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5种外来动物疫病并联荧光定量PCR检测方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
根据GenBank中发表的相关病毒的基因序列,通过分析比较小反刍兽疫病毒(PPRV)、非洲猪瘟病毒(ASFV)、西尼罗河热病毒(WNV)、亨德拉病毒(HeV)和尼帕病毒(NiV)的保守区域(PPRV的N基因、ASFV的P72基因、HeV和NiV的H基因,以及WNV的PrM基因),各设计筛选出一套特异性引物和Taqman探针,建立了5种外来动物疫病并联荧光定量RT-PCR检测方法。利用该方法,对103份样本进行了临床检测,结果除阳性对照外,其他均为阴性。检测结果验证了本研究建立的Taqman模式并联荧光定量PCR检测方法具有鉴别诊断的特点,可以作为临床检测这5种病原体的参考方法。 相似文献
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利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达了猪圆环病毒2型Cap蛋白,并对该蛋白的生物活性进行鉴定。PCR获得Cap基因并克隆入pFastBacTMⅠ载体质粒,重组质粒pFastBacⅠ-Cap转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒rBacmid-Cap。以脂质体法将重组杆粒转染对数生长期的Sf9细胞,获得重组杆状病毒。电镜下可见典型的杆状病毒,SDS-PAGE显示,重组病毒表达的Cap蛋白约28ku,间接免疫荧光试验证明,Cap蛋白良好表达并具有免疫反应性,为猪圆环病毒亚单位疫苗的研究奠定了基础。 相似文献
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介绍几个适合大棚栽培的特早熟葡萄品种 总被引:1,自引:0,他引:1
1 6— 12 2 0 0 0年引自北京植物园 ,欧亚种。山东省平度市大泽山地区 4月 10日前后萌芽 ,5月 17日盛花 ,6月 14日开始着色 ,6月 2 6日全熟。从开花到成熟仅 4 0天。平均穗重 5 0 0 g,最大 15 0 0 g,平均单粒重 10 g,最大14g,能切成片 ,果皮紫红色 ,着色一致 ,含糖量 18%。特抗病 ,耐贮运 ,丰产性好 ,一般 666.7m2 (亩 )产 30 0 0 kg左右。大棚栽培一般 3月底成熟。2 京红 1号 2 0 0 0年引自北京植物园 ,欧亚种。在山东省平度市大泽山地区 ,4月 12日萌芽 ,5月 16日盛花 ,6月 2 4日开始着色 ,7月 7日上市。平均穗重 60 0 g,最大 180 0… 相似文献
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鸡卵清蛋白基因5′调控序列表达载体的构建及其在鸡原代输卵管上皮细胞及鸡成纤维细胞的表达 总被引:18,自引:0,他引:18
将氯霉素乙酰转移酶(CAT)基因与鸡卵清蛋白基因上游调控序列融合,构建了pCAT-3-OVP(鸡卵清蛋白基因5′调控序列)表达载体。将构建的载体与脂质体混合后制备转染液,转染鸡原代输卵管上皮细胞和鸡成纤维细胞进行瞬时表达。结果表明,在鸡原代输卵管上皮细胞,转染后48h表达量最高,为0.67μg/L;而在鸡成纤维细胞,不论有无类固醇激素存在,均不表达。结果提示,在输卵管细胞中存在细胞特异性转录因子。 相似文献
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