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51.
抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体识别的抗原表位分析 总被引:1,自引:1,他引:1
用鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)及其重组表达蛋白VP2,VP3和单抗做各种ELISA试验,测定单抗识别的IBDV蛋白抗原及其多肽片段,并分析单抗识别IBDV抗原表位的空间关系。结果表明,抗IBDV单抗A,B,C,D,E,G与重组表达蛋白VP2呈阳性反应,而与表达蛋白VP3呈阴性反应,单抗C与表达蛋白VP2和VP3均呈阳性反应;单抗A,B,D,E,G识别IBDV VP2蛋白上相近或相似的抗原表位,均识别VP2蛋白多肽序列PJ1,PJ2,PJ5,PJ14,属于同一类群的构像性单克隆抗体。 相似文献
52.
53.
通过双酶切将伪狂犬病毒(Pseudorabies virus, PRV)Fa株gC囊膜糖蛋白基因片断亚克隆到5型腺病毒AdMax系统穿梭质粒pDC316中,得到pDC316-gC。用此质粒与腺病毒DNA辅助质粒pBHGloxΔE1,3Cre共转染293细胞,初步成功包装出重组腺病毒Adv-gC。进一步通过PCR鉴定和病毒空斑纯化,得到纯的高效价Adv-gC病毒液。间接免疫荧光实验证明此重组病毒能表达PRV gC蛋白。该病毒经肌肉免疫BALB/c小鼠,结果表明能诱导小鼠产生特异的体液和细胞免疫反应,即针对gC蛋白的总抗体IgG、针对PRV的中和抗体和足垫迟发型超敏反应DTH。攻毒实验表明,此重组病毒能提供100%的免疫保护,而对照组为0%。表达PRV gC基因复制缺陷型重组腺病毒的构建及其免疫效果的初步测试,为研制PRV新型活载体疫苗奠定了基础。 相似文献
54.
猪繁殖与呼吸综合征病毒感染抑制猪瘟疫苗的免疫应答 总被引:26,自引:3,他引:23
对20日龄SPF猪和20日龄猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)血清阳性猪,人工感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)北京分离株(BJ-4)后48h接种猪瘟疫苗,利用ELISA方法检测仔猪针对PRRSV和猪瘟疫苗的体液免疫,利用MTS法检测仔猪外周血单核细胞对有丝分裂原ConA的刺激反应。结果表明,不论是SPF仔猪还是带有PRRSV抗体的仔猪,在鼻内接种PRRSV后48h接种猪瘟疫苗,其对猪瘟疫苗的抗体反应显著低于对照组,对有丝分裂原ConA的刺激反应也下降。由此说明,PRRSV感染使仔猪对猪瘟疫苗的免疫应答受到抑制。 相似文献
55.
56.
当前畜牧养殖业低迷形势不是单一因素造成的,也不是一个单纯市场问题.禽流感很大程度上影响了我国家禽业的发展,造成了禽产品消费的下降,猪、鸡产业都是非常有发展前景的;目前我国禽产品的消费主要是国内消费,消费群体还是国内. 相似文献
57.
58.
用PCR方法检测猪圆环病毒Ⅱ型 总被引:28,自引:2,他引:26
建立了一种能特异性地扩增猪圆环病毒 型 (porcine circovirus type 2 ,PCV- 2 )核酸片段的 PCR方法 ,从疑似断奶猪多系统衰竭综合征 (PMWS)的感染病例的淋巴结和脾脏中扩增出了预期长度的 PCV- 2 DNA片段 ,用限制性内切酶 Eco R 酶切鉴定了 PCR产物的特异性。 PCR产物的核苷酸序列分析表明 ,与已报道的 PCV- 2 (Gen Bank Ac-cession num ber AF0 2 72 17)相关区域的核苷酸序列同源性均大于 96 %。首次证实了我国猪群中存在 PCV- 2感染的PMWS。 相似文献
59.
禽流感病毒多重荧光RT-PCR检测技术的建立与初步应用 总被引:1,自引:0,他引:1
国内外检测禽流感病毒最常用和经典的方法是鸡胚病毒分离,该方法是O IE推荐的方法,但是耗费时间长。为缩短检测时间,目前我们已成功建立了灵敏、特异的荧光RT-PCR检测方法,并已经应用于活禽、禽组织及环境中禽流感病毒的快速检测与H 5、H 7、H 9亚型的分型鉴定。鉴于我国2004年年初暴发H 5N 1亚型禽流感疫情,以及高致病力禽流感通常由H 5和H 7亚型引起,因此在平时疫情检测和实施扑灭措施时对这些病毒亚型进行快速检测和定型非常重要,在本研究中,为能进一步提高检测效率,节约成本,我们进一步研制开发的H 5/H 7和H 5/N 1多重荧光PCR… 相似文献
60.
PRRS病毒M蛋白在大肠埃希氏菌中的高效表达 总被引:1,自引:0,他引:1
将猪繁殖呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF6基因从pGEM-T-ORF6重组质粒中亚克隆到pET-5a原核表达载体上,成功构建重组表达质粒pET5-ORF6。将共转化大肠埃希氏菌BL21(DE3)感受态细胞,重组菌经IPTG诱导表达,其细胞裂解物经SDS-PAGE可检测到分子质量约为19ku的目的蛋白带,经薄层扫描分析,目的蛋白占菌体总蛋白的26.8%,采用重组菌裂解物作为包被抗原进行ELISA检测,结果表明表达的蛋白显示特异性。 相似文献