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大肠埃希氏菌F18菌毛结构蛋白与黏附特性的关系 总被引:2,自引:0,他引:2
利用已表达的F18ab和F18ac菌毛各结构亚单位的融合蛋白(GST-FedA/ab、GST-Fe-dA/ac、GST-FedE、(;STFed-F/ab、GST-FedF/ac)分组肌肉注射健康家兔,制备抗FedA/ab、Fe-dA/ac、FedE、FedF/ab、FedF/ac多价血清。结果表明,所制备的5种抗Fed多价血清均能凝集F18ab^+。大肠埃希氏菌107/86株和F18ac^+大肠埃希氏菌8813株。利用抗大肠埃希氏菌F18菌毛主要结构亚单位FedA特异抗体和次要结构亚单位FedE、FedF特异抗体,研究了F18菌毛与小肠上皮细胞的黏附特性。结果发现,FedA抗体和FedE抗体单独和合并均不能抑制F18^+菌与小肠上皮细胞的黏附,而单用抗FedF抗体即能明显抑制F18^+大肠埃希氏菌与小肠上皮细胞的黏附,表明FedA和FedE与F18菌毛的黏附不具相关性,而FedF才是F18菌毛的黏附性结构亚单位。 相似文献
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从某湖羊养殖场发病死亡的成年湖羊的肾脏中分离到1株革兰阴性短杆菌,形态特征与生化试验结果基本符合肺炎克雷伯氏菌的特征。药物敏感性试验显示,该分离菌株对氨苄西林、哌拉西林、头孢唑啉、头孢哌酮、卡拉霉素、庆大霉素、诺氟沙星、氧氟沙星高敏,而对氟苯尼考、青霉素、苯唑西林、红霉素、四环素、多西环素、万古霉素、复方新诺明等药物具有耐药性。以细菌16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增,将所测序列与GenBank中的序列进行BLAST比对,结果其与肺炎克雷伯菌的同源性高达99.9%以上,进一步确定该分离菌株为肺炎克雷伯菌。 相似文献
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重组志贺样毒素Ⅱ型变异体A亚单位pGEX-Ansp及其酶活性部位的基因缺失株pGEX-Ade及突变株pGEX-Amu转化的大肠杆菌经诱导后,表达产物经超声波裂解并滤过除菌.ICR小鼠腹腔注射三种重组质粒转化菌诱导后菌体裂解物的除菌滤液,以检验重组表达产物的毒性和免疫原性;在Vero细胞上检测重组菌表达产物对Vero细胞的半数致死量(CD50)及免疫鼠血清对SLT-Ⅱe毒素的中和实验三方面来比较pGEX-Ansp、pGEX-Ade和pGEX-Amu的生物学特性,结果表明这三种基因工程菌表达产物经腹腔注射后可以诱导机体产生一定程度的保护性抗体.在Vero细胞上,pGEX-Ansp的表达产物可在一定程度上使Vero细胞产生细胞病变,pGEX-Amu的表达产物可在一定程度上抑制Vero细胞单层形成时间,而pGEX-Ade对Vero细胞的生长无影响. 相似文献
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根据已经发表的F18ab菌毛F亚单位(FedF/ab)的基因(fedF/ab),设计一对引物,利用PCR技术从表达F18ac菌毛的大肠杆菌2134P株、8199株、8813株中分别扩增到一段序列,并克隆至pGEM—T载体,获得重组质粒T8813F、T8199F、T2134PF。琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明,该3个序列大小均为903bp,与fedF/ab大小一致且具有较高的同源性(99.4%),推导的FedF/ac氨基酸序列与FedF/ab同源性为98.3%。数据表明该实验所克隆的序列均为F18ac菌毛F亚单位(FedF/ac)的基因(fedF/ac)。 相似文献
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仔猪大肠杆菌性腹泻的病原检测与免疫防制 总被引:2,自引:1,他引:1
