犬细小病毒性肠炎弱毒疫苗的研究     

夏咸柱  叶俊华  范泉水  殷震  武银莲  程鸿  王允海  刘海涛  魏国庆  刘蕙芬  周向阳 《中国兽医学报》1989,(4)

选用从犬科动物貉中分得的貉细小病毒CR86106株为种毒,用猫肾传代细胞F81系培养增殖,制成犬细小病毒性肠炎弱毒疫苗(M-CPV)。该苗对猪红细胞的HA效价平均156,对F81细胞系的TCID_(50)平均为4.02。对离乳幼犬的最低免疫剂量为5×10~(3·8)TCID_(50)。苗注后2周即可获得免疫,血清HI抗体达32即可抵抗CPV强毒感染。疫苗的免疫期为1年。于-15℃以下冰盒保存,疫苗的有效期为9个月。CR80106株遗传性稳定,经CPV易感幼犬和F81细胞系连续传5代和22代,对犬的安全性和免疫原性不变。病毒蛋白经SDS—PAGE和HPLC分析,均未发现与原始毒株有不同。M-CPV对母源抗体干扰有较强的抵抗力,母源抗体达32的幼犬,100％可对该亩产生免疫应答。HI抗体<2的CPV易感幼犬接种该苗后除粪便轻度阳转外,无其他异常,同居CPV易感幼犬也不会感染发病。两次免疫后作同居感染攻毒,可获得完全保护,不会由粪便排出强毒。于产前20d给怀孕母犬接种,也未见有流产、早产、死胎和弱胎现象发生,所产仔犬全部生长发育正常。全国16个军、警犬场队用本疫苗累计免疫各类犬3320只,全部安全,没有一只因注苗而发病,经1～2年临床观察,3296头获得保护,保护率为99.28％。  相似文献   

应用微量补体结合试验诊断犬传染性肝炎的研究     

夏咸柱  孙永祥  赵吉成  陈跃明  王永贤  许贺琛  杨盛华  武银莲  殷震  刘作臣 《中国兽医学报》1985,(1)

以犬传染性肝炎病毒(ICHV)及其免疫血清分别作为已知抗原和抗体,应用微量补体结合试验(MCFT),检测急性期病犬血清、腹水或肝浸液中的ICHV抗原,或恢复期犬血清中的ICHV抗体,以确定诊断。结果,在ICHV抗原检测中,被检的35例实验感染犬和2例自然病犬的20份血清、18份腹水和36份肝浸液以及3份ICHV犬肾细胞培养物,除1份血清判为疑似外,其余均为ICHV抗原阳性。而健康对照犬的30份血清、8份腹水和20份肝浸液以及大细小病毒(CPV)、犬轮状病毒(CRV)和大瘟热病毒(CDV)的细胞培养物各3份,均为ICHV抗原阴性。在抗体检测中,被检的20份自然和实验感染犬早期血清均为阴性,30份临床健康犬血清中20份具有8～64~×的ICHV抗体效价。 MCFT的特异性和敏感性都比较好,可以用于ICHV的临床诊断和流行病学调查。  相似文献   

犬痢汤对实验性犬细小病毒性肠炎的疗效     

陈世铭  夏咸柱  陈红 《中兽医医药杂志》1985,(4)

犬细小病毒性肠炎是犬的一种出血性胃肠炎,自1977年分离出本病病毒(C.P.V)以来,已报道在许多国家流行,在国内亦不断发生,是对军犬、警犬和民犬危害最大的疾病之一。目前本病尚无特效疗法,对症治疗效果也不甚满意。为探讨用中药治疗本病,我们进行了本实验。  相似文献   

动物细小病毒感染症快速诊断盒研制成功     

夏咸柱 《中国兽医学报》1986,(1)

近年来,通过病毒分离鉴定,发现犬细小病毒性肠炎、猫泛白细胞减少症和水貂、貉出血性肠炎等细小病毒感染症,在我国的军犬、警犬、狮、虎、豹、猫以及水貂、貉等犬科、猫科、鼬科动物中广为存在,危害严重。为能迅速确定诊断,及时采取有效防疫  相似文献   

