猪圆环病毒2型去核定位信号ORF2基因的原核表达与初步应用     

苗丽娟  符芳  王小武  陈微晶  鲁晶红  李曦 《中国预防兽医学报》2008,30(5):384-388

根据PCV2-871病毒株的已知序列设计一对引物,PCR扩增其去核定位信号的Cap基因（ORF2）。通过BamHⅠ/HindⅢ双酶切位点将其克隆到表达载体pQE-32中,转化大肠杆菌M15。经IPTG诱导表达、SDS-PAGE鉴定,表明去核定位信号的Cap蛋白可以大量表达。Western blot、ELISA鉴定蛋白活性。继而。以重组蛋白为抗原包被ELISA板,对28份临床样品进行检测。结果表明,该蛋白具有良好的抗原活性,可以作为抗原应用于临床样品的检测。  相似文献   

猪瘟病毒野毒株与疫苗株双重SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立     

王伟  符芳  陈欣  李雪松  李海忠  李曦 《中国预防兽医学报》2010,32(11)

为建立猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒疫苗(C株)与野毒株的快速鉴别检测方法,本研究根据GenBank登录的CSFV C株与野毒株的E2基因序列差异,设计2对特异性引物,建立了同时检测C株与野毒株的双重SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。应用该方法对CSFV野毒和疫苗株的最低检出量为10拷贝;检测牛病毒性腹泻病毒Ⅰ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒和猪圆环病毒2型4种病毒均呈阴性;批内、批间重复试验的变异系数均低于3%。应用该方法检测从黑龙江省各地区猪场采集的600份样品,结果表明野毒株的阳性率为30.5%。该方法可应用于CSFV野毒株和C株的鉴别检测。  相似文献   

豫西地区软籽石榴冻害成因及防冻措施     

李曦 《现代农业科技》2018,(14)

软籽石榴在豫西地区广泛种植,但其耐寒性较当地石榴明显较差,软籽石榴的越冬冻害是豫西地区该品种丰产的主要障碍。为了探究和预防低温对软籽石榴造成的冻害,经过数年的观察,详细分析了软籽石榴冻害的成因,提出了预防软籽石榴冻害的技术措施,旨在为豫西地区软籽石榴的生产管理提供帮助。  相似文献   

芽胞杆菌抗菌二肽溶杆菌素的研究进展     

吴黎明  李曦  伍辉军  高学文 《南京农业大学学报》2018,(5)

抗菌二肽溶杆菌素(Bacilysin)由L-丙氨酸残基和L-不典型的氨基酸抗荚膜菌素(Anticapsin)残基组成,是目前已知的芽胞杆菌合成的结构最简单的肽类抗菌物质之一。Bacilysin的作用靶标6-磷酸葡萄糖胺合成酶是微生物细胞壁合成关键酶,它对真菌和细菌都具有广谱的抗菌活性,因此,Bacilysin在农业和医药领域具有广阔的应用前景,近年来成为了天然产物的研究热点。本文综述了Bacilysin在生物合成途径及调控、抗菌功能和作用机制等方面的研究进展,提出Bacilysin在生产实践中存在的主要问题并展望了Bacilysin的研究趋势,以期为Bacilysin的研发和应用提供参考。  相似文献   

禽流感病毒新疆株A/Duck/XJ/4的NP基因序列分析     

夏俊  沙依兰古丽  汪萍  成进  符子华  巴格德力  盛卓君  李曦  崔尚金 《新疆农业大学学报》2008,31(3):9-12

用RT-PCR法,以1株H5N1亚型禽流感病毒新疆分离株A/Duck/XJ/4为模板,扩增了NP全基因cDNA,克隆至T载体,并进行序列测定.序列分析结果表明:扩增的NP基因全长1518bp,最大的开放阅读框在18～1514bp,编码499个氨基酸.将A/Duck/XJ/4毒株NP基因序列与15株A型流感病毒NP基因序列进行比较,各毒株间NP基因核苷酸序列同源性81.4%～99.0%,编码的氨基酸同源性在92.8%～99.6%.  相似文献   

