牛传染性鼻气管炎病毒gE基因SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立     

孙志明  周伟光  陈玉惠  高晶  希尼尼根  关平原 《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》2012,33(3):5-8

目的 建立1种特异、灵敏、高效的检测IBRV gE基因的荧光定量PCR方法,并为鉴别IBRV野毒株和gE基因缺失疫苗株的感染提供技术手段.方法 根据IBRV gE基因保守序列,设计一对引物,建立荧光定量PCR反应体系和反应条件,利用10倍梯度稀释病毒DNA进行荧光定量PCR扩增,以检测本试验建立的荧光定量PCR的灵敏度.用IBRV、牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒、MDBK细胞、牛血清等进行特异性检测.用模拟样品进行临床应用试验.结果 本试验建立的荧光定量PCR方法,其灵敏度约为70 DNA拷贝/μL,除了IBRV从其他病毒和样品未扩增出曲线,临床模拟样品检测结果为0.03TCID50.结论 本试验建立的荧光定量PCR方法具有特异性强、灵敏性高、快速,低污染等优点,因此临床上可以用于IBRV的检测和病原学调查.  相似文献   

人工感染鸭病毒性肠炎急性病例细胞凋亡的电镜研究     

袁桂萍  程安春  汪铭书  周毅  刘菲  郭宇飞  韩晓英  廖永洪  徐超  周伟光  文明  贾仁勇  陈孝跃 《畜牧兽医学报》2005,36(11):1174-1177

应用透射电镜和超薄切片技术观察鸭病毒性肠炎病毒（Duck Enteritis Virus，DEV）CH强毒株人工感染成年鸭各组织器官的形态学特征。结果表明，脾脏、胸腺、法氏囊、十二指肠固有层中淋巴细胞除了坏死变化外还有很明显的凋亡变化，两者往往同时存在。疾病过程中，淋巴细胞凋亡数量明显增多。凋亡细胞的形态学改变是细胞体积缩小，细胞器结构正常，染色质初期浓集成团，聚集于核膜的周边，随后出现染色质凝聚，核碎裂以及凋亡小体形成等现象。淋巴细胞的坏死和凋亡共同造成了淋巴细胞的大量损耗，淋巴细胞的这种变化可能在鸭病毒性肠炎的发病机制中起着重要的作用。研究结果表明DEV急性感染可诱导成年鸭体内淋巴细胞的凋亡。  相似文献   

鸭病毒性肠炎病毒CH强毒株感染鸭胚成纤维细胞的超微结构观察   总被引：4，自引：0，他引：4  

郭宇飞  程安春  汪铭书  周伟光  文明  贾仁勇  袁桂萍  徐超  韩晓英  廖永洪 《中国兽医学报》2005,25(6):632-635

通过超薄切片和透射电子显微镜技术对鸭病毒性肠炎病毒（DEV）CH强毒株在鸭胚成纤维细胞（DEF）中的形态结构进行了研究。结果发现，DEVCH强毒株病毒核酸呈圆形颗粒状，直径35～45nm，在胞核内常集中分布；病毒核衣壳呈圆形．直径90～100nm．在胞核和胞浆内都有分布；DEV核衣壳可根据所含核酸形态的差异分为空心核衣壳、内壁附有颗粒型核衣壳、同心圆形核衣壳和实心核衣壳；成熟的病毒粒子具有囊膜和皮层结构．呈圆形．直径150～300nm，存在于胞浆空泡内；DEV可在DEF中分别形成胞浆内和胞核内包涵体结构；伴随子代病毒在细胞内的出现，胞浆内迁出现豆英状、马蹄形、半圆形、圆形、同心圆形等与病毒发生有关的电子致密结构。  相似文献   

鸭瘟病毒弱毒株在免疫雏鸭体内的分布和排毒规律   总被引：9，自引：5，他引：9  

程安春  汪铭书  刘菲  宋涌  袁桂萍  韩晓英  徐超  廖永洪  文明  周伟光  贾仁勇 《中国兽医学报》2005,25(3):231-233,258

鸭瘟病毒(DPV)弱毒Cha株经皮下、口服和滴鼻3种途径免疫1日龄雏鸭，应用聚合酶链反应(PCR)检测了病毒在体内分布和排毒规律。Cha株免疫雏鸭后，对血液、心、肝、脾、肺、肾、十二指肠、直肠、法氏囊、胸腺、胰腺、延脑、大脑、小脑、舌、肌肉、骨髓、粪便和食道共19种组织PCR检测结果如下：(1)皮下接种雏鸭后4h，即可在心、肝、脾、肾、法氏囊、胸腺、胰腺、延脑、大脑和小脑共10种组织中检出DPV的DNA；8h后，所有采取的组织器官均可检测到DPV的DNA。(2)口服接种雏鸭后4h，可在舌和食道中检测到DPV的DNA；8h后，可在心、肝、脾、肾、胸腺、胰腺、延脑、大脑、小脑、舌、食道和血液共12种组织器官中检出DPV的DNA。(3)滴鼻接种雏鸭后4h，未能在各种组织中检出DPV的DNA；8h后，可在心、肝、脾、肾、胸腺、延脑、大脑、小脑、舌、食道和血液共11种组织中检测到DPV的DNA。(4)在3种免疫途径中，检出时间最早和检出率最高的组织器官为肝脏、脑(大脑、小脑和延脑)；3种途径免疫的鸭，从免疫后12h至21d均能从所有采集的组织中检测出DPV DNA。  相似文献   

