北京油鸡胚胎成纤维细胞系建立与生物学特性研究   总被引：12，自引：3，他引：12  

周向梅  马月辉  关伟军  文杰  李晗 《畜牧兽医学报》2005,36(3):209-215

采取组织块直接培养法，对北京油鸡胚胎组织进行原代和继代培养，成功地建立了成纤维细胞系。并对培养细胞进行了形态学、细胞生长动力学观察，以及核型和乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶的同工酶分析。结果表明，该细胞系的群体倍增时间(PDT)为24h；细胞染色体中二倍体占主体，为76％～88％；乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶同工酶电泳图谱与本室其它细胞系有明显差别；细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性。该细胞系的建立，使北京油鸡这一国家重要种质资源在细胞水平上保存下来，也为基因组文库和体细胞克隆等研究提供了理想的生物材料。  相似文献   

穿心莲内酯影响猪链球菌生物被膜形成   总被引：1，自引：0，他引：1  

王金玉  姜晓文  王娜  王婕然  于苗苗  钟秋  于文会 《畜牧兽医学报》2018,(3)

旨在探究穿心莲内酯对猪链球菌生物被膜形成的抑制作用,为猪链球菌病的耐药性提供替代疗法。试验采用微量稀释法测定穿心莲内酯对猪链球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);利用结晶紫染色(CV)和扫描电镜(SEM)检测穿心莲内酯对猪链球菌生物被膜形成的影响。结果表明:1)穿心莲内酯对猪链球菌的MIC和MBC分别为0.25和0.5mg·mL~(-1);2)扫描电镜观察可见阴性对照组细菌镶嵌于生物被膜中,而穿心莲内酯在亚抑菌浓度下(1/2MIC、1/4MIC、1/8MIC)能使细菌生物被膜中的细菌数量和生物被膜形成量均减少,并呈剂量依赖性;3)luxS基因和毒力基因的RT-PCR检测显示亚抑菌浓度(1/2MIC、1/4MIC)的穿心莲内酯明显降低gapdh、sly、fbps、ef和luxS基因的转录,显著增加cps2J、mrp和gdh基因的转录;4)哈维氏弧菌生物发光法测定细菌培养液显示穿心莲内酯在亚抑菌浓度下(1/2MIC、1/4MIC、1/8MIC)对猪链球菌AI-2信号分子的产生有抑制作用,呈剂量依赖性。穿心莲内酯亚抑菌浓度的干预可抑制猪链球菌生物被膜的形成,并且可致毒力基因表达水平差异。  相似文献   

检测鸡TRIM25蛋白的免疫组化方法     

禇颖  马文杰  胡卫国  陈茹  邱建华  郭慧君  李宏梅 《畜牧兽医学报》2018,(4)

为建立检测鸡TRIM25蛋白表达的免疫组化方法,根据发表的鸡TRIM25基因序列,设计引物,从海兰褐鸡脾中扩增TRIM25基因,构建重组原核表达质粒,通过诱导表达获得重组TRIM25蛋白,经纯化后免疫接种兔和小鼠,获得高效价血清抗体,用该抗体建立免疫组化方法,对鸡肺、脾、肝组织中TRIM25蛋白进行检测。结果显示,克隆的鸡TRIM25抗原基因大小为1 012bp,构建的重组表达质粒能够在大肠杆菌中稳定表达,经纯化后的重组蛋白质能够诱导兔和小鼠产生效价为1∶106以上的血清抗体,该血清抗体免疫组化检测发现鸡肺、脾和肝组织中均有不同程度的TRIM25蛋白表达,在肺组织中主要存在肺泡周围的内皮细胞、淋巴细胞等的细胞质内;脾组织主要出现在脾淋巴细胞和血管内皮细胞等的细胞质中;肝组织中主要出现在肝小叶肝细胞、淋巴细胞以及血管内皮细胞细胞质中。该研究为深入研究鸡TRIM25蛋白的组织分布、动态表达和生物学活性提供物质基础和方法依据。  相似文献   

猪流行性腹泻病毒胶体金检测方法的建立     

汪怿旸  赵振鹏  赵巍  王姣  郑建高  姜军华  柴文娴  金文杰  秦爱建 《畜牧与兽医》2018,(4):100-105

应用胶体金免疫层析技术,建立了一种快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体m Ab-PEDV1C12和(m Ab)-PEDV2C11,并将m Ab-PEDV2C11和羊抗鼠Ig G抗体喷在硝酸纤维素膜上分别作为检测线和质控线,对pH值、抗体浓度、封闭时间等条件摸索与优化。测试结果表明,该猪流行性腹泻病毒快速检测试纸条的检测下限达到310个TCID50的病毒量,检测时间为10 min,批内和批间重复性为100%。结论:该方法使用简单快速,适合猪场检测猪流行性腹泻病毒。  相似文献   

