荧光定量RT-PCR检测雏鸡感染NDV强毒后胸腺和法氏囊中TLR2与TLR4 mRNA的表达   总被引：2，自引：0，他引：2  

侯巍  岳华  汤承 《中国预防兽医学报》2010,32(4)

Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)在识别病原微生物过程中发挥重要作用。为了定量检测TLR2、TLR4 mRNA表达水平,研究病原与机体的相互作用,本研究建立了检测鸡TLR2、TLR4 mRNA表达水平的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,检测了新城疫病毒强毒(vNDV)感染SPF雏鸡后36h、48h时胸腺、法氏囊中TLR2、TLR4 mRNA表达量变化。结果显示该方法特异性好,RRT-PCR产物分别在85.5℃、83.3℃出现单特异峰,对TLR2、TLR4的扩增效率分别为105.91%和95.30%,相关系数分别为0.9980、0.9996,最低检测限分别为108拷贝/反应和461拷贝/反应。感染后36h vNDV显著抑制TLR2、TLR4基因在法氏囊、胸腺中的表达;感染后48h时,法氏囊、胸腺中TLR2基因的表达水平显著升高,胸腺中TLR4基因的表达显著升高,而法氏囊中TLR4基因的表达仍处于抑制状态。本研究证明TLR2和TLR4参与了鸡体对NDV的感染应答。  相似文献   

新城疫病毒HN基因功能结构域的原核表达   总被引：1，自引：1，他引：0  

俞宁  张兆敏  岳华 《中国畜牧兽医》2011,38(8):89-92

本研究对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)分离株sc05的HN基因进行了克隆、序列测定,在此基础上将其C端功能结构域76－571 aa片段亚克隆到pET32a(＋)表达载体上,构建重组表达质粒pET32a-HN,鉴定正确后转化进BL21 plysS(DE3)细胞,筛选出阳性克隆,用1 mmol/L IPTG 诱导表达,并对表达产物进行鉴定。SDS-PAGE电泳结果显示,HN基因功能结构域片段在 BL21 plysS(DE3)细胞中实现融合表达,表达产物大小约为76 ku,Western blotting试验证实其能与NDV阳性血清反应。本研究为进一步研究HN蛋白功能结构域的免疫原性和研制鸡新城疫HN基因工程疫苗奠定了基础。  相似文献   

禽A型多杀性巴氏杆菌的分离和鉴定   总被引：2，自引：0，他引：2  

杨发龙  张焕容  夏梦芸  于学辉  汤承  岳华 《四川畜牧兽医》2008,35(5):20-22

2007年9月,某鸡场5000只70多日龄土杂肉用鸡群爆发一急性死亡病例,根据发病情况和病理变化,结合病原分离、动物试验、生化试验及PCR技术证实该鸡群爆发疾病为荚膜A型多杀性巴氏杆菌引起的禽霍乱.  相似文献   

“天王饮”保健机理的研究     

汤承  岳华  李键  靳亚平  周乐 《动物医学进展》1998,(3)

按大、中、小三组剂量给公兔灌服“天王饮”提取物。用药３０ｄ后试验组血浆睾酮浓度极显著地高于对照组（７．３８±７．０２ｎｇ／ｍＬ，１．０１±０．３１ｎｇ／ｍＬ，Ｐ＜０．０１），高剂量组睾酮水平略高于中、低剂量组但差异不显著（Ｐ＞０．０５）。试验组外周血淋巴细胞转化率显著或极显著高于对照组（Ｐ＜０．０５ｏｒＰ＜０．０１）。腹腔巨噬细胞激活、增殖试验表明，试验组巨噬细胞剌激指数和增长指数均显著高于对照组（３．５９±０．２７，１．８７±０．２８；２．６５±０．４３，１．１４±０．１０，Ｐ＜０．０５），不同剂量组间差异不显著。试验组睾丸实质重量显著高于对照组（４．６５±１．３８ｇ，３．４１±０．９０ｇ，Ｐ＜０．０１），但剂量间差异不显著。以上结果表明，“天王饮”能提高兔子的免疫机能，并具有促性腺激素样作用，提高动物的性激素水平并促进性腺发育，从而表现其养生、保健作用。  相似文献   

