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1.
为研究绵羊肺腺瘤病病毒(JSRV)表面蛋白(SU)的致瘤机制,本研究构建稳定表达SU的羊肺细胞A549细胞系.采用PCR方法从含su基因的pGEX-4T-1-SU重组质粒中扩增SU编码序列,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,转染A549细胞.通过G418筛选,对转染阳性细胞进行纯化,获得稳定表达JSRV SU蛋白的A549细胞系.以间接免疫荧光及western blot鉴定SU的表达状况,并运用共聚焦显微镜确认SU蛋白的亚细胞定位.结果表明,重组蛋白SU在A549细胞中有效表达,而且主要分布于细胞质中.该细胞系的建立为SU生物学功能的体外研究提供了平台.  相似文献   
2.
本研究以波尔山羊为实验动物,旨在观察钼镉联合胁迫对山羊肾脏细胞凋亡相关基因表达的影响。选用63头健康波尔山羊随机分成7组,每组3个重复,选用七钼酸铵([(NH4)6Mo7O24·4H2O])作为实验钼源,氯化镉(Cd Cl2)作为实验镉源,按每kg山羊体质量添加钼、镉对照组(Mo 0 mg/kg+Cd 0 mg/kg),低镉低钼组(Mo 15mg/kg+Cd 0.5 mg/kg),低镉中钼组(Mo 30 mg/kg+Cd 0.5 mg/kg),低镉高钼组(Mo 45 mg/kg+Cd 0.5 mg/kg),高镉低钼组(Mo 15 mg/kg+Cd 1.0 mg/kg),高镉中钼组(Mo 30 mg/kg+Cd 1.0 mg/kg),高镉高钼组(Mo 45 mg/kg+Cd1.0 mg/kg),实验期50 d。并于当天、第25、50天每组各剖杀3头山羊取肾组织进行相关实验,观察不同剂量钼、镉对山羊肾脏细胞凋亡相关基因表达等的影响。结果显示,与对照组相比,在实验第25、50天时,实验组山羊肾脏bcl-2 mRNA表达量下降(P0.01),bax mRNA、caspase-3 mRNA和cytc mRNA表达量上升(P0.05或P0.01);山羊钼镉联合胁迫导致肾线粒体抗氧化功能降低、自由基含量升高,导致细胞促凋亡基因表达量上升,抗凋亡基因的表达量下降,提示钼镉联合胁迫对山羊肾脏有明显损伤。  相似文献   
3.
在E.coli BL21中诱导表达含有绵羊肺瘤病毒囊膜表面蛋白(SU)重组质粒pGEX-4T-1-SU,表达的GST融合蛋白经纯化后用佐剂乳化,作为抗原免疫BALB/c小鼠,并进行细胞融合、克隆化、ELISA法初步筛选抗SU单抗。最终获得了3株抗SU的单抗,为深入探讨JSRV的分子生物学特性及研制诊断试剂盒打下了基础。  相似文献   
4.
选用300日龄健康海蓝褐蛋鸡90羽,随机分为对照组、病理组、防治组3组(每组3个重复,每个重复10只),分别饲喂正常日粮(代谢能11.30MJ/kg,粗蛋白质17.00%)、高能量低蛋白质日粮(代谢能12.81MJ/kg,粗蛋白质12.90%)和添加0.3mg/kg生物素的高能量低蛋白质日粮,试验期60d,分别于试验的1,30,60d,每组选取体质量相近的试验蛋鸡6羽,采血制备血清和采集肝脏样品及腹脂,测定血脂含量、肝脂率和腹脂率,观察其病理学变化。结果表明,与对照组相比,试验30,60d,高能量低蛋白质日粮组鸡产蛋性能、HDL-C含量显著降低,TG、TC、LDL-C、ALT、AST、肝脂率和腹脂率显著升高,肝脂肪变性明显。试验30d,与对照组比较,防治组鸡产蛋性能、HDL-C、TG、TC、LDL-C、ALT、AST、肝脂率和腹脂率差异不显著,肝脏脂肪变性不明显;与高能量低蛋白质日粮组比较,防治组鸡产蛋性能、HDL-C含量显著升高,TG、TC、LDL-C、ALT、AST、肝脂率和腹脂率显著降低。60d时,与对照组相比,防治组鸡产蛋性能、HDL-C显著降低,TG、TC、LDL-C、ALT、AST、肝脂率和腹脂率显著升高,肝脏呈现一定的脂肪变性;与高能量低蛋白质日粮组比较,防治组鸡产蛋性能、HDL-C含量显著升高,TG、TC、LDL-C、ALT、AST、肝脂率和腹脂率显著降低。结果提示,采用高能低蛋白日粮饲喂蛋鸡可以成功的建立蛋鸡脂肪肝出血征病理模型;在高能量低蛋白质日粮中添加0.3mg/kg生物素后,可显著影响蛋鸡的脂肪肝出血征蛋鸡脂类代谢,一定程度上对其具有预防作用。  相似文献   
5.
