荷斯坦牛耐热性RAPD和SCAR标记的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

苏光华  胡雄贵  燕海峰  肖兵南  张元跃 《畜牧兽医学报》2008,39(9)

以52头高产耐热组和41头高产不耐热组中国荷斯坦牛的DNA为材料,选用200条RAPD引物,利用RAPD-PCR技术,对荷斯坦牛的耐热性进行研究。结果发现,使用S441引物和S463引物在高产耐热组中分别发现了581 bp（RAPD-S441标记）和680 bp（RAPD-S463标记）2条特异性片段。通过测序和序列比较显示：581 bp的片段与KCNN2基因的同源性达90%;680 bp片段与NW_001024067.1｜BtUn_WGA9442_2的同源性达99%。根据已知KCNN2基因的功能,初步判断KCNN2基因为影响耐热性能的候选基因。得到GenBank登录号EF123743和EF123744。利用NCBI的ORF finder在581 bp中没有发现ORF,与预测其是KCNN2基因内含子3的结论相符合。在680 bp中发现4个开放阅读框（ORF）,分别为ORF1、ORF2、ORF3、ORF4。这4个阅读框分别编码48AA、34AA、45AA、34AA。根据RAPD-S441、RAPD-S463标记的测序结果,利用Premier 5.0软件设计对应的SCAR引物。成功将RAPD-S441标记转化为耐热SCAR标记。  相似文献   

湘西黄牛发情周期与妊娠早期孕酮变化规律研究          下载免费PDF全文

李雄  雷虹  龙云  李昊帮  李剑波  罗希  李晟  燕海峰  易康乐 《家畜生态学报》2015,36(5):55-58

采集湘西黄牛母牛的血液样品,通过酶联免疫吸附技术检测和比较其在发情周期和早期妊娠期的孕酮(P4)水平。结果表明,湘西黄牛的发情周期中,P4浓度变化非常明显,大致呈先上升再下降的趋势。发情前期、中期、后期和间情期P4浓度分别为8.85、0.72、1.40和9.13ng/mL,发情中期与后期P4浓度显著低于发情前期和间情期(P0.05);妊娠早期的母牛,从发情配种后,血液中P4浓度缓慢升高,其中妊娠后0~10d、11~20d、21~30d和31~36dP4浓度分别为3.36、8.91、12.69和16.12ng/mL,各阶段P4浓度差异显著(P0.05);发情后第21d、24d、27d和30d,妊娠母牛血液中的P4浓度显著高于未妊娠的母牛(P0.05)。试验表明,发情配种后20d,妊娠母牛与未妊娠母牛的血液中孕酮含量差异明显,可作为判断是否受孕的标记因子。  相似文献   

不同保存方法对牛卵母细胞总RNA和cDNA品质的影响     

易康乐  李纯锦  陈露  孙燕玲  燕海峰  刘莹莹  石德顺  周虚 《家畜生态学报》2011,32(3):18-21

实时荧光定量RT-PCR是检测低丰度mRNA的敏感方法,也是精确定量RNA拷贝数的有效方法,它的出现使得在少量细胞中定量基因的表达量,在小量基因组中分析基因突变和等位基因缺失成为可能.为了使这种检测技术更加稳定可靠,就必须在检测步骤的每一环节做到精确无误,而总mRNA的提取质量就显得十分重要.研究选择了牛MⅡ期的卵母细...  相似文献   

猪胚胎的体外生产技术     

邓缘  燕海峰  朱立军 《江西畜牧兽医杂志》2006,(2):4-5

应用体外受精技术,可以有效地利用屠宰的青年母猪卵巢中的未成熟卵,大量、廉价的实验室生产胚胎。这对加速我国良种猪群的繁殖是一项行之有效的胚胎工程技术。借鉴国内外实验室生产猪胚胎的经验及根据实验室的实践,文章较详细地叙述了体外受精猪胚胎的生产过程,包括卵母细胞的获得、培养、精子获能、体外受精以及受精后的体外培养、冷冻保存与移植等。  相似文献   

