应用干血纸ELISA诊断猪囊虫病的研究     

王佩雅  景志忠等 《中国兽医科技》2000,30(11):18-19

对试验猪用猪囊尾蚴细胞抗原免疫前、感染前、免疫后及用猪带绦虫卵感染后每隔10d经前腔静脉采血1次，分离血清，同时制备全血干血纸，分别用血清ELISA和干血纸ELISA进行检测。结果免疫组猪均在免疫后12d检出抗体；攻击感染组猪在攻击虫卵20d检出抗体，21d抗体水平达高峰，并一直持续到32周；阴性对照组的OD值一直在0.24～0.65。2种样品的检测结果基本一致。  相似文献   

猪带绦虫六钩蚴重组蛋白TSOL18与BSA偶连蛋白的制备     

张少华  李克生  景志忠  杜惠芬  骆学农  才学鹏 《甘肃农业大学学报》2007,42(3):7-11

应用异型双功能连接剂MBS(间-马来酰亚胺苯甲酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯)将猪带绦虫六钩蚴18ku重组蛋白(TSOL18)和载体蛋白-牛血清白蛋白(BSA)进行连接,制备连接蛋白BSA-TSOL18,用以增强TSOL18的免疫原性.连接蛋白利用快速脱盐柱分离技术进行纯化;纯化后应用醋酸纤维薄膜电泳证明二者的结合情况;并用间接ELISA法检测不同摩尔比连接产物中抗原部分的活性.结果表明:TSOL18与BSA偶连摩尔比为1∶3时连接有效,且对抗原活性影响小,可满足进一步免疫的要求.  相似文献   

基于重组猪囊虫18 ku抗原的间接ELISA方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

吴国华  郑亚东  贾万忠  张少华  景志忠  骆学农  刘石泉  才学鹏 《畜牧兽医学报》2009,40(12)

利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从猪囊尾蚴中克隆到18 ku蛋白基因,将扩增产物与pGEM-T Easy载体连接后测序分析.将目的基因亚克隆至表达载体,构建重组质粒pGEX-CE18,经转化大肠杆菌BL21 (DE3)后诱导表达,用SDS-PAGE和Western-blot分析表达产物.表达的目的蛋白纯化后作抗原建立检测猪囊虫抗体的重组蛋白间接ELISA方法.结果表明,18 ku蛋白基因在大肠杆菌中成功表达,表达产物约为35 ku的融合蛋白,并能被猪囊虫感染血清识别.经薄层扫描分析,表达量占菌体蛋白总量的28%.与商品化ELISA试剂盒平行检测178份阳性血清样品,二者的符合率为98.83%,说明建立的重组蛋白ELISA方法可用于猪囊虫病的诊断.  相似文献   

高效液相色谱法测定白牦牛乳中VC的含量     

和燕玲  景志忠 《中兽医医药杂志》2009,28(6):33-35

白牦牛（whiteyak）是我国甘肃省天祝县特有的畜种资源。白牦牛乳洁白浓香,营养丰富,具有较高的营养价值,对白牦牛乳中维生素含量的研究具有重要的营养学意义和价值。有关维生素的分析方法较多,包括药典中的标准方法——碘量法、比色法、电位滴定法、化学法、气相色谱法、高效液相色谱法和微生物法等,  相似文献   

猪白介素-4重组表达质粒在小鼠体内的组织分布及环境释放安全性     

蒙学莲  景志忠  房永祥  窦永喜  陈国华  贾怀杰  段凤云  才学鹏 《中国兽医学报》2009,29(5)

为了探讨pcDNA3.1/IL-4重组表达质粒作为疫苗佐剂进入临床应用的生物安全性,本试验就pcDNA3.1/IL-4重组表达质粒在小鼠体内的组织分布和环境释放安全性进行了研究.将pcDNA3.1/IL-4重组表达质粒经肌肉途径免疫BALB/c小鼠,免疫后不同时间剖杀动物并摘取各种组织,抽提基因组DNA.利用PCR技术分析其在组织内的分布及与细胞基因组发生整合的可能性,同时检测了免疫动物现场环境,以监测pcDNA3.1/IL-4重组表达质粒上的猪IL-4基因、CMV启动子基因和抗性基因是否在环境细菌中发生转移和扩散.结果表明,免疫后1 d在3/3小鼠各组织中仅注射部位肌肉存在重组表达质粒,免疫后5 d仅有1/3小鼠于注射部位肌肉中存在重组表达质粒,免疫后15 d所有小鼠的各组织中无重组表达质粒存在;未发现pcDNA3.1/IL-4重组表达质粒整合到宿主细胞基因组和转化到环境其他细菌中.因此,认为pcDNA3.1/IL-4重组表达质粒对动物和环境是安全的.  相似文献   