犬瘟热病毒H、F、N基因试验免疫研究   总被引：6，自引：1，他引：6  

闫芳  夏咸柱  扈荣良  谢之景  赵忠鹏  高玉伟  黄耕 《畜牧兽医学报》2006,37(1):50-55

以构建的真核表达载体pVAXLPH、pVAXLPF和pVAXLPN为基因疫苗,分组进行了免疫小鼠试验,对免疫鼠体内免疫应答水平进行了检测。结果显示:所构建的基因疫苗可以诱导小鼠产生特异性免疫应答反应,pVAXLPH pVAXLPF pVAXLPN 3个基因混合免疫小鼠诱导产生了较强的体液免疫和细胞免疫应答,免疫3次后血清中抗CDV ELISA抗体效价为0.332,而免疫前为0.158;抗CDV中和抗体效价为1∶(4~16);CD4 T/CD8 T比值为2.05±0.38,而对照组为1.99±0.56;免疫小鼠脾细胞对CDVLP及ConA刺激的增殖反应值分别为0.384和0.356。基因疫苗免疫犬试验中,进行了单用基因疫苗免疫和基因疫苗与CDV弱毒疫苗联合免疫效果的比较研究。结果显示,基因疫苗免疫3次后,血清中抗CDV ELISA抗体效价为0.296,抗CDV中和抗体效价为1∶(8~32)。基因疫苗免疫2次,再使用弱毒疫苗加强免疫1次,血清中抗CDV ELISA抗体效价为0.433,抗CDV中和抗体效价为1∶(16~64)。  相似文献   

犬细小病毒四川株的分离与鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

戈锐  彭广能  夏咸柱  杨松涛  苏建青  邹啸环  冯娜  马晓平  石锦江 《中国预防兽医学报》2007,29(11):836-839

为更好地了解我国细小病毒流行情况,笔者从四川农大动物医院采集5份患出血性肠炎犬的粪便,通过猫肾细胞(F81)传代培养后,成功分离到两株犬细小病毒。对两株病毒进行病毒形态学、理化学、血凝试验、PCR鉴定与分子生物学系统鉴定后,证实分离株是犬细小病毒,通过VP2结构蛋白测序分析表明,新分离到的两株细小病毒抗原型分别属于CPV-2a和CPV-2b。  相似文献   

表达扎伊尔型埃博拉病毒囊膜糖蛋白重组水泡性口炎病毒的构建     

宋坤  王喜军  温志远  葛金英  冯娜  胡旭乐  陈伟业  高玉伟  夏咸柱 《中国预防兽医学报》2013,35(6)

埃博拉病毒(EBOV)能够引起一种人畜共患急性出血性传染病,即埃博拉出血热.研制安全、有效的抗病毒疫苗具有重要意义.本研究利用水泡性口炎病毒(VSV)印第安纳株反向遗传操作系统,构建并拯救得到表达扎伊尔型埃博拉病毒(ZEBOV)囊膜糖蛋白GP的重组VSV (rVSV-ZEBOV-GP),通过westemblot和免疫荧光试验证明在重组病毒中ZEBOV GP蛋白获得正确表达;动物试验显示重组病毒对小鼠高度安全;中和试验结果表明重组病毒能诱导小鼠产生针对ZEBOV囊膜糖蛋白GP嵌合VSV假病毒粒的特异性中和抗体.本研究表明rVSV-ZEBOV-GP作为防控ZEBOV的储备性疫苗具有潜在的应用价值.  相似文献   

