流动相(乙腈+1%乙酸,体积比为10∶90)定容,用带DAD检测器的高效液相色谱仪在272 nm波长下检测,流动相采用梯度洗脱.结果显示:4种磺胺和甲氧苄啶分别在0025～10 μg·mL-1和005～20 μg·mL-1范围内呈良好线性关系,相关系数(r)为0999;4种磺胺和甲氧苄啶分别在002、010和020 mg·kg-1和004、020和040mg·kg-1 3个浓度水平下的添加回收率为752%～979%,变异系数为28%～100%(n＝6);根据3倍信噪比计算,磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的最低检测限分别为0006、0007、0008、0008和0019mg·kg-1.  相似文献   

鸭病毒性肝炎病原分离鉴定及防治试验     

刘畅 《郑州牧业工程高等专科学校学报》2009,29(3):25-26

2008年河南郑州郊区1～3周龄的鸭（许多是7日龄用鸭病毒性肝炎弱毒苗免疫鸭）发生以肝脏肿胀与出血为特征的疾病,临床症状表现为突然发病,呆滞、腹泻,在出现角弓反张症状后迅速死亡。采集病料进行病原分离鉴定,用分离株研制出油乳剂灭活苗,并用肉鸭研制出鸭病毒性肝炎高免血清,经临床应用效果良好,现报告如下。  相似文献   

新型CO2缓蚀剂HSJ-1的研制   总被引：1，自引：0，他引：1  

全红平  黄志宇  李建波  张太亮  明显森  刘畅 《油气储运》2009,28(8)

利用曼尼希反应合成了一种新型CO2缓蚀剂HSJ-1,分析了合成温度、合成时间和合成pH值对缓蚀剂效果的影响,确定了最优合成条件,获得了对CO2腐蚀具有较好效果的缓蚀剂.这种缓蚀剂适用于油气田管道,可以有效抑制CO2对管道的腐蚀.  相似文献   

生防真菌球毛壳ND35的RAPD特异序列的标记转换   总被引：1，自引：0，他引：1  

戴杨  温丽伟  高克祥  何邦令  吴海燕  刘畅 《山东农业科学》2011,(10):8-11

利用随机扩增多态性DNA（RAPD）方法对包括球毛壳ND35在内的20个真菌分离物进行分析,筛选出球毛壳ND35的RAPD扩增特异性DNA片段,经pEASY—T3载体克隆和测序、Seqman整合后,用Primer5．0软件设计了球毛壳ND35的特异引物对CgND35—1：GTTGCCAGCCCGAGGGGAAG,CgND35—2：G111ACCAGCCATGCCTTGAAG,经优化PCR条件,成功获得球毛壳ND35的SCAR标记,该标记片段长度为329bp。用CgND35—1／CgND35—2引物对进行了SCAR标记特异性和灵敏度检测,表明该特异引物可用于球毛壳ND35的快速检测。  相似文献   

沈阳地区高氟地下水形成机理研究     

李洋  潘俊  刘畅 《安徽农业科学》2011,39(16):9780-9781

根据沈阳地区多年水文地质和气象资料,初步探明了该地区高氟地下水的主要分布区域,并从水文地质等因素方面分析了该地区高氟地下水的形成机理。  相似文献   

农产品质量安全监测将网络化     

廖中建  刘畅 《湖南农业》2011,(6):18

2011年4月13日,湖南省农业厅组织国内有关专家,在长沙召开了由湖南省农产品质量检验检测中心承担、上海复讯农业科技有限公司参与的"湖南省农产品质量安全监测信息系统"项目(一期)验收会。专家一致认为该项目达到了同类项目国内领先水平。该项目以湖南省14个市州和  相似文献   

利用QuEChERS法筛查并分析哈尔滨市“地趴”储玉米中的真菌毒素     

张海霞  徐晶  徐连伟  刘畅 《黑龙江农业科学》2017,(8)

为了掌握哈尔滨市储藏玉米真菌毒素污染情况,在玉米采收后和出售前,分两个时段对哈尔滨市11个玉米种植面积较大区、县(市)的农民家中的"地趴"储玉米进行布点采样,利用QuEChERS的前处理方法结合超高效液相色谱串联质谱法检测玉米样品中的FAB1、ZEN和DON。结果表明:各个区、县(市)的玉米样品中均有真菌毒素的检出,黄曲霉毒素B1并未检出,ZEN和DON有检出且含量超标,单一样品受多种毒素复合污染的情况比较严重,真菌毒素的检出率为27.57%,超标率为4.15%;第一次采集的样品真菌毒素的检出率高于第二次采集的样品。  相似文献