番茄果实成熟过程中SlSWEET7a的功能分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

程杰  张新圣  李安琪  姜晶 《中国农业科学》2018,51(15):2958-2968

【目的】SWEETs(sugars will eventually be exported transporters)是一种糖转运蛋白,参与植物生物进程,对植物生长发育、响应各种胁迫、宿主-病原体的互作发挥作用。克隆番茄SWEET7a,通过构建Sl SWEET7a沉默和过表达载体,研究其在糖的转运过程中的作用,为探索SWEETs在植物果实发育过程中的功能提供理论依据。【方法】以Micro-Tom(Solanum lycopersicum)番茄为试材,利用RT-PCR技术从果实中克隆SWEET7a的c DNA全长842bp,进行生物信息学分析,并利用MEGA6.0构建拟南芥进化树,与Sl SWEET7a进行蛋白序列同源性分析;利用实时荧光定量PCR技术探明其在果实发育时期的时空表达特征分析,并构建基因的沉默和过表达载体,通过农杆菌介导的果实注射法进行瞬时表达检测构建载体的表达效率;然后进行番茄的遗传转化,获得T1代转基因株系,利用实时荧光定量PCR技术检测绿熟期果实SWEET7a的表达,通过高效液相色谱法检测转基因果实和叶片中糖组成与含量的变化。【结果】Sl SWEET7a蛋白结构是由7个跨膜结构域构成的。同源性比对分析结果显示,Sl SWEET7a与拟南芥At SWEET6和At SWEET8序列同源性较高,都属于SWEETs家族的CladeⅡ。番茄果实各部位的表达分析显示,Sl SWEET7a在绿熟期果柄、果实维管束相对表达量最高,转色期和红熟期相对表达量较低。构建SWEET7a沉默(S7a)及过表达载体(OE7a)在番茄果实的瞬时表达,发现OE7a样品果实中Sl SWEET7a的表达量是未注射果实的6倍,其Sl SWEET7a表达量明显上调,与对照相比,S7a样品果实中Sl SWEET7a明显下调了5倍。在番茄中的遗传转化中卡那霉素抗性筛选获得10株可能的超表达T0代植株,PCR鉴定得到了Sl SWEET7a超表达8株;沉默株系经除草剂筛选,获得14株,PCR检测得到10株沉默株系。T1代植株的实时定量分析显示,过表达Sl SWEET7a植株发生转基因沉默现象,Sl SWEET7a表达量显著低于正常植株,而沉默植株表达量也降低,说明获得的过表达植株也发生了基因沉默。果糖、葡萄糖和蔗糖含量测定结果表明,降低番茄中Sl SWEET7a的表达,植株成熟叶片和绿熟期果实中果糖、葡萄糖和蔗糖含量均高于对照,尤其是叶片中蔗糖含量显著高于对照,这说明Sl SWEET7a对细胞中蔗糖的易化扩散起着重要作用。【结论】Sl SWEET7a对叶片中蔗糖向源组织韧皮部的装载及果实果柄、维管束的运输、卸载起重要调控作用。  相似文献   

缬草挥发油的微波辅助提取工艺及其抗氧化活性     

李小红  吴地尧  李安  张静宜  吴德智 《江苏农业科学》2018,(8)

以缬草根茎为原料,以缬草挥发油得率为指标,采用微波辅助水蒸气蒸馏法对缬草挥发油提取工艺进行单因素分析,并通过Box-Behnken响应曲面试验进行优化,分别用还原力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(简称DPPH)自由基清除力和羟自由基清除力对其抗氧化能力进行研究。结果表明,缬草挥发油微波提取的最佳工艺条件为微波功率330 W、提取时间25 min、液料比8.6 m L∶g,在此条件下提取的缬草挥发油得率为(5.92±0.07)%。微波提取的缬草挥发油对DPPH自由基、羟自由基均有较强的清除能力及较高的还原力,与水蒸气蒸馏法相比具有明显差异,可为缬草油抗氧化产品的开发提供参考。  相似文献   

昭通市实行耕地轮作休耕的探讨     

刘仁平  李安艳  方智勇 《南方农业》2018,(26)

耕地是粮食生产的根本和载体,近年来,我国整体粮食产量逐年递增,但在耕地资源和环境上出现了很多新的挑战。基于此,根据以往工作经验,对云南省昭通市耕地环境和耕地质量情况进行分析,并从重金属污染区、城郊蔬菜和花卉种植区、大棚设施覆盖区和长期地膜覆盖区、大中城市郊区四方面,论述了轮作休耕的主要方法和措施。  相似文献   

朱砂叶螨V-ATP酶H亚基基因克隆及特征分析     

王谦稳  陈耔霖  李安琪  任争光  卜春亚 《北京农学院学报》2023,(4):15-19

【目的】为了寻找有效防治朱砂叶螨的生物学方法。【方法】克隆朱砂叶螨V-ATPaseH基因,对该基因序列进行生物学特征分析;采用实时荧光定量PCR技术对V-ATPaseH进行不同时期表达特征分析。【结果】成功克隆V-ATPaseH基因(GenBank登陆号：OQ834270),基因全长1 540 bp,阅读开放框为1 475 bp,编码491个氨基酸;V-ATPaseH在朱砂叶螨的卵、幼螨、若螨、成螨4个时期均有表达。其中以朱砂叶螨成螨时期表达量最高,其次是若螨、卵,幼螨时期表达量最低。【结论】克隆得到朱砂叶螨V-ATPaseH基因,明确其不同时期的表达特征,为今后研究以V-ATP酶为靶标的新型生物农药杀螨剂研制奠定基础。  相似文献   

