奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌FnBPA蛋白免疫研究     

马保臣  董玉兰  柴同杰 《中国兽医杂志》2018,(6)

为了研究奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌发病机制和治疗措施,对引起奶牛临床型和隐性乳腺炎的337株金黄色葡萄球菌进行FnBPA蛋白基因分子调查,并且表达和纯化了FnBPA蛋白,制作FnBPA蛋白疫苗进行动物免疫试验。结果表明,FnBPA蛋白基因携带率为51. 04%,临床型乳腺炎金黄色葡萄球菌FnBPA蛋白基因的携带率为68. 5%。选取分离菌株10A扩增出的FnBPA基因,进行原核表达,重组蛋白得到高效表达,获得高纯度的FnBPA蛋白,BCA法蛋白定量为2. 8 mg/mL,制作蛋白疫苗免疫3头试验奶牛,30～40 d后,ELISA检测血清抗体滴度达到高峰,最高抗体滴度达到7l og_2,该蛋白具有很好的抗原性。  相似文献   

猪舍环境气载需氧菌含量的季节性变化及其健康风险评估   总被引：2，自引：0，他引：2  

袁文  柴同杰  苗增民 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2010,38(5):51-55

【目的】深入了解封闭式猪舍环境中气载需氧菌含量的季节性变化及其空气动力学粒径分布特征,并评估其潜在的健康风险。【方法】2008-03-2009-02,以5%公绵羊血-琼脂培养基为采样介质,利用Andersen-6级生物空气采样器收集封闭式猪舍环境中的空气样品,然后通过培养计数,分析气载需氧菌含量的动态变化和粒径分布特点,并评估其危害。【结果】封闭式猪舍环境中的气载需氧菌含量在9.07×104~28.23×104CFU/m3,冬季最高,夏季最低。气载需氧菌主要分布在采样器的D级(32.5%),F级最少(3.6%)。【结论】封闭式猪舍环境中气载需氧菌含量高,而且季节性波动较大,每天约有4.0×105CFU和4.9×106CFU气载需氧菌可分别进入人和猪的小支气管或直接侵入肺泡,从而对人和猪的健康构成潜在威胁。  相似文献   

蛋鸡生产中的健康饲养与动物福利   总被引：1，自引：0，他引：1  

柴同杰  黄艳群 《中国家禽》2010,32(22)

现代家禽生产的集约化程度越来越高,家禽面临的福利问题也愈来愈严峻。高密度饲养、不当管理、环境恶化造成家禽行为异常和身体伤害,免疫抵抗力低下,甚至导致烈性传染病的暴发。这不仅影响了家禽自身的福利,也极大降低了经济效益。然而,欧盟等发达国家已经制定了相关动物福利法规。解决家禽的福利问题需要从饲养方式、日常管理、环境控制、疾病防治、运输和屠宰等方面进行综合治理。降低饲养密度,采用富集型鸡笼,有条件的放弃笼养采用自由放养等生产方式,将成为家禽业主流的生产模式。  相似文献   

猪附红细胞体抗原特性分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘海涛  刘建柱  成子强  张利  周栋  刘永夏  周川  柴同杰 《江西农业学报》2010,22(12)

从自然感染的猪血液中纯化猪附红细胞体,应用SDS-PAGE和免疫印迹试验对猪附红细胞体抗原蛋白组分进行了初步分析。通过SDS-PAGE分离得到13种蛋白质,其蛋白分子量范围为24~170 kD,分别是120、112、110、108、68.2、58、49.6、41.2、30、29、26.2、25和24.3 kD。应用免疫印迹试验筛选出了6种特异性蛋白质,分子量分别是108、98.2、68.2、41.2、35和31 kD。  相似文献   

产气荚膜梭菌ε毒素蛋白高效表达体系的构建及其免疫保护性的研究     

卢田粉  柴同杰  孙玲玉  李欣贤  郝海玉  吕长辉  杨延伟 《中国畜牧兽医》2012,39(9):59-62

ε毒素是由B和D型产气荚膜梭菌产生的,能够引起牛、羊肠毒血症,给畜牧业造成巨大的经济损失。本试验将ε毒素基因片段(972 bp)以正确的阅读框架定向连接到pET-28a(+)质粒上,然后将重组质粒导入受体菌株,成功构建重组菌株BL21(DE3)。SDS-PAGE和Western blotting检测结果表明,重组的菌株BL21(DE3)能以包涵体的形式高效表达ε毒素(占菌体总蛋白的32.83%)。在此基础上,用有效剂量0.2 mg包涵体粗提物免疫家兔,抗血清间接ELISA检测结果显示,在第4周抗体效价达到最高值为8.7log2。因此,在本研究中构建的重组菌株BL21(DE3)能高效表达ε毒素,而且该毒素具有较高的免疫保护性。  相似文献   

