鸡柔嫩艾美耳球虫ZJ株TA4基因的克隆及原核表达     

高翔  杜爱芳  张娟敏  侯玉慧  庞林海 《中国预防兽医学报》2008,30(5):366-370

本试验对E．tenella ZJ株的TA4基因进行了克隆和表达。根据已报道的柔嫩艾美尔球虫TA4基因序列设计引物,以孢子化卵囊总RNA为模板,用RT—PCR的方法扩增得到一特异片段,将扩增产物克隆至pMD18-T,转化DH5-α感受态,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与参考序列比较,核苷酸同源性为99．1％。然后将重组质粒和表达载体pGEX-4T2分别以EcoR I、Xho I酶切后构建重组表达载体pGEX—TA4,并将其转化入大肠杆菌BL21中,提取质粒经酶切和PCR鉴定正确后,用IPTG诱导表达。表达产物经SDS—PAGE和Western blot检测显示,TA4基因在大肠杆菌中获得表达;融合蛋白的分子量约为43ku,以包涵体形式存在;诱导6h的蛋白表达量可达到35.9％,采用抗GST抗体进行Western blot,成功检测到了该特异性条带。  相似文献   

氟甲喹可溶性粉对鸡实验性大肠杆菌病的药效试验     

李孝军  杜爱芳  马有智  于德泰 《中国兽医杂志》2004,40(3):9-10

氟喹诺酮类药物(Fluoroguinolone)是指人工合成的有6-氟-4喹诺酮环基苯结构的新型杀菌性抗菌药。目前，国内外兽医临床常用的这类药物有诺氟沙星、环丙沙星、乙基环丙沙星及沙拉沙星等，具有抗菌谱广、杀菌力强、作用迅速和体内分布广泛等特点，它们对大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、金黄色葡  相似文献   

公英泻痢杀对仔猪腹泻的防治作用   总被引：7，自引：0，他引：7  

杜爱芳  胡松华 《中兽医学杂志》2001,(3):16-18

本研究进行了公英泻痢杀对仔猪腹泻的临床治疗试验及体外抑菌试验，临床试验结果表明：公英泻痢杀和痢菌净对哺乳仔猪腹泻的临床治愈率分别为100％和81．25％，经统计分析两者差异显著（P＜0．05）。公英泻痢杀和恩诺莎星对仔猪断奶腹泻的临床治愈率分别为97．33％和85．71％（P＜0．05）。体外抑菌试验结果为：公英泻痢杀对大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，链球菌的最低抑菌浓度分别为0.25g/ml,0.25m/ml,0.125m/ml，表明该中药制剂对细菌有一定的直接抑杀作用。  相似文献   

柔嫩艾美耳球虫ZJ株5401基因的克隆和序列分析     

杜爱芳  王素华  索勋 《畜牧兽医学报》2003,34(6):592-596

利用RT—PCR方法扩增出了柔嫩艾美耳球虫(E．tenella)ZJ(浙江)株的子孢子表面抗原5401基因。把这一基因片段克隆到PGEM—T克隆载体上，得到的阳性克隆经PCR鉴定及酶切分析，结果表明重组子(pGEM—T—5401)中含有5401基因，该序列全长为864bp，序列本身是一个开放阅读框，将克隆得到的基因与国外报道的5401基因比较，有两个碱基发生有义突变，引起两个氨基酸发生突变，核苷酸同源性为99．8％，氨基酸同源性为99．3％。克隆出的5401基因可以用于将来重组疫苗的研究。  相似文献   

肉兔豆状囊尾蚴病的危害性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

周永学  杜爱芳  张雪娟  吴永明  童凤英  吴广运 《浙江农业科学》2008,(3):372-373

选择60只肉兔随机分成2组，试验组人工感染豆状囊尾蚴，对照组不作任何处理。结果感染肉兔增重率比对照下降19．52个百分点，饲料利用率降低16．67个百分点，死亡率增加23．3个百分点，经济效益降低87．01％。  相似文献   