鸡BCs原代培养贴壁性影响因素分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

王坤  张佰忠  易康乐  蒋隽  王庆桥  李昊帮  燕海峰 《家畜生态学报》2015,36(2):61-66

试验从鸡第X期胚胎中分离囊胚,使用含10%FBS、青霉素和链霉素的高糖DMEM培养基,对鸡X期BCs进行无饲养层培养。分别在6h、12h、24h对细胞贴壁性进行评价,探究分离方法、离散程度、培养细胞密度、离心损伤对细胞培养的影响。结果表明:滤纸环法在分离胚胎上效果最好;细胞离散程度上,吹打20下效果最好,与吹打30下差异不显著(P0.05),二者与吹打40下差异均显著(P0.05);接种密度上,1×103个/mL和5×103个/mL两组差异不显著(P0.05),这两组与其它组,以及其它组之间差异均显著(P0.05),密度为1×105个/mL时效果最好,5×104个/mL次之,但密度为5×104个/mL时更方便观察;离心处理上,都离心5 min的条件下,5 590×g和1 398×g组差异不显著(P0.05),但其与224×g处理组差异显著(P0.05),其中5 590×g组效果最佳。因此,滤纸环法分离胚胎,吹打20下离散细胞,使用5 590×g离心5min,稀释成5×104个/mL的密度,接种到96孔板培养,可以获得较好的结果。  相似文献   

荷斯坦奶牛RAPD反应条件的优化     

胡雄贵  肖兵南  邓绪芳  燕海峰 《畜禽业》2006,(6)

以中国荷斯坦奶牛为实验材料,研究了Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、模板DNA浓度、TaqDNA聚合酶,以及退火温度对RAPD反应的影响,建立一套适合中国荷斯坦牛的最佳RAPD反应体系。反应总体积为20μL,Mg2+浓度为2.5mmol/L,TaqDNA聚合酶浓度为1U,引物浓度为2μmol/L,dNTPs浓度为400μmol/L,模板DNA浓度为100ng。PCR反应程序:94℃预变性2min→40循环(94℃变性1min→36℃退火1min→72℃延伸1min)→72℃延伸5min。  相似文献   

番薯代替部分玉米日粮对种公鸡繁殖性能的影响     

伍佰鑫  燕海峰  易康乐  张翠永 《山东家禽》2013,(12):10-12

畜禽饲料成本一般占生产总成本的75％-80％,能量饲料主要来源于玉米,使得玉米的价格居高不下。番薯的生产成本相对较低,如果降低番薯的含糖量（糖量高引起畜禽腹泻）,番薯可代替饲料中25％～50％的玉米,降低饲料成本。本研究通过使用不同处理方式的番薯替代25％的玉米,检测调整后日粮对种公鸡繁殖性能的影响,为降低种鸡饲料成本提供了依据。  相似文献   

鸡输卵管生物反应器研究进展     

喻晓亮  谢达平  燕海峰  胡雄贵  邓缘 《江西农业学报》2009,21(3)

鸡输卵管生物反应器是一种很有市场前景的生产药物蛋白的生物反应器。综述了激素对输卵管细胞和卵清蛋白基因的调控、输卵管组织特异性调控元件的研究、转基因鸡的制作途径、新型逆转录病毒载体在转基因鸡制作上的应用和国内研究现状、最新成果及发展前景等。  相似文献   

利用生物制药提升畜牧业     

燕海峰  肖兵南  郭湘霞  邓缘  P.Trefil 《猪业科学》2004,21(7):19-20,23

传统的畜牧业利润低,本文从畜牧业为生化制药提供原料、利用生物技术进行高附加值畜禽产品(如卵黄抗体)开发以及转基因畜禽生物反应器等三个方面讨论了利用生物制药提升畜牧业的思路。结合以上领域的研究进展,从生物制药的常规和高科技两个方面,对农业生物制药产业发展提出了建议。  相似文献   

火焰原子吸收法测定鸡蛋中锌含量     

燕海峰 《湖南畜牧兽医》1995,(5):8-8

近年来，随着医学事业的发展，人们对微量元素与人体健康的认识越来越深入，目前已掀起了一股中医药微量元素研究热潮，逐渐形成了中医药微量元素学这门边缘科学．锌是人体必须的微量元素之一，若缺锌会影响机体很多生理功能，导致多种疾病发生．因此，测定食物中锌含量水平有重要意义．本实验对长沙黄鸡鸡蛋中锌的含量作了初步测定，同时也为了有目的地增添某种微量元素的动物饲养试验提供了测试依据．1材料和方法1．1仪器和试剂GFU－202原子吸收分光光度计（北京分析仪器厂），锌空心阴极灯（北京有色金属总院），WM—2无油空气压缩机（…  相似文献