猪嗜淋巴疱疹病毒3型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用     

朱事康  佟铁铸  刘星  李春萍  陈燕忠  罗卓军  林志雄  刘中勇  周宇 《畜牧与兽医》2018,(2):67-71

依据GenBank公布的猪嗜淋巴疱疹病毒3型(porcine lymphotropic herpesviruses 3,PLHV-3)DNA序列,设计特异性引物,优化反应条件,建立荧光定量PCR方法,并对方法的灵敏度、特异性和重复性进行试验。得出方法的线性范围为:8.2×101~8.2×107,灵敏度可达82个拷贝,方法的特异性高,只能检测pMD18-T/PLHV3重组质粒,另外5种对照病原均未检出;方法的重复性好,对不同浓度的pMD18-T/PLHV3重组质粒分别扩增6次,结果重复性好。使用建立的方法检测100份临床样品,同时与普通PCR方法比较,显示荧光定量PCR检出率比普通PCR高,具有较高的灵敏度和准确性。结果表明:建立的荧光定量PCR可用于PLHV-3的临床快速诊断。  相似文献   

鸡马立克氏病Ⅰ型弱毒株的选育     

李树根  林志雄  李力施  罗琼  陈茹  吴时清  颜思通  童昆周  毕英佐  薛春宜  何洁 《中国兽医杂志》1999,25(2):5-7

本研究利用从国外引进的鸡马立克氏病Ⅰ型弱毒疫苗株，采取回归无特定病原（ＳＰＦ）雏鸡和在细胞培养物上交替接种的方法，连续传代５次后，进行免疫效力试验的结果表明，本研究选育的ＭＤＶ－Ｇ１毒株含１０，０００和２，０００独斑形成单位（ＰＦＵ）／只鸡剂量试验组对ＭＤ的保护率均达１００％；未经选育的进口ＭＤＩ型弱毒商品疫苗２，０００ＰＦＵ／只鸡剂量试验组，对ＭＤ的保护率为８６．７％；而常规使用的ＨＶＴ商品疫苗  相似文献   

水疱性口炎病毒RT-LAMP快速检测方法的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

罗琼  田纯见  林志雄  陈茹  朱道中  黄青云 《畜牧与兽医》2009,41(7)

根据逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)原理,针对水疱性口炎病毒(VSV)糖蛋白G基因序列中的6个区域设计内外各1对特异引物,建立扩增VSV糖蛋白(G)基因的RT-LAMP方法。扩增产物电泳呈特异的阶梯状条带分布,扩增产物加SYBR GREEN I染色呈特征性的黄绿色,肉眼可直接观察判定。同时,还建立了可以进行定量检测的实时RT-LAMP方法。特异性试验显示,本方法可快速检验鉴别VSV与口蹄疫病毒(FMDV)和猪水泡病病毒(SVDV)。敏感性试验显示,建立的实时RT-LAMP方法检测VSVRNA的最低检测量为0.01 PFU,比实时荧光RT-PCR显著提高。建立的LAMP方法可检测p-VSVNJ质粒DNA的最低量为6.36×10-3pg/μL(1.4×103copies/μL),比PCR也显著提高。综合表明,本研究建立RT-LAMP检测VSV的方法具有特异、敏感、快速、简便的特点,具有开发应用前景。  相似文献   

牛白血病病毒LUX^TM实时荧光聚合酶链式反应检测方法的建立     

刘志玲  陈茹  马静云  吴晓薇  曾碧健  林志雄 《中国预防兽医学报》2009,31(5)

采用LUXTM新型荧光PCR技术原理,设计并合成1对单标记LUXTM荧光引物.建立了LUXTM荧光PCR和RT-PCR方法,可快速检测牛白血病病毒(BLV)前病毒DNA和病毒RNA.结果显示所建立的LUXTM荧光PCR/RT-PCR体系可特异检测牛白血病病毒核酸,而对蓝舌病、牛病毒性腹泻-粘膜病、水泡性口炎、口蹄疫、牛流行热、牛传染性鼻气管炎等病毒核酸以及牛结核分支杆菌、大肠杆菌、健康动物组织核酸扩增均呈阴性反应.敏感性实验表明LUXTM荧光RT-PCR对RNA前病毒的检测敏感性达0.49 ng/μL,荧光PCR对pTblv-gp51重组质粒的检测敏感性可达0.138拷贝,比OIE规程的巢式PCR方法高104倍以上.采用该方法从血清学阳性临床牛血清中检出BLV阳性样品.  相似文献   