宿主和病原体间遗传学关系小鼠动物模型研究进展     

景志忠  宁磊  张永兴 《动物医学进展》2004,25(4):45-49

遗传因子决定着各种病原引起的感染性疾病的最终结果。人类基因的抗性和易感性的分子机制在许多方面还不清楚 ,宿主对某一种病原的反应的影响多基因控制就变得更为复杂。动物模型在宿主与病原之间复杂遗传系统解剖成单一的因素控制方面具有巨大的潜力。在克隆和鉴定宿主抗性基因方面 ,小鼠能成为一个无价的实验工具。通过三个途径能够建立人类感染性疾病的小鼠模型。 (1 )目标基因小鼠突变体的培育 ;(2 )在突变小鼠中 ,宿主抗性基因位置克隆 ;(3 )绘制和描述控制宿主与病原之间复杂性的数量特性位点图。文章通过上述三种方法的介绍进一步阐述人的感染性疾病 ,特别对细菌感染性疾病的抗性或易感性的机制研究。  相似文献   

PRRSV JX0708株结构蛋白基因的克隆及其生物信息学分析     

何小兵  贾怀杰  孙晓林  郭晓青  景志忠 《甘肃农业大学学报》2012,47(1):1-7

根据GenBank中登录的美洲型PRRSV JXA1株基因组序列设计合成了4对引物,应用RT-PCR技术对PRRSV JX0708株结构蛋白基因进行扩增、克隆和测序,将测序结果应用Blast和DNAStar软件进行分析,并与国内外分离株进行核苷酸序列以及推导的氨基酸序列同源性比较.结果表明:PRRSV JX0708株结构蛋白基因长约3 186bp,分为ORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7共6个基因区;与国内分离的高致病性PRRSV美洲型毒株HuN、GD、JXA1、LN和普通毒株CH-1a以及经典毒株VR-2332和疫苗毒株pMLV的核苷酸及其推导的氨基酸同源性分别为88.0%～100.0%和83.5%～100.0%;而与欧洲型经典毒株LV和Euro-1的同源性差异显著,其核苷酸和推导的氨基酸同源性分别为64.0%～69.7%和53.3%～79.9%.遗传进化分析表明,PRRSV JX0708株在基因型上属于美洲型,同时美洲型PRRSV的变异存在某种地域和时间跨度上的相关性,但每个结构蛋白基因的变异并不严格遵从这种规律,而有所差异.  相似文献   

长白猪IL-6基因的克隆及其序列分析     

罗启慧景志忠  于三科窦永喜陈国华  蒙学莲 《中国兽医科技》2005,35(2):129-133

用PHA和LPS诱导猪脾和淋巴结淋巴细胞，提取细胞总RNA，利用RT—PCR技术克隆猪1L-6的cDNA并进行序列测定与分析。测序结果及同源性分析表明，已扩增到IL-6基因，大小约为669bp，含有1个639bp的开放阅读框，编码212个氨基酸，其中前28个氨基酸为信号肽，且碱基序列在不同种属动物间差别较大。分组诱导表明，LPS效果更佳，PHA和LPS联合诱导能使更多的IL-6转录表达。  相似文献   

兽医行政执法程序示意图在执法过程中的应用     

李军成  余四九  路彩霞  景志忠 《现代畜牧兽医》2007,(3):45-47

兽医兽药行政执法是将《行政处罚法》、《行政诉讼法》、《行政复议法》、《国家赔偿法》、《行政许可法》等相关法律与《动物防疫法》、《兽药管理条例》等兽医兽药专业法，以及兽医兽药专业知识结合在一起的行政行为。  相似文献   

Dot—ELISA检测猪血清中伪狂犬病病毒抗体方法的建立和评价   总被引：1，自引：0，他引：1  

李健强  张国祥  王晶钰  王英珍  刘勤  仇建华  李克荣  景志忠  范根成 《中国预防兽医学报》1990,(1)

建立了检测猪血清中伪狂犬病病毒(PRV)特异抗体的斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA),并通过对人工感染和自然感染猪血清以及野外试验猪血清的检测与微量血清中和试验(MSN)作了比较。结果表明, Dot-ELISA具有特异性和敏感性,能检测出猪血清中PRV特异性抗体,与MSN检出符合率在95％以上。经统计分析,差异不显著(P>0.05)。Dot-ELISA可检出早期感染猪血清中PRV抗体,可应用于猪伪狂犬病的临床实验诊断。  相似文献