出口饲料蜂花粉检验检疫及监管     

徐国群  何永强  黄帅  杜爱芳 《中国蜂业》2013,(15):39-41

蜂花粉既有植物的繁殖细胞,又有蜜蜂腺体分泌物,经过复杂的生化过程转化而成。蜂花粉的化学组成极其复杂,含有10余类,200多种天然成分,主要包括蛋白质、氨基酸、多糖、维生素、激素以及黄酮类化合物等[1]。作为一种新型绿色饲料资源,蜂花粉可以为动物机体组织细胞的生长和修复提供丰富的原料,同时蜂花粉中的生物活性物质对动物机  相似文献   

捻转血矛线虫ZJ株24000分泌排泄(ES)蛋白基因的克隆和序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

杜爱芳  李孝军  王素华 《中国兽医学报》2004,24(6):553-555

通过 RT- PCR方法 ,从捻转血矛线虫成虫总 RNA中扩增得到特异性片段 ,并把这一基因片段克隆到 p U C18克隆载体上 ,进行测序及同源性比较。序列分析可知 ,其核苷酸序列与国外已发表的 2 4 0 0 0分泌排泄抗原基因的同源性为 99.2 %。表明本试验成功提取了捻转血矛线虫成虫总 RNA,并用 RT- PCR方法克隆了 2 4 0 0 0分泌排泄抗原基因 ,为该基因的表达及其免疫学作用研究奠定了基础  相似文献   

斑点金标渗滤法检测猪囊虫病   总被引：2，自引：0，他引：2  

WENG Yong-qiang  曹庭盛  YU Zhao-feng  杜爱芳 《畜牧与兽医》2008,40(8)

以亲和层析原理为基础,用猪囊虫纯化抗原作为检测用抗原,胶体金直接标记抗原,建立了斑点金标渗滤法诊断猪囊虫病的方法。其中囊虫抗原与胶体金溶液结合的最佳pH值为7.5,最佳浓度为52 mg/mL,检测时血清的最佳稀释度为1∶10。建立的斑点金标渗滤法检测猪囊虫病血清均为阳性,正常猪及其他病猪血清均显示为阴性,整个检测时间只需要5 min左右。试验结果显示,该方法操作简便、快速、特异性好,适用于猪囊虫病的临床诊断和流行病学调查。  相似文献   

合成鱼腥草素对单核—巨噬细胞吞噬功能的影响   总被引：10，自引：0，他引：10  

杜爱芳  胡松华 《中兽医医药杂志》1998,17(3):7-9

用碳廓清法测定了不同浓度合成鱼腥草素溶液对小鼠单核－巨噬细胞吞噬功能的影响。结果表明，３种不同浓度的合成鱼腥草素溶液均能提高小鼠单核－巨噬细胞的吞噬活性，其中浓度为０．１６ｍｇ／ｍｌ的合成鱼腥草素溶液与对照组相比，差异显著（Ｐ＜０．０５）。  相似文献   

鸡球虫疫苗及其佐剂研究进展          下载免费PDF全文

杜爱芳  周前进  张红丽  姜小磊 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2009,35(2):187-194

    疫苗是捻转血矛线虫病防治研究中的热点之一,已有多种疫苗候选抗原得到鉴定,多数抗原在线虫的肠道表达,其天然提取物能够提供有效的免疫保护,减卵率可达70%～95%.由于糖基化作用、空间构象的错误折叠等因素的影响,疫苗候选抗原的重组形式不能为动物提供有效的免疫保护;免疫策略难以制定、佐荆难以选择也成为疫苗研制中的桎梏.因此,开发与天然提取物具有相似功能的转基因蛋白成为目前疫苗研究中的焦点,秀丽隐杆线虫表达系统和寄生性线虫细胞系的培育是研究中比较有潜力的两个方向;同时,RNAi技术等新方法的运用也加快了新的疫苗候选抗原的鉴定进程.  相似文献