禽传染性支气管炎病毒S1蛋白单克隆抗体制备及其中和抗原表位的鉴定     

彭莉  张焕东  李忠斐  肖鹏  颜焰  董伟仁  周继勇  廖敏 《中国兽医学报》2023,(12):2425-2432

为鉴定禽传染性支气管炎病毒(IBV)刺突(S1)蛋白的中和抗原表位，本研究通过IBV全病毒免疫BALB/c小鼠，经融合、亚克隆筛选获得了4株稳定分泌抗IBV S1蛋白抗体的杂交瘤细胞株4A11、1B11、5E5和7C9。经鉴定制备的单克隆抗体腹水抗体ELISA效价为10⁶以上，Western blot和间接免疫荧光试验分析显示该单克隆抗体反应性和特异性良好。随后用8种基于S1分型的IBV毒株为试验毒株，同实验室已有的8株IBV S1单抗(1E9、1H1、1E4、3C6、3C7、2F3、2E5、4F9)共12株单抗进行气管环中和活性检测，发现S1蛋白单抗与8种S1亚型的毒株均有不同程度的中和作用。随后，在抗原表位和Western blot分析的基础上，鉴定出单克隆抗体识别的抗原表位区域，获得了6个中和抗原表位，其中除⁴¹⁶IQTRTEP⁴²²表位，其他5个表位仍未有相关报道。本研究成功制备出4株特异性识别S1蛋白且具有中和活性的单克隆抗体，不仅丰富了IBV的单克隆抗体库，为今后研究IBV S1蛋白分子结构提供了关键生物材料...  相似文献   

我国部分地区1996-2008年传染性支气管炎病毒分离株膜蛋白基因的遗传变异与系统进化分析     

时莉  肖朝庭  宋翥远  张秀美  阿合买提·买买提  周继勇 《中国兽医寄生虫病》2009,17(2):31-37

1996-2008年从我国不同地区分离30株传染性支气管炎病毒（Infectious Bronchitis Viruses,IBV）野毒株的M基因,采用RT-PCR方法克隆测定所分离的野毒株和澳大利亚T株的M基因序列,利用生物信息学软件与GenBank中公布的部分国内外IBV毒株的M基因序列进行比较分析,研究我国IBV的分子流行学特点和分子遗传变异规律。结果发现所测毒株M基因具有4种不同长度的开放阅读框：669bp、672bp、678bp和681bp,分别编码222、223、225和226个氨基酸的多肽,这些长度的差异是由5′端的核苷酸插入或缺失造成的。30个IBV分离株间的同源性在89．5％～100％之间。以疫苗株H120氨基酸位置为参照,在被比较的73株IBVM蛋白中发现62个位点存在变异,其中以2～5、10～16、44～46、217～222等4个区域氨基酸取代率较高。系统进化分析显示,被比较的73个IBV毒株分为5个进化群,我国的IBV分属于其中的4个群,其中第一群和第四群与我国所使用的疫苗病毒株相距较远。同时发现部分近年的分离株与10多年前分离株具有很近遗传进化关系。从M基因看,在我国出现了多种基因型IBV共存的现象,分离株与疫苗株的遗传差异提示我们需要对疫苗的选用做出重新评估。  相似文献   

兽医学学科发展报告——免疫学、微生物学部分——兽医免疫学学科发展     

杨汉春  焦新安  周继勇 《中国家禽》2008,30(9):26-31

近年来，我国兽医学学科得到了前所未有的发展，取得了骄人的进展，在动物疾病，特别是传染病的预防与控制技术方面取得了重大成就，为我国畜牧业生产大国地位的确立提供了强有力的技术支撑。然而，我国兽医学学科与国际先进水平相比仍有一定的差距，还需要广大科技术工作者不断努力攻关。  相似文献   

水稻细菌性条斑病发生与防治     

刘新华  李玲燕 《植物检疫》1994,8(5):301-302

水稻细菌性条斑病发生与防治刘新华，李玲燕（广东梅江区农牧局梅州市５１４０３１）水稻细菌性条斑病（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｏｒｙｚｉｃｏｌａ）是水稻上的细菌性病。广东梅江区经５年１０次调查，早、晚稻均有发生，虽是各季稻发生面积小，可是病情来势凶、发展快、...  相似文献   

肾型鸡传染性支气管炎病毒J株S1基因克隆和序列分析     

周继勇  何永强 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2000,26(4):369-373

  相似文献   

猪圆环病毒2型Rep蛋白在真核细胞中的表达与定位     

张鑫  尹伟  金玉兰  何嘉玲  颜焰  周继勇 《中国兽医寄生虫病》2009,17(1):1-6

为了构建Rep蛋白真核表达质粒，研究PCV2复制过程中的亚细胞分布。本研究借助PCR方法扩增PCV2的Rep基因，并将其亚克隆到真核表达载体pEGFP-C3中，并转染PK15细胞和Vero细胞。结果显示，重组的pEGFP—PCV2-Rep融合蛋白能够在PK15细胞和Vero细胞中表达。结论认为pEGFP—PCV2-Rep质粒转染PK15细胞和Vero细胞后48h，PCV2的Rep蛋白主要定位在PK15细胞和Vero细胞的细胞核。  相似文献   

猪圆环病毒2型HZ0201株分子克隆的感染性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈婷飞  周继勇  陈庆新  商绍彬 《中国预防兽医学报》2007,29(2):86-91

  相似文献   

鸡传染性支气管炎病毒嗜腺胃毒株（ZJ971）株S2基因的克隆及序列分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

沈行燕  周继勇  丁红梅  吴建祥  严庆丰 《中国兽医学报》2001,21(6):540-542

  相似文献   

转基因植物生产基因工程疫苗技术   总被引：5，自引：0，他引：5  

吴建祥  周继勇  于翠 《中国预防兽医学报》2001,23(2):157-159

用转基因植物生产有用的外源蛋白是一个有吸引力的廉价生产系统，它可能替代传统的外源蛋白生产体系。通过外源基因的瞬时表达或稳定表达方式，多种基因工程疫苗已在植物中表达成功，并保持良好的免疫原性。本文概要介绍了国内外利用转基因植物生产疫苗的研究现状，并对转基因植物生产疫苗的潜在优势、存在的问题及其相关技术作一综述。  相似文献   

传染性法氏囊病病毒变异株弱毒的遗传稳定性与免疫原性     

周继勇  李建荣 《中国兽医学报》2000,20(4):317-320

将传染性法氏囊病病毒 ( IBDV) JD1 、JD2 、NB变异毒株直接适应于鸡胚成纤维细胞上致弱。 3个毒株2 1代和 3 5～ 3 8代细胞毒分别连续回归鸡体 5代。结果表明 ,IBDV JD1 株 2 1～ 3 5代、JD2 株 3 7代、NB株 3 8代细胞毒对雏鸡已基本失去致病力 ,是毒力相对稳定的弱毒株。 IBDV JD1 、JD2 、NB变异株弱毒以 3 0 0 0TCID5 0 、50 0 0 TCID5 0 、1 0 0 0 0 TCID5 0 、1 50 0 0 TCID5 0 4个不同免疫剂量免疫 SPF鸡后的攻毒试验结果表明 ,JD1 、NB毒株的免疫效果明显优于 B87、Bursine3毒株疫苗 ,具有优良的免疫原性。JD1 、NB毒株的最佳免疫剂量分别为 50 0 0 TCID5 0 、3 0 0 0 TCID5 0 。抗体消长规律表明 ,JD1 株疫苗一次免疫后的有效保护期为 2 1 4d,最低有效中和抗体保护效价为 1∶ 4 0 71。  相似文献