奶牛孕酮间接竞争ELISA检测方法的建立     

邵谱  杨正涛  张乃生  周虚 《安徽农业科学》2008,36(18)

[目的]为孕酮检测试剂盒的研制奠定基础。[方法]采用二环己基碳化二亚胺法制备检测抗原,建立了检测奶牛孕酮含量的间接竞争ELISA方法。[结果]检测奶牛孕酮的间接竞争ELISA的最佳反应条件确定为:最佳包被浓度为100 ng/ml,碳酸盐缓冲液的包被效果较好,以4℃过夜+37℃2 h佳,最佳封闭液为2%山羊血清,酶标抗体的工作浓度为0.13μg/ml。建立的标准曲线方程为y=-1.844 4x-0.140 1(R2=0.981 7),检测范围为0~20 ng/ml,最低检测限为0.58 ng/ml。该标准曲线的批内变异系数和批间变异系数分别为2.22%和2.37%。[结论]该研究建立了定量检测奶牛孕酮的间接竞争ELISA方法。  相似文献   

克伦特罗单克隆抗体的制备及其初步鉴定     

杨正涛  张乃生  史利军  李颖 《勤云标准版测试》2008,(5)

【研究目的】制备克伦特罗单克隆抗体（McAb）,为建立克伦特罗残留检测方法奠定基础。【方法】用偶氮化法将克伦特罗与钥孔血蓝蛋白（KLH）、牛血清白蛋白（BSA）及卵清白蛋白（OVA）偶联,制备完全抗原,免疫Balb/c小鼠,建立杂交瘤细胞株以制备单抗,并对单抗的特异性、交叉反应性及抗原识别位点等特性进行了初步鉴定。【结果】获得了1H5、1H7、1D6、2F10四株杂交瘤腹水效价均在1：105以上。对沙丁胺醇交叉反应性测定,最小的是1D6,只有2.32%的交叉反应性。单抗相对亲和力1D6〉1H5〉1H7〉2F10。抗原识别位点分析结果表明,这四株单抗至少识别两个不同的抗原位点。选用1D6初步建立了竞争ELISA检测方法,检测限可达1ng/ml,为进一步研制残留检测试剂盒奠定了基础。  相似文献   

水稻旱栽钵苗移栽适宜条件研究初报     

辛淑荣  杨正涛  荐世春  郑东峰  边文范  张昌爱 《山东农业科学》2018,(2)

对土壤含水率、钵苗埋深、钵苗高度对水稻旱栽秧苗成活率及其长势的影响进行了研究。结果表明:秧苗成活率及长势随着钵苗移栽时土壤含水率的增加而增加,但85%与100%的土壤含水率对钵苗成活率和长势的影响无显著差异;钵苗埋深2 cm时其成活率较高;在相同土壤含水率及埋深条件下,钵苗高15 cm时秧苗成活率及长势最好。因此最适水稻旱栽秧苗移栽条件为:土壤含水率85%、钵苗埋深2 cm、钵苗高度15 cm。  相似文献   

矗立在煤矿中的绿——记花园式单位刘桥一矿     

薛胜平  龙琳  杨正涛 《中国林业》1997,(5)

矗立在煤矿中的绿薛胜平龙琳杨正涛现代化矿井新形象皖北矿务局刘桥一矿坐落在安徽省濉溪县境内的皖北矿务局刘桥一矿，是安徽省煤炭系统的骨干企业之一。近年来，该矿在坚持以经济建设为中心的同时，把矿山绿化、美化工作摆上重要议事日程，以建成花园式矿井为基础，高标...  相似文献   

沙丁胺醇单克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

史利军  杨正涛  王艳  张乃生 《中国兽医杂志》2006,42(6):12-14

沙丁胺醇（Salbutamol，Sal）又名舒喘宁，化学名为4-羟基-5-羟甲基-α（叔丁胺）甲基苯乙醇胺，是人工合成的具有β2-受体激动剂样作用的肾上腺素能药物。此类药物常用于临床治疗如哮喘等呼吸系统疾病。试验证实沙丁胺醇对动物具有促进骨骼肌生长，减少脂肪蓄积等作用。因而国内外不少养殖场都非法使用本类药物。  相似文献   

犬瘟热症状鉴别诊治     

魏东  杨正涛  臧丽  冯晓群  张乃生 《中国畜牧兽医》2007,34(7):91-93

犬瘟热(canine distemper,CD),俗称犬瘟或麻疹,是由副粘病毒科犬瘟热病毒(canine distempervirus,CDV)引起的一种急性、高度接触性、致死性传染病。该病无特效疗法,死亡率高,治疗困难,是养犬的第一大敌。1临床症状犬瘟热的潜伏期随传染源的不同差异较大。来源于同种动物的潜伏期一般为3~6 d,来源于异种动物的潜伏期可长达30~90 d。50%~70%的犬经CDV感染呈亚临床症状,体温呈双相热型,病初高烧,体温升高至39.5~41.0℃,食欲不振,精神轻度沉郁,眼、鼻流出水样分泌物,打喷嚏,持续2~3 d后,进入无症状期,体温转归正常或低烧,精神食欲有所好转,…  相似文献   

