早期剔除无精蛋光电测试装置的研制报告     

王吉恒  杨焕民  隋吉东  魏德庆  高玉贤  郭卫星 《黑龙江八一农垦大学学报》1995,(1)

利用自行设计的光电测试装置对孵化早期的６３２枚受精蛋的透光量进行了测定，结果表明该装置可以用来早期剔除无精蛋。  相似文献   

不同时间强度冷刺激对大鼠血清中炎症相关细胞因子的影响     

郭爽  郭景茹  汪志  臧琳  王建发  计红  郭丽  杨焕民 《中国兽医学报》2013,33(3):352-357,361

将170只SPF级Wistar大鼠随机分为常温对照组及冷刺激试验组,冷刺激试验组又分为急性应激组及慢性应激组.急性冷刺激时间为3、6、12、24 h,慢性冷刺激时间为3、6、9、12d.试验大鼠均于人工气候室中饲养,对照组及冷刺激试验组的饲养温度分别为(24±0.05)C和(4±0.05)C.经不同时间强度的冷刺激后,采用心脏采血,采集大鼠血液,并分离血清,利用Luminex xMAP技术检测大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10以及IP-10的含量.结果显示,冷刺激能够提高各试验组大鼠血清中IL-6的含量,急性应激组与对照组相比TNF-α、IP-10 、L2和IL-4的含量变化水平呈上调趋势,而慢性应激组TNF-α、IL-2和IL4的含量变化呈下调趋势,IFN-γ和IP-10的含量在冷刺激9、12d时显著增强(P＜0.05).研究结果表明,冷刺激能够引起大鼠炎症相关细胞因子以及辅助性T细胞亚群的分泌,随着应激时间的延长,细胞免疫(Th1)向体液免疫(Th2)漂移,从促炎症细胞因子(特点是IL-1和TNF-α的升高)向抗炎症细胞因子(特点是伴随IL-4和IL-10的增强)转化,机体产生细胞免疫并刺激机体产生体液免疫.  相似文献   

谷氨酰胺和L-肉碱对低温应激下AA肉仔鸡生产性能的影响     

王雷  纪丽丽  李俭  申凤华  刘丛  计红  杨焕民  李士泽 《黑龙江八一农垦大学学报》2013,25(1):54-57

研究旨在从生产性能方面研究谷氨酰胺和L-肉碱在促进动物生长,减缓低温应激的影响,为生产实践应用抗应激添加剂提供理论依据和有益参考。采用L16(45)正交试验设计,将480只1日龄AA肉仔鸡,随机分为16组,每组3个重复,每个重复10羽肉仔鸡。谷氨酰胺添加水平分别为0%、0.4%、0.6%、0.8%,L-肉碱添加水平分别为0、50、75、100 mg.kg-1。预饲一周,试验期2周。低温条件下,在AA肉仔鸡基础日粮中联合添加谷氨酰胺和L-肉碱,显著提高了冷暴露AA肉仔鸡生产性能(p<0.05);谷氨酰胺为0.8%,L-肉碱的添加量为75 mg.kg-1对低温环境下肉仔鸡的作用效果最好。  相似文献   

鱼组织线粒体基因组提取方法的改进     

赵春霞  盛勃  唐德江  李鹏  赵和生  杨焕民  刘胜军 《黑龙江八一农垦大学学报》2013,(2):30-31

基因组的提取是分子生物学研究的基础技术。提取的纯度及结构的完整性是进行基因工程各项研究所必需的条件。报道了一种改进的鱼组织线粒体基因组的提取方法,该方法操作简便,提取的线粒体基因组结构完整,并尽可能避免了核DNA、蛋白质、有机溶剂等的污染,而得率和纯度都可满足鱼组织线粒体基因组的研究要求。  相似文献   

表达α-烯醇化酶重组腺病毒的构建及其在籽鹅卵泡颗粒细胞中的过表达     

计红  王江璐  张伟宏  郭景茹  杨焕民  柳巨雄  李士泽  孔凡志 《中国预防兽医学报》2013,(1):31-35

为构建表达籽鹅α-烯醇化酶(ENO1)基因的重组腺病毒,本研究利用RT-PCR技术,从籽鹅卵巢组织中扩增ENO1基因,克隆至pShuttle-CMV穿梭载体中,并利用I-CeuI与I-SceI将ENO1基因的表达框切下,连接到腺病毒骨架的pAdxsi载体中。采用PacⅠ酶切,将其线性化,并转染至293(R)细胞进行病毒的包装,制备重组腺病毒。实验结果显示,制备的表达ENO1重组腺病毒的滴度达到1.1×1011pfu/mL。将重组腺病毒感染籽鹅卵泡颗粒细胞后,荧光定量RT-PCR与western blot检测显示细胞中ENO1基因和蛋白表达水平显著高于正常细胞(p<0.05),这些结果为研究ENO1生物学活性及功能奠定了基础。  相似文献   

急性冷暴露对仔猪PBMC中HSP70和血浆抗炎性细胞因子IL-4、IL-10的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

周瑞进  郭景茹  宿甲子  计红  王丹  邓效禹  陈萍  杨焕民 《中国兽医学报》2010,30(5)

