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牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)是引起牛鼻气管炎的病原。患病奶牛奶量下降,继发流产,其流产率有时高达50％。育肥牛主要影响肥育而造成严重经济损失,急性发病期有10％左右的死亡率。本文对本病进行了病原分离和血清学诊断,以便为防治该病提供可靠的科学依据。现报告如下。 材料和方法 相似文献
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本试验用沼液对茄子进行基质栽培,通过对茄子的生长发育、产量、品质的研究,表明使用沼液可以使茄子产量增加,并且改善茄果品质。使用沼液后,茄子的株高增高,茎秆变粗,叶片色绿,叶片肥大;同时,沼液能改善茄子果实品质,降低茄子果实酸度和硝酸盐含量。 相似文献
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我国正处在加快现代化进程和全面建成小康社会的关键时期,要发展现代农业,保障国家粮食安全,持续增加农民收入,急需培育大量的新型职业农民。教育培训是提升农民生产经营水平、提高农民素质的最直接且最有效的途径,也是新型职业农民培育的关键环节和基础工作。为推广新型职业农民培育,促进乡村经济振兴。本研究在平顶山市的一市(县级市)三县进行,以问卷调查和实地调研得到的数据为基础,分析了我国新型职业农民培育的基本情况、存在的问题,并提出了相应的对策和建议。 相似文献
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激素是家畜机体内分泌腺和外分泌腺所产生的一种特殊的化合物质,对家畜正常生理功能、健康成长有着较强的对应性效应。家畜有机体无论缺乏任何一种激素,都会影响到家畜的正常发育,发生相应的疾病。本文就内、外分泌腺所产生的激素及激素的作用,缺乏激素所产生的疾病作一论述。 相似文献
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在马传染性贫血病毒(EIAV)基因转移载体成功构建并优化的基础上,构建了EIAV基因转移载体包装盒表达重组质粒.分别根据EIAV驴胎皮肤细胞弱毒疫苗株感染性分子克隆(pLGFD3-8)和驴白细胞弱毒疫苗株感染性分子克隆pOK8266T序列,设计并合成引物,扩增EIAV gag/pol全基因和rev基因的第2个外显子,分别插入真核表达载体pCDNA3.1(+),获得表达载体pCDFGP和pCDREV,与亲本株的核苷酸同源性分别是99.6%和99.8%, 编码蛋白Gag、Pol及Rcv蛋白的推测氨基酸同源性分别为99.2%、98.3%和100%.利用脂质体法,分别将pCDFGP和pCDREV单独及共转染HEK293细胞,利用EIAV阳性血清分另7进行间接免疫荧光抗体试验OVA)和蛋白免疫印迹试验(western blot),检测外源蛋白的表达情况.结果表明,双质粒共转染的细胞中转染后48 h可检测到特异性荧光,转染后60 h的细胞裂解产物中可以检测到55 ku的Gag蛋白及26 ku的p26蛋白,而单独转染pCDFGP和pCDREV的细胞,IFA和western blot试验结果均为阴性.结果表明同时存在gag/pot和rev 基因第4外显子的情况下,EIAV包装盒才能表达. 相似文献
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本研究在马传染性贫血病毒（EIAV）基因转移载体pcPPTPRE（＋）的基础上[含有报告基因增强绿色荧光蛋白（EGFP）和人乙型肝炎病毒转录后调控元件（HARE）1,对其转录后调控元件和外源基因启动子进行优化。参考土拨鼠肝炎病毒（Woodchuck hepatitis virus,WHV）基因组序列和人巨细胞病毒增强子／鸡B—actin启动子序列（CAGp）,设计合成2对引物,分别扩增WHV转录后调控元件（WARE）和CAGp片段,正向插入pcPPTPRE（＋）获得重组质粒pcPPTWARE和pcPPTWCAG。将获得的EIAV转移载体pcPPTWARE和pcPPTWCAG以及pcPPTPRE（＋）,脂质体法分别转染人胚肾细胞HEK293和鸡胚成纤维细胞系DF-1,转染后12h、24h、36h、48h在荧光显微镜下观察特异性绿色荧光的表达。48h后收获细胞,利用流式细胞仪检测转染细胞中表达EGFP的阳性细胞。结果表明,在HEK293细胞中pcPPTWARE和pcPPTWCAG的阳性细胞平均百分率均极显著高于pcPPTPRE（＋）（P〈0．01）,pcPPTWCAG显著高于pcPPTWARE（P〈0．05）;pcPPTWCAG的平均道数值极显著高于pcPPTPRE（＋）和pcPPTWARE,pcPPTWPRE显著高于pcPPTPRE（＋）。在DF-1细胞中pcPPTWARE和pcPPTWCAG的阳性细胞平均百分率均显著高于pcPPTPRE（＋）,而pcPPTWARE和pcPPTWCAG的平均道数值均极显著高于pcPPTPRE（＋）,pcPPTWCAG显著高于pcPPTWARE。本研究利用WARE和CAGp优化构建了EIAV基因转移载体pcPPTWCAG,获得了较强的基因表达能力,为以鸡为宿主进行转基因研究提供了条件。 相似文献
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【目的】为了提高马传染性贫血病毒(EIAV)基因转移载体质粒pcPPTPRE(+)的外源蛋白表达能力,对其转录后调控元件进行优化。【方法】将PCR扩增土拨鼠肝炎病毒(Woodchuck Hepatitis Virus,WHV)转录后调控元件(WPRE),克隆于pGM-T载体获得重组质粒pGM-WPRE,利用NotⅠ酶将WPRE亚克隆入pcPPTPRE(+),筛选WPRE正向连接的重组质粒pcPPTWPRE,采用磷酸钙法分别将pcPPTWPRE和pcPPTPRE(+)转染HEK293细胞和DF-1细胞,利用荧光显微镜观察EGFP蛋白的表达,利用流式细胞仪检测转染细胞中EGFP阳性细胞的表达率。【结果】在HEK293细胞中,pcPPTWPRE表达外源基因的能力极显著优于pcPPTPRE(+);在DF-1细胞中,pcPPTWPRE与pcPPTPRE(+)表达外源基因的能力均不强,但前者略优于后者。【结论】土拨鼠肝炎病毒转录后,调控元件(WPRE)可以明显增强EIAV载体质粒的外源蛋白表达能力,为高表达能力伪型EIAV重组病毒的获得奠定了基础,同时也为其他病毒载体的构建提供了借鉴。 相似文献
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