猪弓形虫感染免疫胶体金试纸条的制备与初步应用     

寇金华  杨正涛  刘维建  高珺珊  李建华  杨举  张西臣  宫鹏涛 《中国兽医学报》2018,(1):82-87

制备1种检测猪弓形虫血清循环抗原的免疫胶体金试纸条。利用柠檬酸三钠还原法制备40nm的胶体金溶液,标记抗弓形虫表面抗原SAG3(surface antigen 3,SAG3)单克隆抗体(Anti-A-SAG3-7),用另1株抗弓形虫表面抗原SAG3单克隆抗体(Anti-A-SAG3-23)与羊抗小鼠IgG抗体分别包被于硝酸纤维素膜(NC膜)上的检测线和质控线,制备并优化免疫胶体金试纸条检测条件。胶体金溶液的最适pH值为加入4μL 0.2 mol/L K2CO3时的pH值。Anti-A-SAG3-7的最适标记量为12μg。最佳NC膜为Millipore 135。T、C线抗体最佳包被质量浓度均为0.25g/L,T、C线抗体最佳包被体积均为8μL。试纸条的灵敏度达1∶160,与猪囊虫阳性血清无交叉反应。稳定性试验表明,该试纸条置于室温至少可保存1个月有效,置于4℃可保存3个月有效。对广东某地区、吉林某地区猪场的各94份猪待检血清进行检测,分别有17,10份为阳性血清,样品阳性率为18.08%,10.63%。本研究制备的胶体金试纸条具有操作简单,敏感特异等优点,适合临床基层单位对猪弓形虫病的早期诊断及流行病学调查。  相似文献   

吉林地方特色肉牛发情周期内生殖激素变化规律研究     

李成娇  王宏娟  朱晓玲  李纯锦  杨正涛  张乃生  张嘉保  周虚 《安徽农业科学》2010,38(17):9018-9020

[目的]研究吉林地方特色肉牛发情周期体内生殖激素的变化规律,为提高国产特色肉牛繁殖效率提供理论依据。[方法]以吉林地区优质的草原红牛和延边黄牛,以及西门塔尔为试验对象,对发情周期内3个品种牛的血清与尿样中的孕酮、雌二醇,促卵泡素、促黄体素的变化进行测定和对比。[结果]发情第21天已孕与未孕肉牛的孕酮和雌二醇含量均存在极显著差异（P〈0.01）,促黄体素含量在发情当天与其他天相比有显著差异（P〈0.05）。[结论]通过检测肉牛发情早期血液中孕酮含量对发情鉴定及早期妊娠的诊断是切实可行的。  相似文献   

奶牛真胃炎病例报告     

刘文博  冯晓生  杨正涛  杨乃生 《北方牧业》2010,(17)

<正>真胃炎是指各种原因引起真胃黏膜及黏膜下层的炎症,是奶牛消化系统的常发病。真胃的炎症或溃疡往往导致真胃的运动和消化功能紊乱,如不及时治疗可能会继发真胃移位或真胃扭转造成严重后果。奶牛在产后,各胃的位置发生了很大的变化,消化功能受到明显影响,在精料过多等饲养管理不当因素的作用下很容易发生真胃炎。  相似文献   

克伦特罗单克隆抗体的制备及其初步鉴定     

杨正涛  张乃生  史利军  李颖 《中国农学通报》2008,24(5):73-78

【研究目的】制备克伦特罗单克隆抗体（McAb）,为建立克伦特罗残留检测方法奠定基础。【方法】用偶氮化法将克伦特罗与钥孔血蓝蛋白（KLH）、牛血清白蛋白（BSA）及卵清白蛋白（OVA）偶联,制备完全抗原,免疫Balb/c小鼠,建立杂交瘤细胞株以制备单抗,并对单抗的特异性、交叉反应性及抗原识别位点等特性进行了初步鉴定。【结果】获得了1H5、1H7、1D6、2F10四株杂交瘤腹水效价均在1：105以上。对沙丁胺醇交叉反应性测定,最小的是1D6,只有2.32%的交叉反应性。单抗相对亲和力1D6〉1H5〉1H7〉2F10。抗原识别位点分析结果表明,这四株单抗至少识别两个不同的抗原位点。选用1D6初步建立了竞争ELISA检测方法,检测限可达1ng/ml,为进一步研制残留检测试剂盒奠定了基础。  相似文献