以江苏姜曲海种猪场的仔猪腹泻病症为研究对象,研究合成了检测肠毒素(ST1、ST2、LT1)、菌毛(K88、K99、987P、F41)以及耶尔森氏菌强毒力岛(high pathogenicity island,HPI)核心基因的特异性引物,用PCR方法对产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenicE.coli,ETEC)和HPI+大肠杆菌进行检测,并对致病性大肠杆菌的免疫防治进行了研究.结果表明:该猪场62.5%的病例存在HPI+大肠杆菌感染,12.5%的病例存在HPI+大肠杆菌及ETEC感染,仅有5%的病例与ETEC感染相关.取分离鉴定的2株大肠杆菌制备灭活抗原,并以氢氧化铝胶为佐剂免疫接种母猪,结果表明,其所产仔猪的腹泻发病率为15.2%,保护率高于仔猪大肠杆菌三价灭活疫苗. 相似文献
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<正>硒存在于雄性动物精子顶体的蛋白质中,缺硒会造成精子活力降低,从而影响繁殖能力。对于母畜,适量补硒能够预防流产、胚胎死亡以及不孕症,并能提高繁殖能力。如果长期饲喂母畜低硒日粮,会抑制腺垂体分泌黄体生成素,或通过影响下丘脑的促性腺激素释放激素而间接抑制黄体生成素的产生,影响卵巢排卵。 相似文献
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为了解江苏省水禽源大肠杆菌毒力基因分布情况,并分析其耐药性,采集了江苏部分地区64个养殖场疑似大肠杆菌性腹泻鸭的泄殖腔拭子510份,制备DNA模板,运用PCR技术进行检测,利用药敏纸片琼脂扩散法对100株分离株进行药敏试验。结果表明:江苏部分地区水禽养殖场致病性大肠杆菌阳性率65%左右;分离株对磷霉素、多黏菌素B比较敏感,敏感比例分别为90%和78%;耐药最强的是多西环素,耐药比例可达90%,其次是新霉素和四环素,耐药比例均为70%。结果显示,利用PCR技术可快速确诊,并通过药敏试验实现对敏感药物的筛选。 相似文献
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通过比较舒泰与陆眠宁9个不同浓度组合C57BL/6小鼠麻醉的诱导时间、麻醉时间和恢复时间,初步评价舒泰和陆眠宁的麻醉效果,探索舒泰与陆眠宁配伍对C57BL/6小鼠麻醉的精准控制方案。结果表明:随着2种药物浓度的增加,诱导时间逐步缩短,麻醉时间和恢复时间逐渐增加,但剂量和时间并不呈线性相关关系,增加舒泰剂量产生的效果优于陆眠宁。在不产生可逆性眼球发白及死亡的情况下,舒泰30 mg·kg~(-1)配比陆眠宁40 mg·kg~(-1)的组合能最快诱导麻醉,麻醉时间也最长。 相似文献
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大肠杆菌F18ac菌毛FedA蛋白的表达与鉴定 总被引:5,自引:0,他引:5
根据已经发表的F18ac菌毛A亚单位的基因序列(FedA)设计一对引物,利用PCR技术从重组质粒T 8813A 中扩增到一段序列,并按预定的阅读框插入表达性质粒载体pGEX 6p 1中的谷胱苷肽转移酶(GST)基因的下游,获得重组质粒pPFedA/ac,并转化大肠杆菌BL 21 获得重组菌PPFedA/ac。琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明,该序列大小为456 bp,与已发表的FedA/ac结构编码序列完全一致。通过对菌体裂解物的SDS PAGE 分析以及Western blotting 鉴定,证明重组大肠杆菌PP FedA/ac的可以表达融合蛋白形式的FedA/ac (命名为GST FedA/ac),即FedA/ac蛋白(15.317 ku)与谷胱苷肽转移酶(27.335 ku)相连组成分子量为42.652 ku的融合蛋白。利用GST FedA/ac制备的兔抗GST FedA/ac 血清与大肠杆菌F107/86 株( F18ab )、2 134 P 株(F18ac )进行的玻板凝集试验呈现阳性反应,进一步表明了表达的正确性。 相似文献