饲料亮氨酸水平对幼草鱼生长、饲料利用及体成分的影响     

黄爱霞  孙丽慧  陈建明  沈斌乾  姜建湖 《饲料工业》2018,(2)

以鱼粉和晶体氨基酸混合物为蛋白源,制作7组亮氨酸梯度水平分别为9.65、12.05、14.98、17.31、20.06、22.88、25.60 g/kg的等氮等能半精制饲料,饲喂初始体重为2.25 g的草鱼幼鱼70 d,试验结果表明:饲料亮氨酸水平对鱼体增重、饲料效率和蛋白质积累率均有显著影响(P0.05)。草鱼鱼体增重随饲料亮氨酸水平的提高而显著增加,当饲料亮氨酸水平达14.98 g/kg干饲料时,继续增加饲料亮氨酸水平,草鱼鱼体增重则不再有显著变化。草鱼幼鱼饲料效率和蛋白质积累率表现出同鱼体增重相同的趋势。饲料亮氨酸水平对草鱼全鱼必需氨基酸、总氨基酸以及鱼体组成无显著影响(P0.05)。饲料亮氨酸水平对草鱼肝脏谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活力均无显著性影响(P0.05)。分别以鱼体增重、饲料效率和蛋白质积累率为指标,以折线回归模型分析,求得草鱼幼鱼对饲料亮氨酸的需求量为15.17~15.29 g/kg干饲料,约占饲料粗蛋白的4.68%~4.71%。  相似文献   

三株乳酸杆菌的分离鉴定与益生特性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

梁东梅  李玉鹏  杜艳芬  朱琪  安建勇  崔茂盛  李治欣  乔家运  杨卓婧  王文杰  李海花 《中国饲料》2018,(11)

本研究通过分离鉴定猪肠道内乳酸杆菌并对其益生特性进行比较分析,旨在为乳酸杆菌在仔猪饲粮中的应用提供科学依据。试验选取健康猪粪便,利用选择性培养基进行厌氧培养和单克隆纯化,共获得三株乳酸杆菌,通过生化鉴定、16Sr RNA基因序列测定和同源性分析,确定分离菌株分别为植物乳杆菌、唾液乳杆菌、嗜酸乳杆菌;采用牛津杯法、活菌计数法和细胞试验等研究三株乳酸杆菌体外抑菌活性、黏附性及竞争性黏附猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)的益生特性。结果表明:与对照组相比,三株乳酸杆菌培养上清液的抑菌圈直径(P0.01)和抑菌效果(P0.01)差异均极显著,并且以植物乳杆菌培养上清液的抗菌效果为最佳;三株乳酸杆菌均可黏附于IPEC-J2细胞,并且以植物乳杆菌黏附IPEC-J2的菌数为最多;与对照组相比,三株乳酸杆菌对大肠杆菌黏附IPEC-J2细胞均具有抑制作用(P0.01),并且以植物乳杆菌抑制黏附的效果最好。  相似文献   

乙烯对匍匐翦股颖ISR抗病反应中AsA-GSH循环及胼胝质沉积的影响     

姜寒玉  王亚峰  徐明  甘培文  张金林  马晖玲 《草业学报》2018,27(9):120-131

以匍匐翦股颖品种“Penn-A4”为试验材料,侵染立枯丝核菌后,经丁二醇(BDO)诱导产生系统抗性(ISR),喷施不同浓度的乙烯合成抑制剂氯化钴(CoCl₂)和促进剂1-氨基环丙烷羧酸(ACC)后,检测抗坏血酸-谷胱甘肽(AsA-GSH)循环中抗坏血酸(AsA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量及相关酶活性的变化,并观察匍匐翦股颖ISR反应中胼胝质沉积的变化。结果表明,乙烯抑制剂处理下,匍匐翦股颖幼苗中AsA含量较低,抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性下降,大量GSH被催化还原为氧化型谷胱甘肽(GSSG),GSSG大量积累,同时谷胱甘肽还原酶(GR)活性较低,GSSG经GR少量还原为GSH。乙烯促进剂处理下,AsA含量较高,APX活性升高,GSSG在高活性GR作用下催化还原为GSH,使得GSH大量积累。因此在匍匐翦股颖ISR抗病反应中,高浓度乙烯促进AsA和GSH的大量积累,它们不仅参与了活性氧的代谢平衡,同时也作为信号分子在ISR抗病反应中起着重要作用。匍匐翦股颖感染褐斑病后,胼胝质主要沉积在厚壁细胞、韧皮部、木质部和表皮组织,其中厚壁细胞胼胝质沉积最多,表皮组织沉积最少。此外,胼胝质沉积面积在不同乙烯信号分子处理间存在差异,但随着处理时间的延长差异不显著。一定浓度的乙烯对ISR反应中胼胝质的沉积具有一定的影响,随着处理时间的延长显著增加,在100 μmol·L^-1ACC处理5 d后,胼胝质沉积总面积仅为9.916 mm²,处理10 d后升至最高,为38.396 mm²,但在病害侵染后期,胼胝质数量减少,在100 μmol·L^-1ACC处理15 d后,胼胝质沉积总面积降至20.052 mm²,反映了乙烯信号分子对胼胝质沉积的影响是一种短期效应,短期内可提高匍匐翦股颖植株抗病性,具有信号分子的短时效特点。研究结果为探清匍匐翦股颖ISR抗病响应中ET信号分子如何调控抗病生理特性提供了理论基础。  相似文献   

