基因2型牛病毒性腹泻病毒河南株分离鉴定及全基因序列分析     

王倩颖  王廷龙  刘可欣  刘俊峰  胡建军  程世鹏  张淑琴 《中国动物传染病学报》2023,(4):120-130

河南某地区牛场部分牛出现呼吸道症状,伴随有怀孕母牛的流产,本研究使用细胞培养的方法于病死牛脾脏中分离得到1株BVDV病毒,命名为BVDV-HEN01。该病毒在MDBK细胞上生长,未发生固缩、拉网等病变,可确定该毒株为1株非致细胞病变毒株;下载若干条BVDV全基因序列,经MegaAlign软件比对在同源性较高的区域设计全基因组扩增引物10对,经鉴定该毒株为BVDV-2型毒株,并扩增出该毒株的全基因组;直接免疫荧光法测得病毒TCID₅₀为10^-4.1/0.1 mL。使用电镜观察病毒颗粒,颗粒的直径为50 nm左右。对分离株进行同源性分析并绘制系统进化树,发现HEN01株与我国SD1301株进化关系密切。本实验所分离的毒株为1株新的BVDV-2b亚型毒株,全基因组序列测定的完成对于反向遗传工程与疫苗的研发有重大意义。  相似文献   

中药金银花体外抗牛病毒性腹泻病毒的作用研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘占悝  李智杰  刘泽余  李健友  张淑琴  王超  郭利 《黑龙江畜牧兽医》2020,(7)

  相似文献   

玉米发生倒伏的原因及防止措施   总被引：1，自引：1，他引：0  

许正学  李福林  张淑琴  肖增民  邬生辉 《现代农业科技》2010,(20)

介绍通化市玉米生产中常见的几种倒伏类型,分析其发生原因,提出预防玉米倒伏的几种方法和倒伏后的处理措施,以为玉米种植提供参考。  相似文献   

连续降雨对玉米制种产量的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

徐宝峰  张淑琴  王越人  许正学  邬生辉  曲海涛 《内蒙古农业科技》2011,(1):71-71

2010年东北地区遭遇了多年不见的强降雨连雨天气,造成玉米制种产量降低。如何在连续降雨的天气条件下避免玉米制种产量降低,本文介绍了科学、有效的办法。  相似文献   

吉林省玉米产量低与水分高的原因及对策     

许正学  李福林  张淑琴  邬生辉 《现代农业科技》2011,(19):131+133

从品种选择、整地、田间管理等方面分析了吉林省玉米产量低与水分高的形成原因,并提出相应的对策,以期为吉林省玉米高产优质栽培提供参考。  相似文献   

马传染性贫血病毒受体基因的原核表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

张淑琴  罗军荣  刘霄卉  杨旭艳  马学恩  周建华 《黑龙江畜牧兽医》2008,(6):14-16

为了构建马传染性贫血病毒受体(ELR1)的原核表达体系,克隆ELR1的编码区基因,将其亚克隆到PET-30a构建重组表达质粒PET-30a-ELR1,经酶切和DNA测序鉴定,将阳性质粒转化E.coli BL21感受态细胞,IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE电泳及Westhern-blot分析鉴定,结果表明:该基因在大肠杆菌中以包涵体形式表达,其表观分子质量约为39.6 ku;利用尿素洗涤纯化可以得到具有较高纯度的表达蛋白,是一种理想的免疫原.  相似文献   

大葱优质高产栽培技术要点     

张淑琴 《吉林蔬菜》2013,(7):18

大葱是北方重要的蔬菜之一,是人们常年必备又非常喜欢的调味品。含有丰富的矿物盐、氨基酸、维生素还含有特殊的香辛油,能增进食欲,开胃消食。大葱还有较强的杀菌作用,常食用大葱能减少胆固醇在血管壁上的积累。大葱还有避免或减弱血栓发生的医疗功效。搞好大葱生产是菜农致富的有效途径之一,在生产实践  相似文献   

广安观光农业旅游区红色文化与巴蜀文化造景形式研究     

张淑琴  张超 《湖北农机化》2019,(21)

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牛病毒性腹泻病毒Real-timePCR方法的建立及其应用     

张淑琴  谭斌  李鹏  杨勇  孙娜  王凤雪  郭利  温永俊  程世鹏 《特产研究》2014,36(3):1-4

本研究在牛病毒性腹泻病毒5'UTR基因的保守区设计并合成了1对引物,建立了可以定量检测牛病毒性腹泻病毒核酸的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。该方法建立的标准曲线相关系数R2为0.999,扩增效率为95.9%,熔解曲线为单一峰值,可检测到初始模板中4.1×101copies/μL的牛病毒性腹泻病毒核酸,是常规RT-PCR方法敏感性的100倍。该检测方法与猪瘟病毒、传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感病毒3型病毒等其它牛源病毒均不发生交叉反应;批内与批间重复性试验变异系数均小于2.2%。本试验建立的荧光定量PCR检测方法可用于牛病毒性腹泻病毒的临床诊断。同时,应用本方法对临床病例的各组织器官进行了病毒RNA定量检测结果表明,胸腺等淋巴组织的病毒含量最高,证实病毒主要侵害淋巴器官,此研究可为临床病例的病毒分离提供借鉴。  相似文献   

鉴别牛病毒性腹泻病毒基因型单克隆抗体的制备及其特性     

徐树兰  李少英  冷雪  张淑琴  赵俊  武华 《农业生物技术学报》2010,18(5)

为制备可以区分牛病毒性腹泻1型病毒(BVDV1)和2型病毒(BVDV2)的单克隆抗体,利用纯化的BVDV1和BVDV2为抗原免疫BALB/c小鼠(Mus musculus),取脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,同时以BVDV1和BVDV2病毒作为包被抗原进行间接BVDV1-ELISA和BVDV2-ELISA检测,获得了3株单克隆抗体,其中1株是针对BVDV1的特异性抗体命名为BV1,另外1株是针对BVDV2的特异性抗体命名为BV2,第3株与BVDV1和BVDV2病毒都反应命名为BV12.交叉实验表明,3株单抗中仅有BV12与猪瘟病毒(Hog chorera virus,HCV)反应.BV1、BV2和BV12单抗腹水效价分别为106、107和106,均具有中和活性,中和效价最高达1:524288,分别属于鼠IgG1、IgG2a和IgG2a亚类,轻链均为κ链.3株杂交瘤细胞的染色体数目分别为102、99和100条.本研究获得3株单克隆抗体可以区分BVDV1和BVDV2的杂交瘤细胞.  相似文献