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81.
将含有蚓激酶基因的表达盒插入到逆转录病毒载体pLNCL中获得了蚓激酶重组逆转录病毒载体,转染泌乳期奶牛乳腺小叶并获得暂时表达。利用脂质体转染PA317包装细胞,G418进行筛选得到了阳性细胞克隆,克隆扩大培养后病毒上清感染NIH3T3细胞进行滴度测定,最高滴度为1×104CFU/mL。进而用病毒上清转染妊娠期奶牛乳腺小叶组织,产后奶样经FAPA法检测表明蚓激酶基因已经整合到奶牛乳腺组织,并能实现相对稳定的表达。  相似文献   
82.
5种外来动物疫病并联荧光定量PCR检测方法的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
根据GenBank中发表的相关病毒的基因序列,通过分析比较小反刍兽疫病毒(PPRV)、非洲猪瘟病毒(ASFV)、西尼罗河热病毒(WNV)、亨德拉病毒(HeV)和尼帕病毒(NiV)的保守区域(PPRV的N基因、ASFV的P72基因、HeV和NiV的H基因,以及WNV的PrM基因),各设计筛选出一套特异性引物和Taqman探针,建立了5种外来动物疫病并联荧光定量RT-PCR检测方法。利用该方法,对103份样本进行了临床检测,结果除阳性对照外,其他均为阴性。检测结果验证了本研究建立的Taqman模式并联荧光定量PCR检测方法具有鉴别诊断的特点,可以作为临床检测这5种病原体的参考方法。  相似文献   
83.
利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达了猪圆环病毒2型Cap蛋白,并对该蛋白的生物活性进行鉴定。PCR获得Cap基因并克隆入pFastBacTMⅠ载体质粒,重组质粒pFastBacⅠ-Cap转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒rBacmid-Cap。以脂质体法将重组杆粒转染对数生长期的Sf9细胞,获得重组杆状病毒。电镜下可见典型的杆状病毒,SDS-PAGE显示,重组病毒表达的Cap蛋白约28ku,间接免疫荧光试验证明,Cap蛋白良好表达并具有免疫反应性,为猪圆环病毒亚单位疫苗的研究奠定了基础。  相似文献   
84.
介绍几个适合大棚栽培的特早熟葡萄品种   总被引:1,自引:0,他引:1  
1  6— 12  2 0 0 0年引自北京植物园 ,欧亚种。山东省平度市大泽山地区 4月 10日前后萌芽 ,5月 17日盛花 ,6月 14日开始着色 ,6月 2 6日全熟。从开花到成熟仅 4 0天。平均穗重 5 0 0 g,最大 15 0 0 g,平均单粒重 10 g,最大14g,能切成片 ,果皮紫红色 ,着色一致 ,含糖量 18%。特抗病 ,耐贮运 ,丰产性好 ,一般 666.7m2 (亩 )产 30 0 0 kg左右。大棚栽培一般 3月底成熟。2 京红 1号  2 0 0 0年引自北京植物园 ,欧亚种。在山东省平度市大泽山地区 ,4月 12日萌芽 ,5月 16日盛花 ,6月 2 4日开始着色 ,7月 7日上市。平均穗重 60 0 g,最大 180 0…  相似文献   
85.
将氯霉素乙酰转移酶(CAT)基因与鸡卵清蛋白基因上游调控序列融合,构建了pCAT-3-OVP(鸡卵清蛋白基因5′调控序列)表达载体。将构建的载体与脂质体混合后制备转染液,转染鸡原代输卵管上皮细胞和鸡成纤维细胞进行瞬时表达。结果表明,在鸡原代输卵管上皮细胞,转染后48h表达量最高,为0.67μg/L;而在鸡成纤维细胞,不论有无类固醇激素存在,均不表达。结果提示,在输卵管细胞中存在细胞特异性转录因子。  相似文献   
86.
87.
伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)是一种极具开发潜力的疫苗载体.PRV基因背景清楚,遗传稳定性强;含有许多病毒复制的非必需基因,外源基因容量大(30 kb);具有广泛的宿主范围,可以感染猪、犬、牛、羊等多种家畜和野生动物.  相似文献   
88.
目前,研究发现已有多种外源基因在伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)中表达,这些外源基因主要是一些猪的传染病病原的抗原基因(猪瘟病毒的E1、E2和猪细小病毒)和筛选标记基因(β-半乳糖苷酶和绿色荧光蛋白等),而对于异种动物致病性抗原[如狂犬病病毒(RV)等]基因的研究尚未见报道.  相似文献   
89.
在对某些基因进行克隆操作的过程中已经发现 ,重组质粒 p T1和 p T2等量混合 ,经 Hind 酶切后的电泳条带分布均匀 ,比较适合作为质粒DNA酶切鉴定的分子量标准物 (Marker) ,并将其命名为 p T1 2 / Hind Marker[1] 。但是该Marker缺少 2 .0 kb左右、1 .0左右以及 0 .5kb以下的  相似文献   
90.
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