鸡传染性支气管炎病毒腺胃分离株的分子鉴定     

程丽琴  周继勇  John Dikki  沈行燕  陈吉刚  张德勇 《中国农业科学》2003,36(10):1228-1232

 从发病鸡场中收集的腺胃肿大病料(编号为2/97、3/97和1/98),经匀浆和无菌处理后在SPF鸡胚中传代、分离和鉴定。结果显示,接种病料培养的鸡胚可干扰新城疫病毒的复制;这些分离毒株可与阳性标准参考株IBV抗血清反应,但表现出较低的中和反应能力。在理化和血凝特性等鉴定的基础上,参照已发表的IBV Beaudette毒株S1基因序列,设计并合成1对含有EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的特异性引物,利用RT-PCR技术扩增到分离毒株3/97、2/97、1/98长度为1.93kb的cDNA片段,并将其cDNA片段插入到克隆载体pBlueScript-SK(+)中,进行核苷酸序列的测定,确证所扩增和克隆的cDNA片段由1930个碱基组成,并编码1条由620个氨基酸组成的多肽。与GenBank中其它IBV S1基因序列进行比较,发现3/97、2/97和1/98毒株与所比较的IBV毒株核苷酸的一致性为73.6％～99.7％,氨基酸的一致性为78.4％～99.7％。  相似文献   

SARS-CoV核衣壳蛋白的体外表达及单克隆抗体功能鉴定          下载免费PDF全文

陈洪勋  严兴成  应建跃  吴建祥  周继勇 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2005,31(2):232-236

为对SARS N蛋白的功能进行研究,并建立快速、方便的诊断方法,将已克隆、构建成功的重组质粒PGEX-4T/N转化至E.coli BL21中,IPTG诱导表达,表达产物与兔源GST多抗在66 kD处有很强的反应性,融合蛋白GST-N分别通过GSTrap FF 1 mL纯化柱和割胶纯化两种方法获得了具有生物活性和变性的融合蛋白.其蛋白浓度分别为0.85 mg/mL和0.433 mg/mL.利用纯化的GST-N蛋白免疫SPF BALB/c小鼠,获得4株能稳定传代并分泌抗SARS N单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞,分别命名为3E5、6B9、4C2、4B7,经Western blot分析表明,所获得的4株抗SARS N单克隆抗体与纯化的N蛋白均具有特异反应性,且不与禽冠状病毒的N蛋白发生反应.  相似文献   

干旱锻炼对小麦幼苗期形态指标的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘义国  万雪洁  张艳  李玲燕  周宣材  孙新灵  郭卫卫  师长海 《西北农业学报》2022,(2):157-163

为了探讨干旱锻炼对小麦幼苗期形态指标的影响,对经过干旱锻炼的小麦在不同程度干旱胁迫下小麦的苗高、苗鲜质量、叶相对含水量、叶干质量以及叶绿素含量等形态指标进行动态研究。结果表明,与对照相比,经过干旱锻炼的小麦幼苗在干旱胁迫条件下的苗高、苗鲜质量和叶干质量都相对较高,叶片的相对含水量减少程度显著降低。叶绿素含量均呈现先升高后降低的趋势,但在较低胁迫下经过干旱锻炼的叶片叶绿素含量降低较少。由此得出小麦幼苗期干旱锻炼能显著提高小麦的耐旱性。  相似文献   

猪圆环病毒2型抗体跟踪检测和灭活疫苗免疫效果观察   总被引：1，自引：0，他引：1  

周志平  朱晓路  徐华君  郑立栋  徐学平  孙仁华  金晓林  周继勇 《猪业科学》2011,(11):44-48

用Rnls-dCap猪圆环病毒2型抗体酶联免疫检测试剂盒检测杜大长商品仔猪血样143份,其中断奶仔猪血样阳性率58.33%（14/24）、保育仔猪为36.17%（17/47）、育成猪为70.83%（34/48）、育肥猪为91.67%（22/24）。其中10周龄时抗体阳性率最低为33.33%,至14周龄抗体阳性率已升到5...  相似文献   