肉仔兔魏氏梭菌病的诊断与治疗     

李晓霞  柴同杰 《河南畜牧兽医(综合版)》2005,26(3):39-39

兔魏氏梭菌病又称兔魏氏梭菌性肠炎,是由A型魏氏梭菌所产外毒素引起的肠毒血症,是近几年家兔的多发病。一年四季均可发病,6～12周龄易感。以发病突然,急性腹泻,排黑色水样或带血的胶冻样、腥臭粪便,盲肠浆膜有出血斑和胃底黏膜出血、溃疡为主要特征。发病率和死亡率均较高,如不及时诊治,会造成大批死亡。2004年10月23日新泰市一个体养兔场300只肉仔兔发生该病,报告如下。1发病情况新泰市一个体养兔场突然发现几只肉仔兔(35日龄左右),急剧腹泻,畜主用抗生素肌肉注射,同时灌服庆大霉素,病情不但没有好转,反而患兔全部死亡。接下来几天又发现…  相似文献   

断奶幼兔腹泻肠致病性大肠杆菌LEE毒力岛的分子检测   总被引：8，自引：0，他引：8  

杨少华  柴同杰 《中国兽医杂志》2004,40(10):6-8

为了了解 L EE毒力岛在山东省兔场的流行情况 ,自 2 0 0 0年 2月到 2 0 0 3年 6月从潍坊、曲阜、恒台、烟台、莱芜、泰安等地兔场的断奶前后腹泻和健康兔肠内容物或粪便中分离的大肠埃希氏菌 ,用 PCR法检测 L EE毒力岛上的 eae A基因。结果发现 ,在 2 0～ 30日龄、30～ 5 5日龄、5 5～ 80日龄的腹泻幼兔中 ,携带 L EE毒力岛的大肠埃希氏菌检出率分别为 0 (0 / 5 )、72 .7%(2 4 / 33)、2 3.5 % (4 / 17) ,而在相同日龄的健康幼兔中检出率为 0 (0 / 2 4 )。从其他肠道致病菌的检出情况来看 ,沙门氏菌和魏氏梭菌检出率极低 ,沙门氏菌在腹泻兔为 9% ,健康兔为 4 .2 % ,魏氏梭菌在健康兔和腹泻兔均为 0。生化试验表明 eae A阳性的大肠杆菌为乳糖发酵试验弱阳性的菌株。结论 eae A阳性的肠致病性大肠杆菌 (EPEC)应是导致上述兔场断奶后幼兔发生腹泻症的主要细菌性病原 ;L EE毒力岛的检测能够作为兔肠致病性大肠杆菌 (REPEC)的诊断和流行分子病学调查的主要手段  相似文献   

魏氏梭菌α毒素核酸探针的制备和应用     

田颖  柴同杰  陈本龙 《家畜生态学报》2006,27(6):102-104

根据GeneBank上发表的A型魏氏梭菌α毒素基因序列，设计合成了一对特异性引物，通过PCR的方法，扩增出了大小为470bp的α毒素基因的部分片段。应用地高辛标记法来标记该片段，制备了α毒素基因探针，该探针只与魏氏梭菌DNA发生阳性反应，与其它多种细菌DNA不发生反应；该探针在1：1000的工作浓度下，能检出1-5pg／uL的魏氏梭菌基因组DNA。应用该探针对33株魏氏梭菌进行核酸杂交（Dot-Blotting）检测，结果表明该探针具有良好的特异性和灵敏性，可用于对魏氏梭菌的诊断检测以及流行病学调查。  相似文献   

人工感染鸡大肠杆菌病的研究   总被引：3，自引：1，他引：3  

蔡玉梅  尹逊河  柴同杰  于晓霞 《中国预防兽医学报》2006,28(3):356-358

用大肠杆菌O1、O2、O78的16h培养菌液，发雏鸡大肠杆菌病的发生，通过比较发病程度的不同，采取颈部皮下注射的方法，以不同的感染剂量，人工诱来寻求最佳的感染剂量（菌数）范围。结果表明：雏鸡颈部皮下注射大肠杆菌O1、O2、O78的混合菌液1．0～1．8亿发病程度适中，是人工发病的最佳感染量范围，感染量低于1．0亿或高于1．8亿时发病过轻或过重，对人工发病来说是失败的。  相似文献   

多重PCR检测奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和酵母菌方法的建立与应用   总被引：2，自引：0，他引：2  

马保臣  秦卓明  蔡玉梅  董玉兰  柴同杰 《畜牧兽医学报》2006,37(11):1202-1208

参照GenBank发表的序列，在金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和停乳链球菌16SrRNA与23SrRNA之间的区域设计了3对引物，参照念珠菌和隐球菌的18SrRNA的序列设计1对引物，建立了检测金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和酵母真菌4种乳腺炎主要致病菌的多重PCR方法。参照Skladny的方法制备模拟了细菌感染l临床标本。结果表明：本试验建立的多重PCR方法具有较好的特异性，多重PCR方法检测乳样中的金黄色葡萄球菌的细菌最小浓度为10^4CFU／mL，检测无乳链球菌、停乳链球菌和酵母真菌的细菌最小浓度分别为10^4CFU／mL、10^3CFU／mL和10^3CFU／mL。通过对采自临床型乳腺炎（46个）和隐性乳腺炎（167个）动物共计213个乳样分别用传统细菌学培养法和多重PCR方法进行检测，多重PCR对金黄色葡萄球菌和酵母真菌的检测具有更高的检出率（P〈0．01），但该方法对无乳链球菌和停乳链球菌的检出率与培养法差异不显著（P〉0．05）。  相似文献