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通过CRISPR/Cas系统来构建miR-17-92基因簇的双切载体,研究结果表明:在miR-17-92基因簇的序列上找到了2个PAM(TGG和GGG)位点,从而得到了2个原间隔序列,设计合成基因簇双链crRNA;合成该片段并将其插入到p X260载体,使得在同一个载体上虽然只有一个g-RNA,但能够同时切割两个不同的靶位点;将该载体转染NIH3T3细胞验证切割效率,PCR结果和测序结果显示,所构建的CRISPR系统可以对基因片段进行有效切割。 相似文献
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猪成纤维细胞冻存方法的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
试验以猪的成纤维细胞为研究对象，认为在-70℃情况下冻存至少7d不会影响其存活率(可达80％以上)，且生长形态正常。同时利用血清饥饿法使成纤维细胞周期同步化，在-70℃冻存2d、4d和7d，细胞存涪率可达92．3％、87．2％和83．6％，甚至在该务件下冻存15d，细胞也能恢复正常的生长。 相似文献