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检测兔出血症病毒抗体间接ELISA方法的建立 总被引:3,自引:0,他引:3
为建立检测兔出血症病毒(RHDV)抗体的间接ELISA方法,应用杆状病毒表达系统表达的RHDV VP60包被酶标板,经间接ELISA的最佳反应条件优化试验确定:抗原的包被浓度为4.62μg/ml,标准阴、阳性血清稀释度为1∶200,封闭液选用2%明胶;羊抗兔IgG最佳稀释度为1∶4 000。阻断试验、特异性试验、敏感性试验、重复性试验结果显示,该方法具有较高的特异性、敏感性和重复性。用建立的ELISA方法与血凝抑制试验对临床血清样品进行检测,结果显示,ELISA与HI检测兔血清的RHDV抗体阳性率分别为84.7%(955/1 127)和76.0%(857/1 127),符合率为91.3%。该方法的建立为检测RHDV抗体提供了一种安全、特异、敏感、快速、操作简便经济的检测方法,为兔出血症免疫监测和预防控制提供了科学的技术手段。 相似文献
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兔出血症病毒RT-PCR检测方法的建立及应用 总被引:3,自引:0,他引:3
摘要:按照GenBank上公布的兔出血症病毒(RHDV)基因序列设计一对引物,以RHDV发病兔的新鲜肝为材料,提取总RNA,进行cDNA的合成和PCR扩增,结果能扩增出与预期的269bp大小一致的片段,该产物序列与公布的RHDV基因序列有95.8%~98.5%的同源性,表明已成功建立了RHDV RT-PCR检测方法。用该方法和血凝实验(HA)对兔出血症发病兔各组织脏器进行检测,结果表明,发病死亡兔各脏器中,HA检测阳性的病料为肝脏、肾脏、脾脏、血液、肺;RT-PCR检测除粪便外,其它均为阳性,其敏感性是HA的4×104倍。RT-PCR方法检测RHDV敏感度高、特异性强、重复性好,不仅可用于RHD临床诊断和流行病学调查,而且在兔肉等兔类产品的检疫方面具有很好的应用前景。 相似文献
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1993年夏季,南京地区某养鸡场的肉鸡群爆发传染性疫病,其特征是突然发生,迅速传播,肾脏肿大呈斑驳状的“花肾”,使该场养鸡生产蒙受较大的经济损失。经我们系统检查,确诊为肾变型传染性支气管炎,现报告如下:一、发法情况该鸡场有五栋鸡舍饲养AA由鸡,两年来用混合料饲养几十批次一直正常,经济效益可观。1993年6月8目一栋鸡会突然发病,两天后另四栋鸡舍陆续感染,发病日龄在20~31日纷之间,病后第5天达死亡高峰,流行过程11天左右,死亡率达10.40%。二、仅床症状在正常饲养的鸡群中突然发生,病鸡羽毛松乱无光泽,翅膀下垂,闭… 相似文献
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我国每年从国外进口原羊毛数十万吨,这些羊毛系从牧区直接收购,带有大量病原菌,其中有许多是人畜共患的病原菌,如炭疽杆菌、布氏杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌等。由于许多羊毛加工厂家不重视卫生防疫工作,给加工工人的身体健康造成了直接危害。接触外毛的工人身体出现奇痒、红斑的事时有发生。我们在对常州某毛纺厂实行监管的过程中,结合该厂实际,共同设计建立了“进口羊毛蒸汽消毒室”,并对其灭菌效果进行了观测,效果理想。羊毛蒸汽消毒室根据羊毛加工厂的规模而定,可大可小,一般60-80m’。四周密封不开窗,进出口处设两道门。地… 相似文献
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不同动物源新城疫病毒感染不同种属细胞的病变观察 总被引:1,自引:0,他引:1
用10株不同动物源的新城疫病毒F48E8,La Sota、La Sota-GFP、ZJ1、ZJ1-GFP、JS-4-05-Go、Gx-1-05-Ch,JS-1-07-Os、Js-1-07-Du、JS-1-07-Pi等毒株分剐感染鸡胚、鹅胚、鸭胚成纤维细胞、PK-15、Dulac、FK81、MDCK、Vero、Hela多种不同动物来源的传代细胞系,通过对病毒感染细胞后病变的观察、ZJ-GFP及La Sota-GFP两个病毒感染细胞后细胞中绿色荧光蛋白指示的病变,了解不同的毒株对不同细胞感染性的差别.结果表明,不同毒力、不同动物源的新城疫病毒致不同种属细胞病变的作用不同,产生病变的时间有差异,强毒F48E8等毒株感染细胞后48~72 h可以引起几种禽源成纤维细胞全部裂解,而哺乳动物来源的细胞在60~120 h细胞发生病变,且病变也不如禽源成纤维细胞严重,出现了细胞的圆缩.弱毒株在胰酶处理后感染细胞,72 h以后出现明显细胞病变,引起的哺乳动物细胞病变不明显.受试毒株的动物种属来源与细胞的致病性没有明显相关性. 相似文献