排序方式： 共有208条查询结果，搜索用时 15 毫秒
91.
92.
克隆牛α0干扰素(BoIFN-α0)成熟肽基因,使其在真核细胞中表达,并研究其表达蛋白质的活性。通过PCR方法扩增得到BoIFN-α0成熟肽基因,然后将其连接到含分泌信号肽序列的Pichia pastoris表达载体pPICZαA上,构建重组质粒pPICZαA-BoIFN-α0,重组质粒经PmeⅠ酶切线性化后电转化宿主菌GS115。转化子经100μg·mL-1 zeocinTM筛选和PCR鉴定,阳性重组菌经甲醇诱导后实现了BoIFN-α0在毕赤酵母系统中的分泌表达。结果表明:SDS-PAGE和Western blot结果显示表达产物相对分子质量约为18和21ku,推测表达产物发生了一定程度的糖基化。细胞病变抑制试验结果表明,重组BoIFN-α0具有较高的抗病毒活性,达到5.72×106 U·mg-1。这些研究结果为牛IFN-α的更深层次应用奠定了基础。 相似文献
93.
本研究根据GenBank公布的绿头鸭CD4(AF378701)基因序列设计引物,RT-PCR获得东北白鹅CD4基因。根据测序结果设计特异性引物,克隆得到东北白鹅CD4胞外区基因,并在pET-32a(+)/Rosetta(DE3)pLysS系统中进行原核表达。经IPTG诱导重组蛋白获得表达,Ni-NTA柱亲和层析获得纯化的重组蛋白,以纯化的重组蛋白为免疫原制备兔抗鹅CD4胞外区抗血清。I-ELISA、Western blot和流式细胞仪分析表明抗血清可特异识别重组蛋白以及分离获得的东北白鹅外周血T淋巴细胞,间接免疫荧光试验证实纯化的抗血清可特异性识别瞬时真核表达的鹅CD4胞外区蛋白。以上结果说明制备的抗血清可作为鹅CD4+T淋巴细胞的检测试剂。 相似文献
94.
95.
从PHA活化的东北白鹅外周血淋巴细胞中分离提取总RNA,利用反转录PCR技术扩增获得鹅IL-2(GoIL-2)基因,连接至克隆载体后进行测序鉴定,结果与预期大小一致.将去除信号肽的成熟基因亚克隆至原核表达载体,构建原核重组表达质粒并转化至大肠杆菌中进行诱导表达,用表达纯化的融合蛋白制备多克隆抗血清.此外,体外淋巴细胞增殖实验结果显示,鹅GoIL-2重组蛋白具有促进淋巴细胞增殖的活性,这为进一步研究GoIL-2的功能奠定了基础. 相似文献
96.
猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段克隆序列分析及原核表达 总被引：1，自引：0，他引：1
猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白可诱导中和抗体，是主要保护性抗原，N端抗原位点B和C在猪呼吸道冠状病毒(PRCV)中缺失。体外扩增TGEVS基因B、C抗原位点357bp片段(TS)。核苷酸序列与氨基酸同源性分析表明该片段较为保守。将TS克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中，转化大肠杆菌中。经IPTG诱导后，SDS—PAGE分析目的蛋白与谷胱苷肽硫转移酶(GST，大小约为26ku)融合后大小约为40ku，目的蛋白分子量约为13．2ku，优化表达条件后表达量达37．9％。 相似文献
97.
鹅卵黄IgG的纯化及兔抗鹅IgG酶标抗体的制备 总被引：4，自引：0，他引：4
采用三氯甲烷去脂、无水Na2S04盐析、DEAE23纤维素层析相结合的方法纯化鹅卵黄IgG,SDS-PAGE检测表明,所得鹅卵黄IgG纯度可达93%;用纯化的IgG免疫家兔,抗血清经双向琼脂扩散,证明兔抗鹅IgG抗血清效价约1:64,免疫电泳试验检测,证明得到了特异性抗血清,提取兔抗血清的IgG,用辣根过氧化物酶标记,制备了兔抗鹅IgG的酶标抗体,酶标抗体的效价为1:6400. 相似文献
98.
奶牛附红细胞体病三种检测方法的比较研究 总被引：1，自引：0，他引：1
对黑龙江省5个奶牛小区中的近444头奶牛分别运用悬滴法、直接涂片法、染色法进行了附红细胞体感染情况检测。结果表明,悬滴法和直接涂片法的感染率为68.2%￣78.6%,姬姆萨染色法为54.5%￣64.7%、吖啶橙染色法为31.8%￣50.8%,悬滴法和直接涂片法的阳性率较高,染色法的结果更接近于实际。建议临床诊断应尽量采用染色法,并结合流行病学、临床症状、治疗等情况进行综合判断。 相似文献
99.
鹅细小病毒免疫血清的制备及其应用 总被引：1，自引：0，他引：1
应用鹅细小病毒(GPV)弱毒疫苗及灭活疫苗免疫111只2月龄鹅群，制备了GPV免疫血清，第二次免疫后68 d采取血清，经检测ELISA抗体效价达1：8000以上，经保护试验后初步应用于鹅细小病毒感染的田间防治，收到了良好的疗效。 相似文献
100.