GPMV HN基因于禽痘病毒载体中的构建与表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨玉菊  李曦  王君伟  马德滨  魏红  吴伟峰  吴疆 《东北农业大学学报》2009,40(5)

本研究利用基因重组技术构建含有鹅副粘病毒主要保护性抗原基因-HN基因和报告基因-LacZ基因的重组禽痘病毒转移载体;利用脂质体介导的方法将所构建的转移载体与禽痘病毒FPV-017共感染鸡胚成纤维(Chicken Embryo Fibroblasts,CEF)细胞,通过蓝白筛选获得重组病毒;间接免疫荧光试验结果显示重组禽痘病毒中HN基因在CEF细胞中获得表达,并且表达产物具有良好的反应原性;为进一步的重组禽痘病毒的免疫保护性的研究奠定基础。  相似文献   

中国东北地区3株日本脑炎病毒株的分离鉴定及基因分型   总被引：2，自引：0，他引：2  

张永欣  符芳  宋淑萍  李曦  吴东来 《东北农业大学学报》2009,40(6)

从黑龙江省某3个猪场采集疑似为日本脑炎病毒感染的病、死猪的脏器以及全血,进行病毒的细胞培养,蚀斑纯化,间接免疫荧光试验,电镜下观察病毒粒子的形态,及RT-PCR检测。结果显示,盲传三代后,出现明显的细胞病变(CPE+~CPE+++);荧光显微镜下细胞胞质内呈现不同强度的绿色荧光信号;电镜下的病毒粒子为40~60nm的球型粒子;PCR检测为日本脑炎病毒阳性。通过对3株分离株Prm扩增序列比较,此3株分离株为基因Ⅲ型。  相似文献   

2007年美国盆栽垂吊植物新品种(三)     

李曦 《农业工程技术:农产品加工》2008,(1):60-61

泛美公司矮牵牛(茄科碧冬茄属)品种'Eosy Wove'.该品种生长迅速,花期早.它对高温和低温都有一定的抗逆性,在整个生长季都有良好的表现.它有8个单色,5个复色.  相似文献   

我国丘陵山区中药材生产机械化发展现状与对策建议     

冯健  李曦  雷爱萍 《农机科技推广》2023,(11):35-36

<正>中药资源是国家重要的战略资源,是维护人民健康的重要医药物资,是中药事业发展不可或缺的重要保障。我国作为中药材的重要生产国之一,中药材种类繁多、分布广,全国各个省市均有种植。据不完全统计,全国中药材主产区种植面积近3000万亩,并且呈快速增长的态势。近几年,我国中药材种植区域正由大田逐步转向山坡地、路旁、荒地、沙地和林下地,许多农民利用本地资源优势,  相似文献   

芒果bZIP转录因子基因的克隆、亚细胞定位及表达分析     

李健  李曦  农艳丰 《江苏农业科学》2023,(21):29-36

碱性亮氨酸拉链(bZIP)转录因子在调控植物生长发育及抵抗非生物胁迫过程中具有重要作用。本研究通过RACE技术，获得了全长1 317 bp的芒果bZIP转录因子基因(MibZIP46)。系统进化树分析结果表明，MibZIP46与同样是漆树科的阿月浑子的bZIP亲缘关系最为接近，同源性最高，与甜橙的同源性次之。构建了原核表达重组质粒pCZN 1-MibZIP46,经0.2 mmol/L IPTG诱导，目的蛋白以包涵体的形式表达，经镍柱纯化，获得高纯度(90%)的目的蛋白并成功进行Western blotting鉴定；MibZIP46蛋白的亚细胞定位分析结果表明，融合的目的蛋白在烟草叶片细胞中定位于细胞核；实时荧光定量PCR分析结果表明，200 mmol/L NaCl、15%PEG和0.1 mmol/L ABA胁迫处理，均能不同程度诱导MibZIP46的表达。本研究为进一步挖掘利用芒果的抗逆相关基因提供了理论依据。  相似文献