一起某公路检查站被举报存在敲诈勒索问题的调查与处理     

姚源锋  邓朝阳  朱贤龙  周伟光  覃湛源 《中国动物检疫》2007,24(12):4-5

1案件来源2007年1月8日,自治区动物卫生监督所收到自治区信访部门转来曾X的举报材料,反映其委托的司机莫X于2006年9月13日运载冷冻  相似文献   

基于Plone／Zope内容管理系统构建图书馆信息服务平台     

周伟光 《农业图书情报学刊》2011,23(11):199-201,217

详细介绍了Hone／Zope内容管理系统的含义、基本特征及安装过程。深入地探讨了利用Hone／Zope内容管理系统构建图书馆信息服务平台的内容和利用这个平台为广大读者提供信息服务的各种方法。  相似文献   

小鹅瘟GPV-CHa15弱毒株培育及其特性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

程安春  汪铭书  富军  刘菲  周伟光  文明  贾仁勇  郭宇飞  韩晓英  廖永洪  徐超  陈孝跃  周毅 《中国兽医杂志》2005,41(11):13-17

小鹅瘟（GP）是由小鹅瘟病毒（GPV）引起的雏鹅急性或亚急性的败血性传染病。本病主要侵害出壳后4～20日龄的雏鹅，具有传播快、发病率和致死率高的特点，死亡率可达90％～100％。随着雏鹅日龄增长而发病率和致死率下降。方定一（1956）首先在我国发现本病，1965年后，匈牙利、德国、荷兰、前苏联、意大利、英国、法国、南斯拉夫、越南、以色列等国家先后报道了该病的存在，目前世界许多饲养鹅及番鸭地区都有本病的发生。  相似文献   

鸭病毒性肠炎病毒致鸭胚成纤维细胞发生凋亡作用的研究     

郭宇飞  程安春  汪铭书  贾仁勇  文明  周伟光  陈孝跃 《中国家禽》2007,29(14):9-11

研究通过HE染色镜检发现,鸭病毒性肠炎病毒CH强毒株(DEV-CHv)可致鸭胚成纤维细胞(DEF)出现染色质颗粒化、细胞核变形等显著凋亡特征;TUNEL试验显示,接毒组细胞核内有多量棕黄色DAB显色颗粒,表明细胞出现了凋亡现象;DNA Ladder检测表明,接毒组细胞具有分子量分别为180～200bp及其整数倍的凋亡梯带电泳图谱特征;电镜观察发现,接毒组细胞具有染色质浓缩、边移,胞浆严重空泡化,细胞核严重变形,形成凋亡小体等典型凋亡特征.上述研究结果表明鸭病毒性肠炎病毒具有显著的致鸭胚成纤维细胞发生凋亡的作用.  相似文献   

黄瓜自动分级系统的研制   总被引：1，自引：2，他引：1  

周增产  张晓文  吴建红  周伟光 《农业工程学报》2003,19(5):118-121

该文回顾了农产品分级的机器视觉技术，提出了黄瓜分级的标准。开发了机器视觉系统，包括照明、彩色CCD像机、抓取架、微机、图像监视器、挑选机器人和传送带。设计了分级系统的软硬件设备。  相似文献   

靶向TLR9基因siRNA的筛选及其对BHV-1增殖规律的影响     

呼凤丽  徐丽媛  张志飞  周伟光 《中国畜牧兽医》2017,44(2):303-310

为研究牛胚胎气管（bovine embryonic tracheal,EBTr）细胞Toll样受体9（Toll-like receptors 9,TLR9）在牛疱疹病毒Ⅰ型（bovine herpesvirus type 1,BHV-1）感染的天然免疫反应中的作用,本试验利用小分子干扰RNA（siRNA）技术,以TLR9为靶向分别设计并合成3条siRNA干扰序列,用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术检测应用siRNA-TLR9干扰后TLR9基因的表达变化,筛选出最佳的siRNA-TLR9干扰序列,继而转染EBTr细胞使其TLR9基因沉默后感染BHV-1,用TaqMan实时荧光定量PCR方法检测BHV-1不同时间点的增殖变化。结果显示,转染48 h后,与阴性对照组相比,siRNA-TLR9A、siRNA-TLR9B和siRNA-TLR9C分别对TLR9 mRNA表达量下调了60.90%、24.05%和40.75%。筛选出siRNA-TLR9A片段在12~72 h可以显著抑制TLR9 mRNA表达（P < 0.05）。用该片段转染EBTr细胞再感染BHV-1后,6~72 h siRNA-TLR9A组BHV-1 DNA拷贝数低于对照组。本试验成功筛选出了特异性的抑制EBTr细胞TLR9基因的siRNA序列,并证明抑制TLR9的表达可降低BHV-1的增殖能力。  相似文献