1型鸭甲型肝炎病毒3D基因的原核表达与多抗制备     

王安平  朱善元  吴双 《安徽农业大学学报》2015,42(4):536-539

根据血清1型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-1)SH株3D基因序列设计并合成1对特异性引物,通过RT-PCR方法扩增3D基因,将其克隆入原核表达载体p ET-32a,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG的诱导培养下重组蛋白获得了成功表达。SDS-PAGE显示重组蛋白的分子量约为68 k D,Western blot分析显示该重组蛋白能与多聚组氨酸标签单抗发生特异性反应。将切胶后纯化的目的蛋白免疫ICR小鼠,制备针对重组蛋白的多抗血清,Western blot结果显示制备的抗血清能够与DHAV-1感染的SPF鸡胚尿囊液总蛋白发生特异反应。以上结果表明,3D基因在大肠杆菌中获得了成功表达,且制备的多抗血清可以用于3D蛋白的检测,为3D蛋白的功能研究奠定了基础。  相似文献   

发挥供销社系统优势 当好农业产业化载体     

王安平 《农村．农业．农民》2001,(5):13-13

陕西省供销社根据全省主要农副产品分布情况，从解决农产品“卖难”入手，提出在各级供销社系统参与和推动农业产业化的思路，即关中各地围绕苹果、酥梨、猕猴桃、辣椒、大蒜、大棚菜等产品，兴办专业合作社；陕南各地围绕蚕茧、茶叶、食用菌、核桃等产品完善服务体系，发展龙头企业；陕北各地围绕牛、羊、红枣、小杂粮等产品搞好购销和服务体系建设。  相似文献   

营造阳台花园生态池体验自然美好生活     

王安平 《海鲜世界》2002,(2):36-37

虽然人们比较钟爱酒店的生猛海鲜,但其实水产品的家常菜也是相当美味可口的,积二十多年的烹调经验,本人对水产品的家常做法颇有心得,现列举其中几例,如有对厨艺有兴趣者,不妨家中一试.  相似文献   

渔业船舶液压操舵装置的检验     

王安平 《渔业现代化》2002,(2):41-43

《1 977年国际渔船安全公约》的《1 993年议定书》(简称公约 )对操舵装置提出 :“船舶应具备经主管机关认可的主操舵装置和辅助操舵装置。两者应按实际可行方案的布置 ,确保不致因其中之一有单个故障而使另一套无法操作。”《渔业船舶法定检验规则》(简称规则 )提出 :“每艘渔业船舶应设置 2套操舵装置 ,一套为主操舵装置 ,另一套为辅助操舵装置。主、辅操舵装置的结构及布置应保证切换迅速方便 ,且当其中之一损坏时 ,不致另一装置失效。”规则又提出 :“如果主操舵装置由 2套或以上相同的动力装置组成 ,当其中任一套损坏或不工作时 ,仍能满…  相似文献   

从全年检测数据分析辽南地区肉鸡疫病发生规律     

魏建平  栾音畅  于树江  王安平  王小宁  王芳  刘荧荧 《中国家禽》2006,28(22):44-46

2005年,疫病检测中心收到来自商品肉鸡的求诊病料共计330户,分别通过HI试验,ELISA试验和细菌分离鉴定试验,进行了ND、IB、IBD和大肠杆菌病的检测定性,本文对送检结果进行整理,从送检病料分布率、阳性分布率、四大疫病阳性率比较,不同季节对四大疫病发生的影响等因素进行分析,从中探讨辽南地区本年度肉鸡疫病发生的规律,为指导当地肉鸡疫病的防制提供科学依据。  相似文献   

从ELISA检测数据分析白羽肉鸡传染性支气管炎的临床发病特点     

魏建平  杨斌  王健  徐海峰  王恩勇  栾音畅  王安平  王小宁 《中国家禽》2007,29(12):26-27

近年来,传染性支气管炎(IB)在蛋鸡和肉鸡中呈地方流行趋势,其临床以肾肿为主要病理变化,同时伴有呼吸道症状,发病急,死亡快,严重病例3～5天内死亡率达5%以上,淘汰率20%左右。  相似文献   

养蜂业:还能甜蜜吗     

王安平 《农家参谋》2001,(9):14

  相似文献   

鸭甲型肝炎病毒-Ⅰ型3D基因在昆虫细胞中的表达及抗原检测     

吴植  夏文龙  朱善元  顾玲玲  王安平 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2018,(1)

通过高保真PCR方法扩增出鸭甲型肝炎病毒-Ⅰ型(DHAV-Ⅰ)RNA依赖的RNA聚合酶3 D基因,克隆至杆状病毒表达载体pFastBac1中,构建重组杆状病毒转移载体pFB-3D,将其转化感受态细胞DH10Bac,获得重组杆粒rBacmid-3D,转染昆虫细胞Sf9,收获重组杆状病毒rBac-3D,通过间接免疫荧光、Western blot对重组蛋白的表达水平进行检测。结果表明:间接免疫荧光数据显示表达的重组蛋白能与鸭抗全病毒阳性血清发生特异性结合,Western blot表达的重组蛋白分子量约为51ku,与理论值相符。这一研究说明3D蛋白在昆虫细胞中获得成功表达,为DHAV-Ⅰ型ELISA检测试剂盒的研制提供了技术基础。  相似文献   

鸽副黏病毒经鸡胚传代引起毒力和F基因序列变化的研究     

吴双  朱善元  郭长明  左伟勇  王永娟  秦枫  洪伟鸣  王安平 《河南农业大学学报》2018,(2)

为研究鸽副黏病毒ND167在SPF鸡胚传代中毒力和F基因序列变化,运用有限稀释法将ND167连续传代扩繁,每代次均选择病毒稀释度最高且血凝价最高的尿囊液进行传代,共传10代次,测定第1、5和10代次的最小致死量致死鸡胚的平均时间(MDT)、1日龄雏鸡脑内致病指数(ICPI)和F基因序列。结果表明,ND167在鸡胚传代过程中F蛋白裂解位点氨基酸虽未突变,但是毒力却在逐渐增强,从中等毒力株演变为强毒力株。说明对于PPMV毒力判定需要根据动物实验进行,需警惕PPMV在鸡群中反复传代引起毒力增强。  相似文献   

Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒VP1基因在昆虫细胞中的表达及鉴定     

顾玲玲  吴萌  朱善元  王安平 《河南农业科学》2018,(1)

为在昆虫细胞中表达Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-Ⅰ)的主要结构蛋白VP1,根据GenBank已发表的DHAV-ⅠSH株VP1基因序列,设计1对特异性引物,通过RT-PCR扩增VP1基因,将其克隆至杆状病毒转移载体pFastBac1,获得重组杆状病毒转移载体p FB-VP1,将其转化E.coli DH10Bac感受态细胞,经抗性、蓝白斑筛选及PCR鉴定后,构建重组穿梭质粒rBacmid-VP1。在脂质体介导下将重组质粒rBacmid-VP1转染昆虫细胞Sf 9,制备含有DHAV-ⅠVP1基因的重组杆状病毒rBac-VP1。Western blot结果显示,表达的重组蛋白VP1大小约27 ku,能与DHAV-ⅠVP1多克隆抗体发生特异性反应;间接免疫荧光检测结果显示,重组蛋白VP1能与DHAV-Ⅰ全病毒阳性血清发生特异性反应,细胞内出现较强的荧光。以上结果表明,在昆虫细胞中成功表达了具有免疫原性的DHAV-Ⅰ主要结构蛋白VP1。  相似文献