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旨在调查鸭致病性大肠杆菌氨基糖苷修饰酶耐药基因(AMEs基因)的携带情况,探讨耐药基因与氨基糖苷类抗生素耐药表型的相关性。对98株鸭致病性大肠杆菌采用了K-B法,选用氨基糖苷类抗生素链霉素、新霉素、庆大霉素、阿米卡星、大观霉素和卡那霉素进行药敏试验,用建立的检测氨基糖苷类AMEs主要基因的四重PCR方法对上述菌株进行分子检测,并随机选取耐药基因ant(3″)-Ⅰa、aac(3)-Ⅱa和aph(3′)-Ⅱa各3个阳性扩增进行克隆测序,对药敏试验结果和基因检测结果进行比较分析。结果表明,98株鸭致病性大肠杆菌有67株对上述氨基糖苷类药物中的一种或多种耐药,耐药率为68.4%(67/98);有49株扩增出AMEs基因,AMEs基因的检出率为50%(49/98),其中ant(3″)-Ⅰa的检出率为30.6%(30/98),aac(3)-Ⅱa为13.3%(13/98),aph(3′)-Ⅱa为3.1%(3/98),ant(3″)-Ⅰa+aac(3)-Ⅱa为2.0%(2/98)、aac(3)-Ⅱa+aph(3′)-Ⅱa为1.0%(1/98),未检出aac(6′)-Ⅰb基因;序列分析结果表明,扩增产物与GenBank中的相应序列有很高的同源性(99%);AMEs耐药基因与耐药表型的符合率为73.1%(49/67),符合率从高到低依次为大观霉素60%(3/5)、庆大霉素55%(11/20)、链霉素33.3%(22/66)、卡那霉素19%(4/21)、新霉素12.5%(1/8)、阿米卡星0%(0/3)。另外有4株细菌检测到相关耐药基因但耐药表型为敏感,而有22株耐药表型为耐药却未检测到相关耐药基因。鸭致病性大肠杆菌氨基糖苷类耐药基因以ant(3″)-Ⅰa和aac(3)-Ⅱa两种为主,耐药性与相关耐药基因的检出率基本呈正相关。 相似文献
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家兔GAPDH基因实时荧光定量RT-PCR方法的建立 总被引：4，自引：0，他引：4
根据GenBank登录的家兔GAPDH基因保守区域CDS序列设计1对引物,通过反应体系及反应条件优化,成功建立了检测家兔GAPDH基因的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法。结果表明,该方法检测GAPDH的最低拷贝数为32拷贝/μL,在较广的范围内(3.2×101~3.2×107拷贝/μL)有良好的线性关系(r=0.999);熔解曲线分析显示扩增产物的特异性单峰,其Tm为(87±0.2)℃;5个不同浓度标准品组内试验变异系数为1.67%~4.73%,组间试验变异系数为2.66%~8.74%。该方法具有快速、灵敏、高通量及可重复性强等优点,为GAPDH基因作为内参基因进行家兔功能基因与病原基因表达的定量分析提供了方法学基础。 相似文献
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灌肠技术（直肠灌投）是常用于动物通便的一种措施。在犬病诊疗中，作者摸索、扩大其应用范围，使灌肠技术广泛运用于各种原因引起的肠道疾患的诊断。治疗及补液、给药、降温（升温）等。合理运用这种技术对原发病能起到良好的治疗或辅助治疗作用。具体对症运用如下。1通便这是直肠灌投技术最常规的作用之一。常用于犬瘟热、发热性疾病、胃肠异物及其他一些疾病引起的便秘、梗阻、轻度肠套叠等。可用温热的0．1％高锰酸钾溶液、温水、石蜡油或淡肥皂水等灌技。方法是使用粗细适度的人用或兽用导尿管插入肠道一定深度，用注射器或洗耳球缓慢… 相似文献
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290例犬难产原因分析及其与品种的关系 总被引：2，自引：0，他引：2
本文对2003年5月至2005年底两年多内施行手法助产和手术助产的290例难产犬只的详细记录进行了回顾性分析,对发生难产的犬种、难产的原因及所占的比例进行了分析比较,报告如下。1材料与方法1.1犬只来源290例各品种犬只均来源于门诊病例。通过临床诊断、X线检查等手段对所有病例进行详细的检查,判断难产的原因,并建立病历记录。1.2方法1.2.1手法助产使用各种手法使难产母犬顺利娩出胎儿,必要时合理配合使用药物(缩宫素)助产。针对不同的难产原因采用不同的手法,如阴门狭窄下垂时可采用阴门上切术,然后拉出胎儿;对头颈侧弯、颅顶前置等胎位异… 相似文献
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为探究圈养东北虎血常规和血液生化指标的参考范围及其与年龄、性别的相关性,以雅安碧峰峡野生动物园圈养的15只健康东北虎为试验对象,化学保定后采集后肢静脉血液,进行血常规和血液生化指标检测,共检测血常规指标15项,血液生化指标30项。结果显示:成年组、亚成体雄性组及亚成体雌性组3组之间比较,红细胞数、红细胞压积、平均血小板体积3项血常规指标检测值呈现显著或极显著差异(P0.05或P0.01);白蛋白、总蛋白、球蛋白、谷氨酰转肽酶、无机磷5项血液生化指标检测值呈现显著或极显著差异(P0.05或P0.01);其余指标均无显著差异(P0.05)。 相似文献
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为研究鸭源大肠杆菌(E.coli)的致病性,明确鸭病原性E.coli与人和其他动物E.coli的亲缘关系及O血清型与菌种间遗传关系的相关性,本研究从我国西南地区规模化养鸭场患典型E.coli败血症的雏鸭体内分离37个血清型共82个E.coli分离株(其中优势血清型32株,其他血清型50株),以每株0.2 mL (109 cfu/mL)腿部肌肉接种7日龄健康鸭进行致病性试验;并对其中14个鸭源E.coli代表株进行16S rRNA基因克隆、测序及系统发育分析.结果表明:所有分离株全部为致病性E.coli,其中高致病株、中等致病株和低致病株分别占受试菌株的80.5％(66/82)、17.1％ (14/82)和2.4％(2/82),4个优势血清型全部为高致病株和中等致病株,分别占受试菌株的84.4％(27/32)和15.6％(5/32);14个代表株鸭源E.coli的16S rRNA形成2个主要分支,3株新发现的血清型单独形成一个较远的分支,11株常见血清型与人及其他动物源E.coli形成另一个大的分支,其中有6株与人的O157亲缘关系较近,2株与出血性E.coli O157:H7 sakai聚为一个小分支;从遗传进化的关系分析,这些菌株有可能是人类的潜在病原菌;同时还发现不同血清型的分离株可以聚为一支,而同一血清型的分离株可以处于不同的分支,常规的O血清学分型不能体现菌种间遗传关系的远近. 相似文献
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分别采用饱和硫酸铵法和辛酸—硫酸铵法纯化兔抗酸性红73(acid red 73,AR73)免疫球蛋白G(IgG)。通过二喹啉甲酸(BCA)法、十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)试验、间接ELISA法分别测定IgG的浓度、纯度及效价。结果显示,饱和硫酸铵法所提IgG浓度为36.44 mg/mL,最高效价达1.6×105;辛酸—硫酸铵法所提IgG浓度为15.79 mg/mL,最高效价达3.2×105。提示,辛酸—硫酸铵法IgG纯度优于饱和硫酸铵法。 相似文献