为了探讨急性冷应激对仔猪免疫系统的影响,将18头45日龄"约克夏"仔猪随机分成常温对照组、冷暴露组和冷暴露并糖皮质激素受体阻断组.常温组在18～20℃下、冷暴露各组在4～8℃环境下分栏饲养.冷暴露时间持续12 h,在冷暴露开始后分6个时间点采血并分离血浆和外周血单个核细胞(PBMC),分别使用Western-blotting法测定淋巴细胞中HSP70的表达量;双抗体夹心ELISA法检测血浆中IL-4和IL-10水平.结果显示:冷暴露组IL-4和IL-10水平在冷暴露6、9 h时比开始前有显著升高(P<0.01),且IL-4与IL-10呈强相关(r=0.990 1);糖皮质激素受体阻断组IL-4水平在冷暴露1h时显著升高(P<0.01),IL-10在6 h时有显著升高(P<0.01),IL-4与IL-10呈强相关(r=0.873 1);冷暴露各组HSP70在冷暴露1、3、6、9、12 h时均显著升高(P<0.01),HSP70与IL-4/IL-10呈弱相关.本试验显示,急性冷暴露能使IL-4、IL-10和HSP70的表达增强,且阻断糖皮质激素对它们之间的相关性有一定影响.  相似文献   

猪圆环病毒2型ORF2-ORF1串联基因的原核表达及活性分析   总被引：3，自引：2，他引：1  

闻晓波  李冬野  李树东  冉旭华  李晓娟  邵磊  王密  朴范泽  杨焕民  侯喜林  倪宏波 《动物医学进展》2010,31(2):41-44

为探讨原核表达的PCV-2ORF2-ORF1串联蛋白的抗原性及其作为基因工程亚单位疫苗的可能性,以构建好的PCV-2大庆分离株质粒pMD-18T/PCV-2为模板,PCR分别扩增去掉核定位信号的Cap蛋白基因(dNLS-ORF2)和Rep蛋白基因(ORF1),将其串联克隆到原核表达载体pET30a(+)上,经PCR、酶切和测序鉴定,成功构建了重组质粒pET30a-ORF2/ORF1。转化E.coli BL21(DE3)pLysS感受态细胞,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE电泳与Western blot分析。纯化的重组蛋白与PCV-2阳性血清发生特异性反应,并能与免疫小鼠的抗血清发生特异性反应。重组蛋白具有较好的免疫学活性,为基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础。  相似文献   

冷刺激不同时间仔猪3种组织HSP70表达的Western blot检测分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

计红  吴永魁  李士泽  杨焕民 《黑龙江八一农垦大学学报》2010,22(2):44-47

采用50日龄的雄性"军牧一号"仔猪进行冷刺激试验,分别在冷刺激0、0.5、3、6、12、24h与应激恢复0.5、3、6、12、24、48h共12个时间点采取仔猪肝脏、脾脏和股二头肌样品。利用Western blot检测冷刺激(-7±2℃)不同时间仔猪肝脏、脾脏与股二头肌HSP70的表达量,探讨冷刺激对机体3种主要器官内HSP70表达量的影响。结果显示仔猪肝脏、脾脏和股二头肌中HSP70的表达量都以不同程度的升高,而后呈现先下降再升高的变化趋势。结果提示肝脏、脾脏和股二头肌3种组织尤以肝脏HSP70表达量变化明显,提示冷应激反应中代谢最旺盛的器官肝脏中物质代谢可能与HSP70的表达量有关。  相似文献   

运输应激对肉牛肝脏和脾脏中应激相关蛋白的影响     

袁建彬  薛琳琳  高春柳  连帅  徐彬  杨焕民  郭景茹 《中国兽医学报》2018,(10)

选取15头体况相似的健康肉牛作为研究对象,随机分为运输0h组、运输3h组和运输6h组,每组5头肉牛,采用公路运输方式运输(平均速度为80km/h)。采集各组牛肝脏和脾脏组织样本,用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量PCR(qRT-PCR)2种试验方法检测各组肝脏和脾脏组织中应激蛋白-热休克蛋白70(HSP70)和急性期蛋白-C反应蛋白(CRP)含量的变化。qRT-PCR检测结果显示:与运输0h组相比,运输3h和6h肝脏组织中HSP70mRNA的表达量极显著升高(P0.01);而脾脏组织中HSP70mRNA只在运输应激6h后表达量显著增加(P0.05)。与0h组相比,运输应激后肝脏组织中CRP mRNA的表达量极显著升高(P0.01),脾脏组织中CRP mRNA的表达量显著升高(P0.05)。ELISA检测结果显示:与0h组相比,运输应激3h和6h肝脏中的HSP70质量浓度极显著升高(P0.01),脾脏中HSP70的质量浓度在运输6h后显著升高(P0.05);肝脏和脾脏CRP的表达在运输应激6h后极显著升高(P0.01)。结果表明:不同运输时间的运输应激可导致肝脏和脾脏中HSP70和CRP的浓度和mRNA转录水平升高,且肝脏中HSP70和CRP的表达量高于脾脏。HSP70和CRP可作为肉牛运输应激候选诊断标志物。  相似文献   

猪胸膜肺炎放线杆菌毒力因子研究进展     

吴秀芬  李鹏  杨焕民 《现代畜牧兽医》2005,(6):47-48

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的一种重要呼吸道传染病。病理特征是纤维素性胸膜炎和出血性、坏死性脑炎。本病是国际上公认的危害现代养猪业的五大疾病之一，给各国养猪业造成了巨大的经济损失。近年来该病的发病率呈逐年增长的趋势。深入准确的掌握其毒力因子的致病机理是进一步确定诊断方法和研究新疫苗的关键。本文就其病原、毒素成分及致病机理的研究进展作以综述。  相似文献