烟草水旱两段式育苗与漂浮育苗对比研究     

李安  王可  姜宝迪  汤烨 《现代农业科技》2020,(3)

为实现烟叶生产高质量发展,研究不同育苗方式对烟叶产质量的影响,选择出最适宜的育苗方式。通过采取漂浮育苗与营养钵假植相配合的水旱两段式育苗方式,培育根系,缩短返苗期,从而达到壮苗、提质、增产增收的目的。通过分析大田农艺性状、烤后烟叶外观质量等,结果表明,水旱两段式育苗在农艺性状、烟叶产质量、减少病害发生等方面优于漂浮式育苗。  相似文献   

一株猪伪狂犬病病毒的主要毒力相关基因的变异分析及其对家兔的致病性     

袁生  李安琪  吕文珂  羊露露  周峰  黄良宗  白挨泉  温峰  黄淑坚  郭锦玥 《畜牧兽医学报》2023,(5):2195-2199

旨在了解目前广东省伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)流行变异情况，本研究采集了2020年广东省佛山市某规模化养猪场疑似PRV感染的病猪血液样本，接种PK-15细胞后，运用透射电镜和间接免疫荧光方法鉴定为PRV,并将其命名为GDFS2020株；分析主要毒力基因gB、gC、gD、gE和TK编码氨基酸序列进行分子特征及遗传进化分析，结果显示，该毒株为国内变异株，但有个别氨基酸位点发生了突变；家兔致病性试验结果表明，接种组家兔肝边缘有梗死，心、脾、肾及脑组织均有充血、肿大和淤血等病变；病理组织切片结果显示，脑组织神经元变性萎缩，核略微皱缩，空隙增多变大等明显的病理变化。以上结果表明，本试验成功分离了1株PRV变异株，并对家兔具有较强致病性，为广东省PRV流行病学研究及遗传进化提供了参考数据。  相似文献   

酶法提高蓝莓果花色苷与总酚溶出率的工艺条件研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

马永强  李安  那治国  张连雪 《农产品加工．学刊》2012,(4):48-53

比较了纤维素酶、果胶酶以及复合果汁酶对蓝莓果浆的酶解效果,确定果汁酶具有最佳的提高花色苷及总酚溶出率的能力。通过单因素试验及正交试验,确定最佳酶解条件为酶添加量0.2 g/L,酶解温度60℃,酶解时间60 min。经酶解后的蓝莓果清汁中花色苷质量浓度达到410 mg/L,花色苷的提取率达到14.1%,较未经酶处理蓝莓果清汁中花色苷的提取率提高了2.17倍;总酚质量分数达到175.1 mg/100 g,提取率达到21.8%,较未经酶处理蓝莓果清汁中总酚的提取率提高了1.95倍。  相似文献   

基于海藻酸钠与鸡蛋黄静电聚集作用的低脂蛋黄酱制备     

郭绰  郭玉蓉  李安琪  李晓飞  李培源  杨曦 《农业工程学报》2020,36(10):269-276

为了拓展海藻酸钠和鸡蛋黄蛋白质在低脂蛋黄酱质构设计方面的应用,该研究首先探究了海藻酸钠和鸡蛋黄分散液在不同酸性pH值条件下的聚集行为,并基于两者的静电聚集作用设计出油相比为30%(体积分数)且具有明显黏弹性和触变性的低脂蛋黄酱产品,同时以油相比为75%的蛋黄酱作对照。结果表明,当pH值低于5.0时,海藻酸钠携带负电荷,鸡蛋黄分散液携带正电荷,两者可发生明显的静电聚集作用,海藻酸钠和鸡蛋黄复合体系的结构强度增加。当白醋添加量高于2%(体积分数)时,海藻酸钠和鸡蛋黄复合体系的pH值降低至5.0以下,可诱导复合体系发生静电聚集作用,白醋添加量越高,聚集作用越明显,低脂蛋黄酱的结构化程度也越高。然而,过量的白醋添加降低了低脂蛋黄酱的热稳定性,同时也影响了产品的风味和感官接受度。综合而言,当白醋添加量为4%时(pH值4.6),制备的低脂蛋黄酱流变学特性和对照组最为接近,且感官接受度较好。该研究结果可为构建低脂食品提供理论参考。  相似文献   

感冒药可别乱吃     

李安 《农家致富》2013,(10):58-58

感冒看似事小,许多人因为工作、学习忙,往往选择自行服药。医师强调:普通感冒虽然是最常见的急性呼吸道感染性疾病,但普通感冒并不普通,感冒症状不仅会严重影响我们的日常工作和生活,也有可能引起其他严重并发症。所以,感冒需对症治疗,科学服用感冒药。  相似文献   

新型反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)鉴别猪瘟强毒和弱毒疫苗方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

李安  崔言顺  沈志强  谢金文  王金良  曲光刚  李峰  李建亮 《中国兽医学报》2011,31(1)

对GenBank中登录的25株猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株基因组全序列进行比较分析,在其高度保守区设计1对通用引物,扩增片段为609bp,并在该对引物扩增区域内设计针对疫苗弱毒的特异引物,扩增片段为237bp,建立一种能够区分猪瘟病毒强毒和疫苗弱毒的敏感、特异、重复性好的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)鉴别诊断方法。该方法能将我国大陆地区流行的不同基因亚群的猪瘟病毒强毒与疫苗弱毒完全区分开来,且不与牛病毒性腹泻病毒及其他猪源病毒发生非特异反应。应用本试验建立的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)方法可以及早对猪瘟作出准确诊断,并可将强毒感染猪迅速从弱毒疫苗免疫猪群中筛选出来,减少了未感染免疫猪被误杀的可能性。  相似文献