中国地方品种丝羽乌骨鸡白细胞介素2基因的克隆及遗传进化分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

陈吉刚  周继勇  郑肖娟 《中国预防兽医学报》2003,25(1):21-23

鸡白细胞介素2（ChIL-2)是近年来新发现的一类细胞因子。根据Sundick等发表的鸡IL-2基因序列设计一对特异性引物,从ConA体外激活的脾脏淋巴细胞中提取mRNA,通过RT-PCR方法扩增和克隆了我国地方品种丝羽乌骨鸡IL-2cDNA,丝羽乌骨鸡IL-2基因由734nt组成,编码-由143个氨基酸组成的前体蛋白,基因5’端含有17个核苷酸和3'端含有285个核苷酸组成的非编码区,3'UTR中含有4个重复的“ATTTA”序列。编码蛋白氨基酸与Kestrel,Obese和SC品系的来杭鸡比较,氨基酸的突变主要发生在28-32位,这一区域丝羽乌骨鸡和Kestrel来杭鸡相同,Obese和SC鸡相同,基因系统进化树分析表明丝羽乌骨鸡和Kestrel来杭鸡具有很近的亲缘关系,Lbese和SC鸡具有很近的亲缘关系。中国的药用鸡品种-丝羽乌骨鸡在非常保守的133位发生了氨基酸突变,我们推测这可能与该品种鸡具有很强的抗病能力有关。  相似文献   

猪圆环病毒2型感染的血清学分析   总被引：37，自引：5，他引：37  

周继勇  陈庆新  叶菊秀  朱家新  郑晓娟  商绍彬  阵亭飞  母安雄  周恩民 《中国兽医学报》2004,24(1):1-3

应用间接免疫荧光技术 ,测定了浙江省内 4 4个猪场 2 0 0 0～ 2 0 0 2年间的 2 0 39个血清样本 ,对不同地区、年龄和品种猪的血清学数据进行了系统分析。结果显示 ,浙江省 4 4个猪场均有猪圆环病毒 2型 (PCV2 )感染 ,猪场的感染率为 10 0 % ,全省猪的 PCV2感染的平均血清阳性率为 5 8.31% ,其中种猪感染的血清阳性率为 5 9.38% ,断奶后猪感染的血清阳性率为 5 6 .6 5 %。长白种猪感染的血清阳性率为 4 4 .83%、长白仔猪感染的血清阳性率为 6 4 .2 8% ,明显高于大约克和杜洛克种猪和仔猪的感染率。 PCV2感染的血清阳性率高的种猪和仔猪群 ,其 PRRSV和 Pr V的抗体阳性率低。这些结果说明 ,PCV2在猪群中的感染非常普遍 ,不同品种猪对 PCV2的易感性不同 ,PCV2的感染可降低猪群对疫苗的免疫应答  相似文献   

鸡白细胞介素-2受体基因γ链的转录分析与表达     

顾建友滕巧泱  黄振宇周继勇 《中国兽医科技》2007,37(1):71-77

以脾单个核细胞总RNA为模板，对鸡白细胞介素-2受体基因γ链（chIL-2Rγ）进行了RT—PCR，获得了-1047bp的开放阅读框，编码由348个氨基酸残基组成的分子质量为37．8ku的蛋白多肽。预测的鸡IL-2Rγ多肽链中包含4个保守半胱氨酸残基、1个WSXWS基序和7个N连接的糖基化位点。鸡IL-2Rγ与其他动物IL-2Rγ在氨基酸水平上的同源性仅为21．49／6～38．2％。RT—PCR检测发现，鸡IL-2RγmRNA分布于大脑、小脑、脊髓、腔上囊、脾、胸腺、骨髓、盲肠扁桃体、腺胃、肌胃、空肠、卵黄囊憩室、回肠、盲肠、直肠、心脏、肾、肺、肝、骨骼肌和皮肤，而在十二指肠和睾丸中没有检测到其转录。构建了鸡IL-2Rγ胞外区的原核重组表达载体，进行了表达和鉴定。  相似文献   

鸭白细胞介素2全基因组结构分析     

王金勇  齐静  方杰  颜焰  申会刚  周继勇 《中国兽医学报》2008,28(1):15-19

依据鸡白细胞介素2（chIL-2）全基因组序列设计引物探针,以简易基因组抽提法获得的鸭外周血单核细胞基因组DNA为模板,用长距离聚合酶链式反应（LD-PCR）扩增出鸭白细胞介素2（duIL-2）全基因片段。经序列测定,得到的duIL-2基因组DNA序列全长为3528bp。运用生物信息学方法对duIL-2的基因、启动子结构和cDNA序列编码的成熟蛋白进行系统分析,结果表明,duIL-2基因具有典型的4个外显子和3个内含子结构,和已知禽类及哺乳类同系物基因总体结构具有明显的相似性。鸭和鸡及其他哺乳动物IL-2基因的启动子序列具有显著的保守性,都具有AP-1、NF-AT、CD28RE、OCT、TATAbox转录起始因子结合位点和预测的转录起始位点。duIL-2cDNA序列编码的成熟蛋白进化分析表明,鸭和鹅的亲缘关系最近,和哺乳动物的亲缘关系较远,显示出明显的种属差异。  相似文献   