我国出口观赏鸟的球虫和线虫的调查与分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈永红  李国清  陈红玲  向飞宇  肖淑敏  周荣琼  郭远忠  林志雄 《中国兽医杂志》2004,40(8):11-12

鸟类可以感染和携带多种致病微生物和寄生虫。球虫和线虫是其感染和传播的主要寄生虫之一，对鸟类自身的生存和养禽业的发展构成一定的危害。危害鸟类的球虫以等孢属和艾美耳属较常见，其次是Dorisiella属。危害鸟类的线虫主要是蛔虫、旋锐形线虫、毛细线虫、胃线虫、鼻咽饰带线虫、  相似文献   

鸵鸟的检疫及国外情况     

林志雄  陈博文 《动植物检疫》1996,(2):36-38

  相似文献   

几种杀虫剂对桔小实蝇老熟幼虫的毒力测定   总被引：5，自引：0，他引：5  

曾杨  赵菊鹏  林志雄  潘建平  陈雪生  田世尧 《植物检疫》2002,16(3):148-149

在室内条件下采用浸渍法,分别测定了10种杀虫剂对桔小实蝇老熟幼虫的毒力,二元混剂的共毒系数。供试杀虫剂对桔小实蝇老熟幼虫的毒性大小依次为:乐斯本>害极灭>辛硫磷>米乐尔>功夫>敌敌畏>阿克泰>好年冬>歼灭乳油>敌百虫;敌百虫和辛硫磷（1:9）的共毒系数为266.74,辛硫磷和乐斯本（1:1）的共毒系数为330.48。  相似文献   

广东省猪PCV-2感染的病原学调查   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘燕玲  蒋智勇  黄忠  林志雄  宋长绪 《动物医学进展》2008,29(9)

2004年-2006年从广东省4个不同地区458个规模化猪场采集2128份病料,进行了PCV-2的抗原检测,结果表明,被检地区的猪群中普遍存在PCV-2感染,检测的458个规模化猪场中有372个猪场有PCV-2阳性猪,平均阳性率达到81．22%;2128份被检病料样品中有863份为阳性,平均阳性率达40．55％（863／2128）;不同地区不同时段猪场阳性率为63．64％～92．86％,病料样品的阳性率为24．00%～48．00％。  相似文献   

广州口岸进口海鱼的异尖线虫幼虫感染情况调查     

陈强  鱼海琼  林志雄  罗长保  林瑞庆  田纯见  宋慧群  朱兴全 《中国动物检疫》2007,24(11):34-34

本刊讯2007年9月20-22日,由我国外交部和亚洲开发银行资助,农业部国际合作与交流中心承办的中亚国家兽医人员禽流感防控技术培训班结束了在北京的首轮培训,移师青岛,在中国动物卫生与流行病学  相似文献   

尿样中莱克多巴胺残留ELISA检测试剂盒的比对实验     

陈茹  林祥梅  赵吟  林志雄  刘建  田纯见 《中国兽医杂志》2007,43(1):52-54

酶联免疫吸附技术（ELIsA）由于其快速、简便、适合同时处理大量样品的特点，被国内外普遍应用于进行口一兴奋剂等各种兽药残留的筛选检测。国内目前销售的菜克多巴胺残留ELISA试剂盒主要有4种，据悉新的试剂盒还将推出。但国内外尚缺乏对不同莱克多巴胺ELISA试剂盒的检测性能的权威评估。由于不同试剂盒的检测效果可能存在差异，检测试剂不统一，可能导致检测结果差异较大，将不利于政府残留监控计划的实施和企业维护自身权益。本研究拟通过比对检测试验，对不同莱克多巴胺ELISA试剂盒进行评估和比对，为制定合理的莱克多巴胺残留检测技术方案和准确评判检测结果提供科学依据。  相似文献