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检测伪狂犬病病毒双抗体夹心间接ELISA方法的建立与应用 总被引:10,自引:0,他引:10
以猪伪狂犬病病毒(PrV)Ea株特异性单克隆抗体576株为捕获抗体,纯化的抗PrV IgG为检测抗体,建立了检测PrV抗原的双抗体夹心ELISA方法。最佳反应条件为,单克隆抗体576株的包被浓度为12.2μg/mL,IgG的工作浓度为16.0μg/mL,对PrV的检测灵敏度达15.6ng(0.156μg/mL),与乙型脑炎病毒(JEV)、猪瘟病毒(HCV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)和猪流感病毒(SIV)等无交叉反应。批间和批内变异系数较小,分别为6.39%和4.1%。应用本方法对人工感染PrV的40日龄仔猪组织进行检测,肺和脑PrV抗原检出率最高,其次是脾、心、肝和肌肉。应用该方法和PrV对159份临床样本进行平行检测,发现二者的符合率可达到77.4%,比PCR敏感。实验结果表明:双抗体夹心间接ELISA方法具有敏感性高、特异性强和重复性好的特点,可广泛应用于动物组织中PrV的检测。 相似文献
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为了解近年来湖北省规模化蛋鸡场新城疫(Newcastle disease,ND)疫苗的免疫效果,从2013年6月到2015年12月在湖北省规模化蛋鸡场随机采集6 989份血清样本,用血凝抑制试验(hemagglutina-tion inhibition,HI)测定NDV抗体滴度,并对不同年份和月份样本的抗体滴度进行统计分析.结果显示,2013年样本的NDV平均抗体滴度最低,为9.2log2,2014年样本的平均抗体滴度最高,为10.0log2,2015年的为9.8log2.在2013年的7个月中,9月份样本的平均抗体滴度最低,为8.5log2,8月份样本的平均抗体滴度最高,为9.8log2;在2014年的样本中,1月份样本的平均抗体滴度最低,为8.3log2,5月份的最高,为12.3log2;2015年12月样本的抗体平均滴度最低,为8.9l0g2,11月的最高,为12.7 log2.从日龄来看,120日龄~300日龄的鸡只NDV平均抗体滴度较为稳定,而小于120日龄和大于300日龄鸡只的抗体滴度呈现较大幅度波动.总体上所有样本的NDV抗体平均滴度均大于9log2,说明湖北省NDV的免疫水平良好,对鸡群具有较好的保护能力. 相似文献
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抗伪狂犬病毒Ea株单克隆抗体的制备及鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
将伪狂犬病毒Ea株纯化后免疫雌性Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O的骨髓瘤细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行筛选,获得了2株抗PRV的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3G7E3和4A6F5,其细胞培养上清及小鼠腹水效价(ELISA)分别为1:212、1:212及1:100×212、1:100×212。特异性试验和免疫荧光结果显示,3G7E3和4A6F5仅与PRV反应,而与PPV、PRRSV、JEV和HCV等病毒不发生交叉反应;用单抗建立的夹心ELISA试验能检出伪狂犬病毒。表明本研究所获得的2株单抗是PRV特异性的。这2株分泌抗PRV单抗的杂交瘤细胞株的获得为进一步建立准确快速的抗原检测方法奠定了基础。 相似文献
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对分课堂(Presentation, Assimilation and Discussion,简称PDA)作为一种新兴的教学模式,分为讲授、内化吸收和讨论3个环节,其中1、3环节在课堂上完成,第2环节留给学生课后进行。Zuvio软件(中文名:出题优)是一种实时互动的课堂教学辅助APP软件。针对兽医内科学教学效果不佳的现状,从课程特点和学生学习习惯出发,将出题优软件有机地融入对分课堂教学模式,在课程结束前向全体学生(97名)发放问卷反馈实施效果,结果表明:参与调查的97名学生认为出题优软件对兽医内科学的对分课堂有应用价值,集中表现为能够增强学习兴趣、活跃课堂气氛以及激发课后主动学习的意愿,同时认为有必要在专业其他课程的教学中推广应用。 相似文献
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从蛋鸡养殖场采集疑似"心包积水-肝炎综合症"蛋鸡的肝脏,分离病毒,处理后接种于SPF鸡胚。应用PCR方法扩增Ⅰ群腺病毒hexon基因并进行序列分析;将分离的病毒感染30日龄健康雏鸡,观察感染后鸡群临床症状和病死鸡病理变化。结果显示:分离的3株禽腺病毒病毒基因同源性为100%;与Ⅰ群腺病毒血清4型同源性为99.8%;与Ⅱ群禽腺病毒和Ⅲ群禽腺病毒同源性为43.1%~78.6%;病毒感染雏鸡后,第3 d出现鸡只死亡,第5 d达到死亡高峰期,整个试验阶段鸡只死亡率达到60%,解剖、死亡鸡可见典型心包积液-包涵体肝炎症状,肾细胞中出现空泡和坏死。结果表明,本研究成功分离1株Ⅰ群腺病毒,命名为Ⅰ群腺病毒湖北株。 相似文献
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在新农科与乡村人才振兴的背景下,针对我国如何推进动物医学专业理论结合实践的高质量发展问题,以长江大学动物医学专业生产实习为例,探讨动物医学专业人才培养与生产实习之间的联系并提出实习优化对策。该调查报告选取长江大学动物科学学院2022年6—8月参加小动物临床生产实习的2019级动物医学专业共56名学生作为研究对象,对学生的专业技能学习情况、动手实践能力、行业认可度以及满意度进行调查及分析,结果表明:参与调查学生认为生产实习能够增强专业技能,有利于未来职业规划。 相似文献
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从集贸市场随机采集97头份猪肉样本、53头份羊肉样本、50头份牛肉样本,应用双抗体夹心ELISA和PCR方法,平行检测样本可能含有的伪狂犬病病毒。结果97头份猪肉样中,双抗体夹心ELISA方法检出伪狂犬病病毒19份(19.6%),PCR检出25份(25.6%);牛肉样本中ELISA阳性数为0,PCR阳性2份(4%);羊肉样本中两种方法均为阴性。这两种方法均为阳性和阴性的份数为12和170,总符合率为89.2%。结果说明猪伪狂犬病的控制对提高肉食品品质具有重要作用。 相似文献
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为了解江陵县家禽养殖场H7N9禽流感疫苗的免疫抗体水平,湖北省江陵县动物疫病预防控制中心于2021年11月在不同乡镇养殖场采集不同品种家禽血液,离心后分离血清样本,其中采集鸡血清和鸭血清分别为1 830份和1 080份,用血凝抑制试验检测采集样本H7N9禽流感免疫抗体滴度。结果显示,来源于江陵县不同乡镇的鸡和鸭血清样本H7N9禽流感抗体合格率均80%以上,其中规模化家禽养殖场H7N9抗体合格率高于散养户,鸡场H7N9抗体合格率高于鸭场。结果表明,江陵县对家禽H7N9禽流感病毒的免疫效果整体较好,强制免疫工作取得了预期的效果。 相似文献