西方马脑炎病毒E2蛋白的免疫原性研究     

马金柱  王化磊  郑学星  吴红霞  王铁成  高玉伟  杨松涛  夏咸柱 《中国预防兽医学报》2013,35(8):654-657

为研究西方马脑炎病毒(WEEV)囊膜E2蛋白的免疫原性,本研究通过诱导重组菌pET30-E2/E.coliBL21表达E2蛋白,将纯化的重组蛋白与弗氏佐剂乳化制备免疫原免疫小鼠,免疫剂量为50μg/只。二免后实验组小鼠体内CD4+/CD8+T细胞比例为3.38±0.19,细胞因子IL-2、IL-4及IFN-γ浓度分别为195.7±14.5 pg/mL、248.2±16.2 pg/mL与315.8±13.3 pg/mL;三免后实验组小鼠淋巴细胞增殖指数(PI)检测结果显示:ConA刺激组为2.18±0.17,E2蛋白刺激组为1.56±0.15;其特异性抗体IgG效价为1∶640。以上实验组各项免疫指标均与对照组呈显著差异(p<0.05),表明E2蛋白能够刺激小鼠产生较强免疫反应,具有较强免疫原性。本研究为WEEV基因工程亚单位疫苗研制奠定了良好基础。  相似文献   

野鸭源H6N1亚型禽流感病毒全基因的克隆及序列分析     

丁洁  桑晓宇  程凯慧  于志君  张坤  柴洪亮  王铁成  高玉伟  夏咸柱 《中国兽医学报》2013,33(3):394-399

扩增、克隆H6N1亚型禽流感病毒(AIV) A/ mallard/ Sanjiang/275/2007(M-275)的全基因序列,进行序列分析,并探讨该病毒的进化特点.设计特异性引物,扩增克隆2007年从三江自然保护区野鸭身上分离到的H6N1亚型AIV,测序后进行序列分析.同源性分析发现,M-275与H6亚型和N1亚型AIV同源性最高,说明M-275为H6N1亚型.其裂解位点为PQIETR↓G,无连续碱性氨基酸的插入,说明M-275属于典型的低致病性毒株.通过序列比对,M-275的HA基因与2000年以后北美以及中国地区分离到的H6亚型AIV同源性在97％以上,与HA基因同源性最高的毒株为A/northern pintail/Alaska/44202-143/2006 (H6N1)和A/northern pintail/Alaska/44204-158/2006(H6N4),与NA基因的核苷酸同源性最高的毒株是A/mallard/ON/499/2005(H5N1),推测M-275的NA基因片段来自于该病毒谱系.进化分析结果显示,HA基因与美国、日本、中国等国家和地区流行的N1、H2、N4、N8和N9等亚型毒株处于同一分支;NA基因与美国、日本等国家和地区流行的H2、H5、H6、H11、H3等亚型毒株处于同一分支;PB1基因与美国、日本等国家和地区流行的毒株处于同一分支;而PB2、NP、M以及NS基因则与日本、韩国、香港和中国地区的病毒株处于同一分支;PA同中国地区和澳大利亚、马来西亚、瑞典等国家的毒株处于同一分支.M-275毒株基因组构成来源复杂,NA基因和NP基因分别与野鸭源的H5N1和HIN1等毒株同源性很高,表明H6亚型禽流感病毒也在不断的发生重排,值得深入研究.  相似文献   

TaqMan探针实时荧光定量PCR诊断犬瘟热病毒方法的建立     

苏建青  郑学星  候小强  岳妙姝  夏咸柱 《勤云标准版测试》2007,(11)

根据犬瘟热病毒核蛋白基因的保守序列分别设计一对引物及其相应的Taqman探针建立荧光定量PCR。构建FQ-PCR绝对定量的标准品,并对反应体系进行优化,建立绝对定量的标准曲线。利用十倍稀释法检验方法的灵敏度并与普通RT-PCR法进行比较;特异性检验后进行临床标本的检验。结果显示:实验成功构建了绝对定量的参照质粒,标准曲线相关系数为0.994。犬瘟热病毒FQ-PCR检测反应的灵敏度为10TCID50;5种非犬瘟热病毒病原体检测均为阴性;说明实验建立的FQ-PCR具有快速、灵敏和稳定的特点,适用于临床样品的检验。  相似文献