旨在克隆鸭胆固醇7α羟化酶1(CYP7α1)基因,并进一步探讨该基因的结构与功能,揭示其组织特异性表达规律。本研究以樱桃谷鸭为材料,运用同源序列克隆结合RACE技术,对鸭CYP7α1基因的cDNA全长进行克隆,并对其进行生物信息学分析及组织表达的研究。结果表明:鸭CYP7α1基因cDNA全长2 351bp,最大开放阅读框(ORF)1 539bp(114~1 652bp),共编码512个氨基酸;鸭CYP7α1氨基酸与鹅的同源性最高(97.5%),其次是鸡(92.8%)、人(67.3%)、猪(66.5%)、兔(65.7%)、大鼠(65.5%)、小鼠(65.5%)和牛(65.1%);经预测鸭CYP7α1蛋白可能含有1个P450超家族结构域;鸭CYP7α1基因在肝脏中呈高丰度表达,在其他9个组织中均未检测到或检测到少量表达,表明该基因的表达具有组织特异性。  相似文献   
6.
为了对正邦核心群与红星核心群种猪进行雌激素受体(ESR)和卵泡刺激素(FSH)β基因的多态性分析以及各世代繁殖性能的测定,试验采用PCR-RFLP技术,并结合开放式群体继代选育法与多点核心群选育法开展高产仔大白猪新母系的选育。结果表明:通过5个世代的选种,使高产仔大白猪新母系的繁殖性能指标达到第1胎窝总产仔数为(10.94±0.11)头,进展为9.73%;窝产活仔数为(10.66±0.12)头,进展为13.23%;初生窝重为(12.98±0.13)kg,进展为28.13%;21日龄窝重为(54.31±0.89)kg,进展为18.04%。说明提高了有利于产仔基因的频率。  相似文献   
7.
副猪嗜血杆菌病引起猪多发性浆膜炎和关节炎,又称为猪格拉瑟氏病。随着养猪业的发展,该病已成为全球范围内猪的重要细菌性疾病。通过流行病学﹑临床症状﹑大体病变观察结合实验室化验确诊了副猪嗜血杆菌病,并描述了重要脏器的组织病理学变化。  相似文献   
8.
采用PCR—RFLP技术,对正邦集团大白猪原始基础群及其育种核心群0、1世代共538头个体,以及红星衣场大白猪原始基础群和育种核心群0世代共249头个体进行氟烷基因(Hal)基因型检测,并对阳性个体予以清除使其净化。基因继代选择结果显示,正邦原始基础群及核心群0、1世代群体Hal^n基因频率分别为9.48%、2.22%、0;红星原始基础群及核心群0世代群体Hal^n基因频率分别为1.08%、0,呈现世代递减并实现净化,进而培育出大白猪抗应激品系。研究表明,PCR—RFLP技术可准确诊断猪氟烷基因,在种猪选育过程中及时淘汰携带氟烷基因的个体,提高猪种质量。  相似文献   
9.
探讨锌添加水平对断奶仔猪生产性能及免疫机能的影响。选用21日龄"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪30头,按体质量和性别随机分成3组(Ⅰ~Ⅲ组),每组10头,分别饲喂基础日粮添加氧化锌(以锌量计)Ⅰ组100 mg/kg(对照组)、Ⅱ组1 000 mg/kg、Ⅲ组2 000 mg/kg,预试验7 d,正式试验42 d。结果表明:(1)平均日增重和日采食量,试验0~14 d,Ⅲ组显著高于Ⅰ组(P<0.05);试验15~28 d,Ⅱ、Ⅲ组显著或极显著高于Ⅰ组(P<0.05或P<0.01),试验29~42 d极显著低于Ⅰ组(P<0.01);试验0~28 d,高锌可降低料重比(P<0.05),试验29~42d,料重比Ⅱ、Ⅲ组显著高于Ⅰ组(P<0.05);(2)脾脏、胸腺指数Ⅱ、Ⅲ组极显著高于Ⅰ组(P<0.01);(3)淋巴细胞转化率OD值:第14天时,Ⅱ、Ⅲ组显著高于Ⅰ组,第28天时,各组间差异不显著(P>0.05);第42天时,Ⅰ组极显著高于Ⅱ、Ⅲ组(P<0.01)。猪瘟抗体水平Ⅱ、Ⅲ组极显著高于Ⅰ组(P<0.01)。这表明高锌能提高断奶仔猪生产性能及免疫机能。  相似文献   
10.
旨在研究饲粮中添加复方中药超微粉对鸡蛋胆固醇含量及肝apo A-I、apo B基因mRNA表达的影响。选300日龄崇仁麻鸡90羽,随机分成2个组,每组3个重复,每个重复15羽鸡。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮上添加1%复方中药超微粉(TCM)。试验期60 d。(结果)结果表明:与对照组比较,试验组第30、60天鸡蛋胆固醇含量和血清甘油三脂(TG)水平显著下降(P0.05),肝载脂蛋白A-I(apo A-I)mRNA表达量显著上升(P0.05);试验组第60天肝脏载脂蛋白B(apo B)mRNA表达量和血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著上升(P0.05),血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)水平显著下降(P0.05)。结果显示:饲粮中添加TCM能够降低血脂水平和鸡蛋胆固醇含量,同时上调肝apo A-I、apo B基因mRNA表达量。  相似文献   
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