传染性法氏囊病病毒凋亡调节蛋白表达细胞株的建立     

叶菊秀  李玲燕  陈庆新  周继勇 《中国兽医学报》2008,28(3):247-252

构建传染性法氏囊病病毒非结构蛋白基因（NS）的重组表达质粒pEGFP-C2-NS,然后在LipofectamineTM 2000介导下转染Vero细胞,活细胞状态下直接观察EGFP-NS蛋白在细胞中的表达与定位。结果显示,转染后4~5 h出现荧光蛋白表达,24 h达到高峰,呈小点样环核膜与细胞膜附近沉积,经G418筛选2~3周后稳定表达的荧光蛋白主要分布于细胞膜上。G418抗性细胞,经RT-PCR和Western-blot验证NS mRNA及其蛋白表达,提示已建立能稳定表达EGFP-NS蛋白的细胞株,所表达蛋白具有NS和EGFP双重活性,为进一步研究NS蛋白凋亡调节机制打下了基础。  相似文献   

不同施氮量对超高产小麦灌浆期光合日变化的影响   总被引：4，自引：0，他引：4  

孙旭生  林琪  刘义国  张玉梅  李玲燕  翟延举 《华北农学报》2008,23(1):158-162

试验研究了不同施氮量对超高产小麦灌浆期光合日变化的影响。结果表明,超高产麦田光合特性日变化是由气孔因素和非气孔因素共同作用的结果,随施氮量增加,小麦的光合特性逐渐增强,光合"午休"现象有一定程度的减缓。但过多的施氮量(纯氮375 kg/hm2)虽然有较高的光合速率,但是降低了群体叶面积指数,千粒重下降,产量降低。由此表明,氮肥对超高产小麦光合日变化有较大的调节作用,但光合作用与产量并非均呈正相关关系。  相似文献   

水稻NAL11基因对苗期非生物逆境的响应分析     

王长龙  张力  罗立新  王慧  郭涛  刘永柱  周继勇  陈志强  肖武名 《华北农学报》2020,35(4):120-128

为了探究NAL11基因在水稻苗期对非生物逆境的响应机制及功能,对含NAL11基因的粳稻品种02428及其近等基因系NIL-8进行高温、低温、盐胁迫和模拟干旱胁迫处理,以正常处理的植株作为对照,观察植株表型、测定各处理下叶片的多种生理指标,并比较NAL11基因在不同逆境处理下的表达量情况。研究结果发现,高温、低温、盐胁迫处理导致02428与NIL-8均表现出一定程度的萎蔫、干枯症状,但两者差异并不明显;15%PEG-6000模拟干旱处理均导致二者叶片萎蔫、叶尖枯黄卷曲,但NIL-8植株的症状相对较轻,且与02428相比NIL-8的相对电导率降低、SPAD值增高;其次,与02428相比,NIL-8的SOD含量差异不显著;然而在低温和干旱胁迫下,NIL-8的CAT含量显著高于02428。表明NIL-8比02428具有更好的抗旱能力。实时定量PCR结果表明,高温、低温、盐害及模拟干旱胁迫下,NAL11表达量均迅速升高,随着处理时间的延长,其表达量表现出不同的动态变化。NAL11基因的表达受高温、低温、盐及模拟干旱胁迫的诱导,但表达模式各异;推测NAL11基因对水稻幼苗的抗旱能力起到一定的调节作用。  相似文献   

细胞质膜蛋白质组学技术研究进展     

高艳  吴永平  周继勇 《中国动物传染病学报》2013,21(1):75-80

质膜蛋白在细胞生命活动中执行着重要功能.高通量蛋白质组学技术结合生物信息学研究策略的迅速发展,为质膜蛋白的研究提供了新的手段和方法.本文从质膜蛋白的分离和富集、质膜蛋白复合物的分离、质膜蛋白的增溶及质膜蛋白质的生物信息学研究四方面对质膜蛋白质组学研究技术进行了综述.  相似文献   

抗鸭IL-2单克隆抗体的制备与鉴定   总被引：5，自引：0，他引：5       下载免费PDF全文

龚辉  吴建祥  王金勇  陈吉刚  周继勇 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2004,30(2):169-172

用纯化的重组鸭IL-2蛋白免疫BALB/c 小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,对杂交瘤细胞进行筛选,阳性孔经三次有限稀释法克隆,成功获得5株能稳定传代并分泌抗鸭IL-2单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞,分别命名为:1H4、2B3、4G12、5F6、5H6,其中一株对鸡IL-2具有交叉反应性.各单克隆抗体腹水间接ELISA效价在1∶32000～1∶512000之间,抗体类型除mAb 5H6为IgG2a亚类外,其余4株mAb均为IgG1亚类,5株mAb的轻链都为κ链.经Western-blot分析表明,所获得的5株抗鸭IL-2单克隆抗体与鸭IL-2具有反应性,推测它们是针对序列决定簇的.  相似文献   

山东省小麦—玉米周年滴灌水肥一体化栽培技术     

刘义国  师长海  万雪洁  姜雯  李玲燕  李松坚  韩伟 《农业科技通讯》2021,(10):224-225

滴灌水肥一体化技术作为现代高效农业的重要灌溉技术之一,已在生产上有较大面积应用。项目组在多年的试验和探索基础上,形成了冬小麦—夏玉米周年滴灌水肥一体化栽培技术,在滴灌管带铺设、接茬播种、水肥管理等方面进行了技术完善,对于山东省更大面积应用滴灌水肥一体化技术、实现节水高产具有一定的指导意义。  相似文献