干酪生产中微生物分布与溯源分析的研究     

梁雅洁  ;何香婷  ;岳华  ;陈历俊  ;姜铁民  ;刘继超 《中国奶牛》2014,(10):47-52

为进行干酪生产中NSLAB等微生物溯源体系的研究，2013年间，笔者对北京市两家干酪生产厂家的环境和生产设备，如料斗车、干酪槽、浸酶池、灌装间墙壁、切刀、压榨机、包装机和盐渍机等进行了大量采样分析和调查，并对采集样品中分离出的目的菌株进行了生理生化鉴定及分析。研究结果表明，干酪生产环境中的主要微生物有枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、微球菌和马克斯克鲁维酵母等。在此基础上，研究者对各种来源样品中的微生物利用16SrRNA分子生物学技术建立了目的菌株来源系统发育树，以此来进行基因序列比对分析，确定了干酪生产中多种微生物的主要来源，为建立干酪生产中NSLAB溯源体系提供了条件。  相似文献   

绵羊肺炎支原体延伸因子Tu基因的分子特性分析     

尹正军  岳华  汤承 《畜牧兽医学报》2015,(2):288-294

对绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)参考菌株Y98株和11个临床分离株的tuf基因进行克隆、测序,生物信息学分析及构建进化树,分析绵羊肺炎支原体tuf基因的分子结构特性。结果表明:Y98株和11株分离株tuf基因编码区全长1 209bp,编码402个氨基酸,氨基酸相似性为93.3%~100%,有较高的抗原指数和抗原表位,不含信号肽,平均GC含量为39.80%。Y98株与10个分离株延伸因子Tu存在1个跨膜区,含有6种不同的功能位点。而一分离株该蛋白质存在2个跨膜区,在271—274位点多出1个N-糖基化位点。12个菌株的tuf基因有117个单核苷酸突变位点,其中无义突变为41个,有义突变为76个,造成53个推导的氨基酸变化,主要发生在325—354位点靠近羧基端,有可能导致该蛋白质功能的改变。基于该基因的遗传进化与全基因组建立的进化关系一致,比16SrRNA基因更适合作为绵羊肺炎支原体进化关系的分子靶标。该基因种内保守同时也存在遗传多样性,作为分子分型的潜力值得进一步研究。  相似文献   

招标代理机构绩效评估研究     

岳华  魏怀斌 《技术与市场》2011,(8)

通过对招标代理机构存在的问题进行分析,针对问题和有关法律法规设计了绩效评估的指标,简述了各种评估方法的优缺点,建议选用层次分析法进行绩效评估,从而对招标代理机构进行约束和评价选优。  相似文献   

副猪嗜血杆菌的分离鉴定     

陈小飞  岳华  张彬  杨帆  夏梦芸  刘海燕  汤承 《养猪》2009,(1):54-56

某猪场70日龄仔猪发生以呼吸困难、多发性关节炎和多发性浆膜炎为特征的传染病,从1头濒死猪心血和胸腔渗出液中各分离出1株有多形性趋势的革兰氏阴性小杆菌,生化试验和PCR鉴定为副猪嗜血杆菌;挑选心血分离株以1．5×10^10CFU／只腹腔接种,可引起成年豚鼠发病死亡（2／3）,剖检可见胸腔与腹腔积液、纤维素性心包炎、肝周炎,从心血、胸腔积液、腹腔积液、脑、肝脏及肺脏回收到该菌。  相似文献   

牛环曲病毒研究进展     

赵龙  李昊  汤承  岳华 《畜牧兽医学报》2021,52(10):2753-2761

牛环曲病毒（bovine torovirus,BToV）是套式病毒目（Nidovirales）托巴套氏病毒科（Tobaniviridae）环曲病毒属（Torovirus）的成员,是重要的牛腹泻病原。该病毒对呼吸道和消化道具有双重组织嗜性,也是一种可能的呼吸道致病因子。BToV已经在中国、美国、日本等17个国家检出,具有广泛的地域分布。该病毒在国内是新发病毒,本文就BToV的分子生物学特性、流行概况、所致疾病的临床症状与病理变化、检测方法等研究进展做一综述,以期为BToV的研究提供参考。  相似文献   

转基因植物生产亚单位疫苗的研究进展(下)   总被引：1，自引：0，他引：1  

岳华  汤承 《四川畜牧兽医》2006,33(3)

植物生产高附加值的医药制品是分子农业的重要研究领域,植物生产疫苗技术,开辟了疫苗生产的新纪元.与传统的动物反应器相比,植物反应器生产可食疫苗具有生产简便、成本低廉、易贮存和运输、使用方便、无需训练有素的医务人员等诸多优势,目前已经用于乙型和丙型肝炎、麻疹、霍乱等二十多种人和动物疫苗的开发研究,至少已有4种疫苗进入了临床实验阶段.本文就转基因植物生产亚单位疫苗的现状、作用机理、优越性、存在的问题和对策进行综述.  相似文献