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51.
大肠杆菌K99和F41菌毛抗原的不同缓冲液热处理提取方法比较的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
本试验用Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液（Ｔ）、ＰＢＳ缓冲液（Ｐ）、生理盐水（Ｓ）和２Ｍ尿素ＰＢＳ缓冲液（Ｕ）以热处理的方法提取大肠杆菌Ｋ９９和Ｆ４１菌毛抗原，并用硫酸铵盐析纯化Ｋ９９以及用１Ｎ醋酸滴定和氯化镁沉淀分别纯化Ｆ４１。根据ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和蛋白质含量测定结果，四种缓冲液对Ｋ９９的提取量依次是Ｕ＞Ｓ＞Ｐ，而Ｔ检不出Ｋ９９；对Ｆ４１的提取量依次是Ｕ＞Ｔ＞Ｐ＞Ｓ。Ｋ９９纯化后取得了满意的纯化结果，Ｆ４１纯化后大量上样做电泳时仍有微细的污染带出现，而且氯化镁沉淀后造成Ｆ４１严重损失。Ｋ９９和Ｆ４１纯化前后的各个样品经超声波处理、０．５％脱氧胆酸钠处理和未处理的原液与自家因子血清做琼扩试验以及Ｋ９９和Ｆ４１做交叉琼扩试验，均具有良好的特异性，而且以超声波处理后的样品做琼扩试验效果最佳。 相似文献
52.
53.
54.
牛白细胞粘附缺陷病的研究进展 总被引：5，自引：0，他引：5
牛白细胞粘附缺陷病 ( bovine leukocyte adhesion de-ficiency,BLAD)是一种牛的造血系统遗传性疾病。以严重的重复性感染、缺少脓液形成、损伤愈合延迟和白细胞增多症为特征 ,实质是白细胞粘附及相关的功能包括吞噬和趋化作用缺陷 [1 ,2 ] 。 1 974年 ,世界上首次报道了人发生的一种容易感染、白细胞增生和趋化、吞噬功能缺陷的疾病 ,1 984年确定其病因 ,它是一种与白细胞粘附有关的细胞表面糖蛋白——整合素表达缺陷所致 ,并定名为白细胞粘附缺陷病 ( leukocyte adhesion deficiency,LAD) [3 ]。近年来 ,在病人中又发现了一种以反复感… 相似文献
55.
2010年黑龙江省多个地区暴发猪“高热病”,为明确其病因及流行特征,对来自大庆市、齐齐哈尔市、佳木斯市,绥化市等地区送检的43例病例(70头病死猪),应用病原学、血清学和PCR方法进行诊断,对确诊的病例进行流行病学回顾性研究.结果表明,小养殖户或小型猪场发病率较高,发病高峰期集中在9～12月份,发病日龄集中在1～3月龄仔猪(54.16％);病死猪以败血症为主,43例病例中猪链球菌病23例( 53.49％),猪瘟8例(18.60％),副猪嗜血杆菌病8例(18.60％),猪繁殖与呼吸综合征6例(13.95％),圆环病毒病4例(9.30％),混合感染发病率高达58.13％.以上结果表明,猪“高热病”病因复杂多样,防制工作任重而道远. 相似文献
56.
57.
58.
当前牛病的发生特点和流行趋势 总被引：1，自引：0，他引：1
<正>1当前牛病的发生特点1.1牛疫病种类增多,发病率增高,危害严重当前常发的疫病有口蹄疫、轮状病毒感染、冠状病毒感染、恶性卡他热、牛流行热、大肠杆菌病、沙门氏菌病、布氏杆菌病和副结核病等。呈世界性分布,各国发生程度不同。同时流行新的病毒性传染病如牛玻纳病、心水病、中山病、赤羽病、牛病毒性 相似文献
59.
猪圆环病毒2型ORF3基因的原核表达 总被引：1，自引：1，他引：0
用原核表达系统表达猪圆环病毒2型ORF3基因,分析ORF3蛋白的抗原性。根据GenBank上公布的猪圆环病毒2型(PCV-2)核苷酸序列进行分析,针对ORF3基因设计并合成1对特异性引物,PCR扩增该基因,并将此片段克隆入原核表达载体pET-32a(+)上,命名为pET32a-ORF3,转化大肠杆菌Rosetta-blue(DE3) pLacⅠ感受态细胞,1.0 mmol/L IPTG 37 ℃诱导表达。结果表明,PCR扩增得到315 bp的片段,重组蛋白大小约为29 ku,与预期大小相符。Western blotting分析结果表明,重组蛋白能与抗His-tag的单克隆抗体反应,不与PCV-2阳性血清发生反应。猪圆环病毒2型ORF3基因能在大肠杆菌中成功表达,但与阳性血清之间没有反应原性,为进一步研究PCV-2 ORF3蛋白的功能及特性奠定基础。 相似文献
60.
为了建立针对BRDC常见的主要病原牛黏膜病病毒(BVDV)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)和牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)的一步法多重RTPCR,引入了新型的具有反转录酶和DNA聚合酶活性的r Tth DNA聚合酶,通过对退火温度和引物浓度的优化,敏感性和特异性的检测,最终确定最佳退火温度为54.5℃,最佳引物浓度为0.6 u M。对BPIV-3、BRSV和BVDV的最小检测量分别为162、16和21个TCID50/0.1 m L。与牛传染性鼻气管炎病毒、冠状病毒、腺病毒,以及多杀性巴氏杆菌、肺炎链球菌、化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌等没有交叉反应。建立起的m RT-PCR检测方法可用于鼻腔分泌物的检测,为进一步m RT-PCR试剂盒的组装奠定了基础。 相似文献