玉屏风散多糖对仔猪生长性能和血清部分抗氧化指标的影响     

邓缘  蔡文杰  胡雄贵  张星  陈晨  张翠永 《黑龙江畜牧兽医》2018,(2)

为了研究玉屏风散多糖对仔猪生长性能、腹泻率和抗氧化力的影响,试验选用初始体重相近的杜长大三元仔猪120头,随机分为5个处理组,每个处理组4个重复,每个重复6头猪,饲养期21 d。试验Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别在日粮中添加100,200,400,600 mg/kg的玉屏风散多糖。试验结束的第2天对仔猪称重、采血,计算平均日增重、平均日采食量、料重比、腹泻率,检测血清抗氧化指标。结果表明:与对照组相比,4个试验组均可明显提高仔猪的末重和平均日增重;各试验组之间料重比差异不显著(P0.05),但随着玉屏风散多糖添加量的增加而降低。添加玉屏风散多糖能显著降低仔猪腹泻率(P0.05),添加量为100 mg/kg时即可达到显著性差异(P0.05)。随着玉屏风散多糖添加量的增加,仔猪的抗氧化力逐渐增强。试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量均与试验Ⅰ组(对照组)有显著性差异(P0.05);试验Ⅲ、Ⅳ组的总抗氧化能力(TCA)与对照组有显著性差异(P0.05);铜锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)活性与对照组相比无显著性差异(P0.05),但有正向效应的趋势。说明在日粮中添加玉屏风散多糖可提高仔猪的生长速度和平均日增重,降低料重比,同时可减少仔猪腹泻的发生,提高机体抗氧化能力,添加量以400 mg/kg效果较好。  相似文献   

共培养体系中猪骨骼肌卫星细胞对肌内前体脂肪细胞脂质沉积的影响     

马衍旋  王文杰  穆淑琴  席静宁  李宁  郑梓  闫峻  孙超 《动物营养学报》2018,(4)

本试验旨在研究共培养体系中猪骨骼肌卫星细胞对肌内前体脂肪细胞脂质沉积的影响。试验分离培养了猪骨骼肌卫星细胞和肌内前体脂肪细胞,2种细胞分离培养鉴定后,接种于Transwell细胞小室共培养板进行共培养,待细胞密度达到90%以上分别进行诱导分化。骨骼肌卫星细胞诱导分化8 d后,检测肌内前体脂肪细胞分化水平、分化标志基因的表达以及脂质代谢关键酶的表达。结果显示:与肌内前体脂肪细胞单独培养相比,共培养体系内肌内前体脂肪细胞的脂滴数量和脂滴面积极显著减少(P0.01),肌内前体脂肪细胞增殖分化转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ和CCAAT增强子结合蛋白的基因和蛋白表达水平极显著下降(P0.01),肌内前体脂肪细胞的乙酰辅酶A羧化酶、脂肪酸合成酶的基因和蛋白表达水平极显著下降(P0.01)。由此可见,共培养体系中猪骨骼肌卫星细胞对肌内前体脂肪细胞脂质沉积具有抑制作用。  相似文献   

湖南首届规模猪场变异株腹泻成果研讨会在长沙举行     

蔡文杰 《湖南畜牧兽医》2018,(4)

正2018年以来,国内生猪行情低迷,养猪形势更加严峻,"抓环保,促产能,防疫病,降成本,增效益"已是养猪人当下最关注的问题。猪场如何防控冬春仔猪腹泻,如何降本增效,正是养猪人当前迫切关心的问题。8月14日,由武汉科前生物股份有限公司主办的湖南首届规模猪场变异株腹泻成果研讨会暨"2018科前冬季腹泻防控总动员"大会在长沙举行。大会邀请主管部门、行业  相似文献