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山羊痘病毒通用转移载体的构建及鉴定 总被引：7，自引：0，他引：7
转移载体的构建是重组羊痘病毒构建的重要环节，在分析羊痘病毒基因组的基础上，以TK基因为插入靶序列，经PCR、酶切鉴定，获得了带有EcoRI、BamHⅠ酶切位点的TK基因片段。将此片段与经相同酶切的pUC119载体连接，构建转移载体pUC119-TK，并且以此为基础构建表达绿色荧光蛋白山羊痘病毒转移载体pTK-P7．5-GFP。将pTK-P7,5-GFP转染羊痘病毒感染的BHK21细胞，48h后报告基因得到表达，这为羊痘病毒载体系统的进一步开发奠定了基础。 相似文献
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布鲁氏菌病(Brucellosis)也称作“马尔他热”、 “地中 海热”或“波状热”,是由布鲁氏菌引起的一种人兽共患 的传染病,严重危害人类健康和畜牧业发展。 相似文献
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为了把荧光抗体诊断法应用于水貂链球菌病的诊断,用兔抗水貂链球菌荧光抗体检测了20例人工感染,10例自然感染和10例健康水貂的实质脏器。人工感染水貂脾脏检出率为100％(20/20),肝脏和心脏各为55％(11/20),自然感染水貂脾脏、肝脏和心脏检出率均为100％(10/10),其他脏器不易检出病原体。对照组建康水貂各实质脏器均呈阴性反应。试验结果表明:水貂的脾脏、肝脏和心脏可作为直接免疫荧光抗体检测的首选器官。应用此法检测病料可在2小时内报告病原学诊断结果。 相似文献
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应用β法检测了两群不同来源的新生雏鸡新城疫母源血凝抑制抗体，找出了新生雏鸡新城疫母源抗体的消长规律，为选择最佳新城疫首免时机提供了科学依据。 相似文献
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好牛子宫内膜炎病原菌的分离与鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
利用微生物分离方法，从１０头患有了宫内膜炎奶牛的子宫中分离，鉴定出柠檬色葡萄球菌，金黄色葡萄球菌，链球菌和腊样芽孢杆菌。所分离得到的４种菌均为革兰氏染色阳性，为临床治疗本病提供了科学依据。 相似文献
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大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ融合基因的构建及其免疫原性研究 总被引：5，自引：0，他引：5
用限制性核酸内切酶ＢａｍＨＩ和Ｂｇ１Ⅱ双酶切质粒ｐＢＳＴ２－６，获得了大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ（ＳＴ１）基因，再将含ＬａｃＺ基因（编码β－半乳糖苷酶）的载体ｐＵＣ１８用ＢａｍＨＩ酶切、碱性磷酸酶处理，然后与ＳＴ１基因通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接，转化至受体菌ＤＨ５α中。通过菌落原位杂交筛选，共筛选出５３个ＳＴ１基因探针杂交阳性的重组子，对其中一个重组子ＤＨ５α（ｐＸＳＴ１）进行限制性核酸内切酶酶切分析和核苷酸序列分析，证明重组质粒ｐＸＳＴ１含有２个正向串连在一起的ＳＴ１基因，而且融合在ＬａｃＺ基因的上游，具有正确的阅读框架。又ＤＨ５α（ｐＸＳＴ１）菌株能在含Ｘ－Ｇａｌ的ＬＢ平板上长成蓝色菌落，而且ＥＬＩＳＡ也检测到ＳＴ１融合蛋白，这表明该菌株能表达具有β－半乳糖苷酶活性的大肠杆菌ＳＴ１—β－半乳糖苷酶融合蛋白。免疫实验结果表明，重组菌株ＤＨ５α（ｐＸＳＴ１）安全无毒，表达的ＳＴ１融合蛋白能够诱发ＢＡＬＢ／ｃ鼠产生抗体，该抗体具有中和天然ＳＴ１肠毒素的毒性作用，这表明ＤＨ５α（ｐＸＴ１）可以作为预防幼畜腹泻的菌苗候选株。 相似文献