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从西藏健康牦牛的新鲜粪便中分离、纯化枯草芽孢杆菌,并筛选出耐受性最好的菌株,并进行形态学观察、生化试验、PCR扩增、电泳检测、16s rRNA序列测定、构建进化树并进行同源性分析,对通过鉴定的枯草芽孢杆菌进行耐肠液、耐胆盐、耐高温等耐受性试验。结果显示:分离出疑似枯草芽孢杆菌4株,革兰氏染色为阳性;芽孢染色液染色菌体为蓝色,芽孢不着色。菌体呈椭圆到柱状,芽孢位于菌体中央或次极端。16s rRNA测序有4株枯草芽孢杆菌,与标准株序列同源性高达99.6%,分别命名为Yak-KC1,Yak-KC5,Yak-KC6,Yak-KC7,该4株菌对肠液、胆盐、高温均具有一定的耐受性,Yak-KC7的耐受性最佳,具有进一步开发为益生菌的潜能。 相似文献
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为探讨西藏那曲市申扎县牦牛腹泻的原因,本试验无菌采集11份腹泻牦牛粪便样品进行细菌分离培养、染色镜检,对检测菌株的16Sr RNA基因进行扩增、测序,序列上传至Gen Bank进行比对,并使用DNAStar进行同源性分析,构建遗传进化树。分离结果表明,11份样品中共分离出5株菌株,在MAC培养基上菌落呈粉红色,革兰氏染色镜检后发现所有菌株均为阴性且两端钝圆的直杆菌;16Sr RNA基因同源性分析结果显示,5株分离株16Sr RNA序列同源性在90%以上,与大肠杆菌参考序列的同源性达到95.2%以上;遗传进化树显示,XZ-1、XZ-5分离株与大肠杆菌AT125株、PAK/SA4株亲缘关系较近,XZ-2、XZ-3和XZ-4分离株与大肠杆菌RM13322株亲缘关系较近,经以上鉴定可知分离菌为大肠杆菌。 相似文献
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为了诊断西藏自治区日喀则市某牧场养殖藏羊的死亡病因,本试验无菌采集病死羊的心脏、肝脏、肺脏和肾脏病变组织进行细菌分离纯化,染色镜检和生化鉴定,16S rDNA序列分析,并对分离菌株进行药敏试验。结果显示,分离菌株革兰染色镜检呈葡萄串状或单个短链成对排列,可分解糖类,MR-VP结果为阳性,16S rDNA测序结果与GenBank上登录的其他金黄色葡萄球菌16S rDNA基因序列的同源性达98%以上,证明所分离菌株为金黄色葡萄球菌;药敏试验结果显示,分离菌株对部分喹诺酮类和头孢类抗生素、庆大霉素、复方新诺明、万古霉素和氯霉素高度敏感,对头孢他啶和多西环素呈中介耐药,而对氨苄西林、多黏菌素B、四环素、新霉素、卡那霉素、青霉素、克林霉素和红霉素共8种抗菌药呈耐药。本试验为日喀则地区羊源金黄色葡萄球菌的用药和治疗提供了参考依据。 相似文献
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【目的】2023年4月至2023年5月,西藏拉萨市多地出现牦牛严重腹泻、便血甚至死亡的现象。试验旨在确定牦牛腹泻的病原菌并研究其生物学特性,以期为该地区牦牛腹泻病的防治提供参考。【方法】采集新鲜牦牛腹泻粪便样品进行厌氧培养,通过培养特性及染色镜检进行初步鉴定;对可疑阳性菌株进行生化特性、多重PCR毒素基因分型及cpe、netB、cpb2毒素鉴定,并进行cpa、cpb2、16S rRNA基因的遗传进化分析、部分分离株生长曲线测定及动物致病性试验;采用K-B法测定分离株的体外药物敏感性,统计不同分离株的多重耐药结果。【结果】从样品中分离纯化得到8株分离菌,在厌氧培养基中生长旺盛,在TSC培养基、5%脱纤维绵羊血平板、卵黄琼脂培养基上均呈现与产气荚膜梭菌相似的典型菌落,革兰染色为紫色大杆菌,初步判定为产气荚膜梭菌,命名为XZ-1~XZ-8。分离株生化检测结果与产气荚膜梭菌相符;分离株均携带cpa和cpb2基因,为A型产气荚膜梭菌;16S rRNA基因分析结果显示,8株分离株与产气荚膜梭菌参考株的相似性为97.3%~100%,在系统进化树中处于同一分支,而与屎肠球菌、大肠杆菌参考株处于不同分支... 相似文献