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<正> 近年来,随着商品经济的发展,在市场上经常出现以马肉顶替牛肉的事件,严重地损害了消费者的利益,并不断引起法律上的纠纷。为此,寻找出快速、准确、简便的鉴别方法已成为当务之急。我们采用免疫技术,特异性地鉴别出了牛肉和马肉,以及其它肉类。 相似文献
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鹅细小病毒VP1与VP3非重叠序列的克隆与原核表达 总被引：8，自引：2，他引：6
根据鹅细小病毒GPVH1株基因组核苷酸序列设计了一对引物，对其结构蛋白VP1与VP3非重叠核苷酸序列进行PCR扩增，并克隆到表达性载体pGEX-6p-1，经酶切鉴定筛选出阳性克隆，并转化到大肠杆菌BL21(ED3)plysS进行原核表达，并用SDS—PAGE鉴定，结果表明融合蛋白在表达性细菌BL21中重获得了高效表达。 相似文献
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牛IFN-α基因高效表达及纯化的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
基于对RNA二级结构的预测和密码子偏性计算,通过计算机辅助软件进行牛IFN-α基因优化,经人工合成优化后的基因与pWL表达载体连接后诱导表达,并对表达条件进行优化。SDS-PAGE分析表明,其产物分子量约为17ku,最优表达条件下蛋白表达量占菌体总蛋白的33％,表达产物以包涵体形式存在。经过包涵体溶解、初步复性后利用CM Sepharose Fast Flow离子交换层析柱作为蛋白质复性系统,采用梯度法进行牛α-干扰素包涵体蛋白质的纯化复性。结果表明,梯度离子交换层析法能有效地复性牛α-干扰素包涵体,复性后的重组牛α-干扰素的纯度达95％,通过离子交换层析柱纯化和复性后,重组牛α-干扰素在MDBK/VSV细胞系上的抗病毒活性为5．56×10^6 u／mg。 相似文献
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胶体金免疫层析技术及其在兽医诊断上的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
胶体金技术是继三大标记技术后对标记技术的又一重大贡献,1962年Feldherr CM等第1次介绍了胶体金可作为一种电子显微镜水平的示踪标记物。1971年FaulkWP和TaylorGM首次用胶体金标记技术研究沙门菌细胞抗原成分,将胶体金与抗原结合,应用于电镜水平的免疫细胞化学研究。30多年来,胶体金技术得到不断的发展和成熟,引进到免疫诊断领域,在人类医学、农牧业、环保及食品安全领域得到了广泛的应用。近年来,胶体金快速诊断技术被引入生物传感器中的应用研究逐渐增多,已有许多致力于信号放大免疫传感器的研制报道。文章综述了胶体金技术、胶体金免疫层析技术及其在兽医诊断上的应用。 相似文献
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本实验利用PCR方法扩增DEVC-KCE株gE基因片段(包含gI基因及其侧翼序列),扩增产物克隆入pGEM-T载体测序后亚克隆至pUC19 EcoRI、SalI位点间,获得pUC-gE。将增强型绿色荧光蛋白表达盒插入pUC-gE BamHI位点,构建转移载体pUC-gE-EGFP。该转移载体有7个单一酶切位点可供外源基因插入,上下游侧翼分别为1.57Kb和1Kb。将转移载体pUC-gE-EGFP转染鸭胚成纤维细胞(DEF),观察到绿色荧光,说明EGFP基因获得有效表达,为开发以鸭肠炎病毒为载体的多价、多联基因工程疫苗提供了物质基础。 相似文献