鸡减蛋综合症病原分离鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

周继勇  敖平 《中国畜禽传染病》1994,(2):5-9

通过鸭胚传代，病毒中和试验，Ｈ１交叉试验，理化特性测定，血凝谱试验，琼脂免疫扩散试验，电镜观察证实，我们所分离的病原为减蛋综合症病毒（暂定为ＥＤＳＶ－Ｒ９３１），该病毒的鸭胚毒价为１０＾１４．４４ＥＩＤ５０／０．１ｍ１。  相似文献   

“保健增乳乐”对动物高脂血症病理模型的影响：I对家兔实验性高脂血？…     

周继勇  曾忠良 《中兽医医药杂志》1991,(5):12-14

  相似文献   

正确使用禽用抗生素     

周继勇 《四川畜牧兽医》2002,29(8)

如何正确使用抗生素,笔者提出以下几点建议供大家参考: 1对因用药根据临床诊断,弄清致病微生物的种类及其对药物的敏感性.对所选药物的抗生素特点、药代动力学、适应症和不良反应,应有深入的理解.疾病确诊后应选用作用强、疗效好,不良反应少且经济的抗生素.  相似文献   

鸡白细胞介素-2基因在Pichia methanolica酵母中的表达   总被引：5，自引：1，他引：5       下载免费PDF全文

周继勇  陈吉刚  王金勇  张德勇  郑肖娟 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2003,29(4):419-423

鸡白细胞介素-2(chIL-2)是近年来新发现的一种禽类细胞因子.为建立用甲醇型酵母Pichia methanolica (P. methanolica)表达鸡白细胞介素-2基因(chIL-2)的新途径,将chIL-2基因插入到P. methanolica分泌型表达载体pMETαA构建了重组PMAD11表达菌株(pMETαA/rchIL-2).经SDS-PAGE、Western印迹测定,证实chIL-2基因在P. methanolica中表达成功,rchIL-2的分子量约为16 kDa,其表达量占分泌总蛋白的35%.  相似文献   

鸡传染性支气管炎病毒H52毒株S基因的克隆及序列分析          下载免费PDF全文

程丽琴  周继勇  沈行燕  陈吉刚  陈声明 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2002,28(3):303-306

将含有鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H52毒株的尿囊液浓缩,用TRIzol 试剂抽提病毒RNA作为反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的模板,参照已发表的IBV-Beaudette 株S基因序列,设计并合成一对特异性引物,扩增得到长度约3.6 kb 的S基因片段,利用引物设计中EcoR I和BamH I 酶切位点插入到克隆载体pBlueScript SK 的多克隆位点中,转化感受态E.coli DH5α.经酶切分析和PCR等方法鉴定,筛选出阳性克隆,进行核苷酸序列测定,证实获得了S 基因的全长序列.利用DNAstar等分析软件与GenBank中其它IBV毒株的核苷酸及其推导的氨基酸进行序列同源性比较分析,结果表明,H52毒株与已报道的核苷酸的同源性在83.45%～99.71%之间,氨基酸的同源性在82.10%～99.26%之间.  相似文献   

猪圆环病毒2型Cap蛋白互作宿主核蛋白的筛选与鉴定     

余涛  胡婧宇  司维  颜焰  董伟仁  顾金燕  周继勇 《中国兽医学报》2024,(1):20-28

为探究在猪圆环病毒2型(PCV2)入核复制过程中发挥生物学功能的宿主核相关蛋白,本研究借助免疫沉淀技术联合蛋白质谱鉴定技术,从宿主细胞核膜提取物中筛选到了可与PCV2 Cap蛋白发生潜在互作的2个蛋白质：高迁移率族蛋白1(HMGB1)和精氨酸酶1(ARG1)。通过进一步的免疫共沉淀试验及激光共聚焦试验,证明了HMGB1、ARG1与PCV2 Cap蛋白的相互作用,且互作与Cap蛋白的核定位信号(NLS)无关。该研究为进一步探索PCV2入核复制的机制解析提供了重要信息。  相似文献