狂犬病病毒8202株糖蛋白膜外区真核表达载体的构建及其在DK细胞中的表达   总被引：1，自引：1，他引：0  

袁子国  王晓虎  徐慧娟  张守峰  扈荣良  张秀香 《中国畜牧兽医》2011,38(6):60-63

为了研究狂犬病病毒(rabies virus,RV)糖蛋白(rgp)膜外区在以糖蛋白为免疫原的免疫应答中的作用,提取RV的RNA,通过RT-PCR扩增RV糖蛋白膜外区1375 bp的序列,将其克隆入pMD18-T载体中,经测序比对正确后,通过酶切将其亚克隆入pVAX1表达载体的多克隆酶切位点处,将酶切鉴定正确的阳性重组子命名为pVAX-rgp,构建表达狂犬病病毒糖蛋白膜外区的真核表达载体,在质脂体介导下转染DK细胞观察其表达情况。研究结果表明,经免疫荧光和Western blotting鉴定,有特异性荧光和60 ku条带产生,证明pVAX-rgp载体中的rgp可在DK细胞中表达。本研究通过成功构建狂犬病病毒8202株糖蛋白膜外区的真核表达载体,为下一步有关功能基因组的研究和基因疫苗的研制奠定了基础。  相似文献   

玉米田苗后除草剂药效比较     

孙本栋  孙本义  张守峰 《种业导刊》2008,(5):41-41

不同除草剂药效比较表明：玉米田苗后除草剂克服了地表封闭除草剂只封闭不杀草,定向喷雾茎叶处理除草剂只杀草不封闭的缺点,有着广阔的发展前景。  相似文献   

狂犬病病毒G蛋白的克隆表达及其抗体胶体金检测试纸条的研制     

邓柏林  郑雪莹  范君文  郑金来  王培  郭俊林  张守峰 《中国动物传染病学报》2022,(1):91-97

狂犬病(Rabies)是一种由狂犬病病毒(RV)引起的急性人兽共患传染病,一旦发病,死亡率几乎为100％.为快速检测狂犬病病毒IgG抗体,本研究首先克隆表达并纯化狂犬病病毒G蛋白,应用G蛋白作为抗原,G蛋白单克隆抗体制备C线,鼠抗犬IgG和鼠抗猫IgG标记T线,经条件优化后,建立了一种能够用于快速检测动物狂犬病病毒血清...  相似文献   

汉坦病毒长春分离株YZG-Changchun S基因片段克隆和序列分析     

袁子国  张秀香  郝雪  李修明  张守峰  徐慧娟  高胜岩  王晓虎  扈荣良 《黑龙江畜牧兽医》2007,(11)

肾综合征出血热(Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome,HFRS)和汉坦病毒肺综合征(Hantavirus Pulmonary Syndrom,HPS)是由布尼亚病毒科汉坦病毒属中的病原体引起的一种病情重、病死率高的自然疫源性急性传染病。目前发现汉坦病毒有20多种血清型,在我国主要流行汉滩病毒(Hantaan virus,HT- NV)和汉城病毒(Seoul virus,SEOV)2种型别病毒。  相似文献   

抗菌肽重组逆转录病毒载体的构建、重组病毒的包装及其在牛奶中的稳定表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

张锦霞  张守峰  郭学军  扈荣良 《中国兽医学报》2008,28(12)

将含有双抗菌肽基因的表达盒插入到逆转录病毒载体pLN-bcp-LK(R)中,获得了含有双抗菌肽基因的重组逆转录病毒载体pLN-bcp-LfcinB-CE-MA(R),利用脂质体转染PA317包装细胞,G418进行筛选得到了阳性细胞克隆,克隆扩大培养后,用病毒上清感染NIH3T3细胞进行滴度测定,最高滴度为1×104CFU/mL,用病毒上清转染妊娠中后期奶牛乳腺组织,产犊后采集的奶样经琼脂板溶圈法和Tricine-SDS-PAGE检测,结果表明乳汁中表达的抗菌肽对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有明显地抑菌活性,并能实现相对稳定的表达,表达可持续30~45 d。  相似文献   

猪伪狂犬病病毒疫苗株Bartha-K61在犬科动物体内的安全性评价及免疫实验   总被引：1，自引：0，他引：1  

袁子国  张秀香  高胜言  王晓虎  张守峰  扈荣良 《中国兽医学报》2008,28(10)

为了对猪伪狂犬病病毒(PRV)疫苗株Bartha-K61在犬科动物体内的安全性和免疫原性作出评价,通过3种免疫途径(肌肉注射、滴鼻免疫和口服免疫)对犬进行免疫(2 mL,6×10 8PFU/mL),并在免疫结束后通过组织病理切片、免疫组化、临床表现、产仔性能、排泄物中病毒存留情况进行了检测.结果发现,在PRV易感器官内未发现病毒抗原,且疫苗接种犬体温正常,精神状态良好,产仔正常,无任何不良症状,排泄物中亦无病毒粒子残留;同时,通过对免疫后犬只的细胞免疫水平、体液免疫水平和中和试验的检测发现,3种免疫途径均可有效地刺激机体产生免疫应答,且中和抗体水平达到较高水平.从而证明,PRV Bartha-K61在犬科动物体内安全有效,为以PRV为栽体表达犬科动物疫病的抗原基因重组活栽体疫苗的研制提供了科学依据.  相似文献   

LacZ基因重组伪狂犬病病毒(Bartha株)的构建     

袁子国  张秀香  郝雪  李修明  高胜言  张守峰  刘烨  扈荣良 《黑龙江畜牧兽医》2008,(1):58-59

伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)是一种极具开发潜力的疫苗载体.PRV基因背景清楚,遗传稳定性强;含有许多病毒复制的非必需基因,外源基因容量大(30 kb);具有广泛的宿主范围,可以感染猪、犬、牛、羊等多种家畜和野生动物.  相似文献   

狂犬病快速诊断方法的建立和应用     

曹亮  扈荣良  张守峰  单文鲁 《新疆农业大学学报》2005,28(2):30-33

根据狂犬病病毒核蛋白基因保守区序列设计1对引物，建立了用于狂犬病病毒特异性核酸检测的RT-PCR技术。该技术可从狂犬病病毒CVS株、8202株和SRV9株的含毒细胞培养物及鼠脑组织中．扩增出443bp的核酸片段，检出核酸的敏感性约为3pg。对30份不同种动物脑组织的检测结果与小鼠脑内接种试验(MIT)的测定结果完全吻合，但前者可在3h内直接对组织匀浆进行诊断，具有快速、简便和敏感的优点。  相似文献   

RNA疫苗研究进展及狂犬病RNA疫苗     

汪芋  缪发明  张守峰  么乃全  扈荣良 《中国兽医学报》2024,(5):1078-1086

狂犬病(rabies)是由狂犬病病毒(rabies virus, RABV)引起的一种严重人畜共患的急性接触性传染病,其致死率为100%,每年全球约6万人死于该病,其中亚洲和非洲发生最多。RABV是狂犬病的致病病原体,由结构蛋白和负链RNA构成。狂犬病一旦发病致死率为100%,目前疫苗接种仍是预防和控制狂犬病最为有效的策略。RNA疫苗是新一代核酸疫苗,其安全性好,有效性高,设计灵活,研发周期短,且借助高效递送系统,可刺激机体快速产生强烈免疫应答。RNA疫苗这一特点对于潜伏期短且病死率高的狂犬病的防控具有重要应用价值。现对RNA疫苗及狂犬病RNA疫苗的研究进行系统梳理,以阐明其研究现状及应用前景。  相似文献