犬细小病毒酶标试剂盒的研制   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘宏伟  田克恭  渠川玫  时彦胜  王树勤  符兆英 《中国预防兽医学报》1994,(6)

用本研究室研制的犬细小病毒单克隆抗体和多克隆抗体．采用夹心ＥＬＩＳＡ原理，研制成功了犬细小病毒快速诊断试剂盒。对从临床病例中收集获得的４７份粪便样品分别用血凝试验和试剂盒进行了检测。两种方法的总符合率为９１．５％，对于明显阳性和阴性样品．两种方法符合率为１００％。试剂盒具有简便、快速、特异的优点。在３０分钟即可用肉眼判定结果。与ＣＤＶ、ＩＣＨＶ、ＦＰＶ、ＭＥＶ没有交叉反应。在４℃可保存６个月以上，室温可保存３个月以上。  相似文献   

用投饵法口腔免疫接种犬腺病毒疫苗     

Baer  GM 田克恭 《国外兽医学(畜禽传染病)》1990,10(4):62-63

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犬冠状病毒感染   总被引：3，自引：0，他引：3  

田克恭 《中国养犬杂志》1990,(1):20-22

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猪内源性反转录病毒5''非编码区启动子活性的分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

丁芳  吕茂民  马玉媛  吴健敏  田克恭  毕丁仁  章金刚 《中国农业科学》2007,40(2)

[目的]构建以缺失不同功能区的猪内源性反转录病毒(PERV)5'非编码区(5'UTR)为启动子的萤光素酶表达载体,分析5'UTR的转录调控规律.[方法]将含有不同功能域的PERV的UTR克隆至萤光素酶表达载体上,转染瞬时表达细胞Cos-7,检测萤光素酶的表达.[结果]缺失R区的5'UTR显示出很强的启动子活性,U3重复区序列缺失的5'UTR启动子活性显著下降.UTR显示出较之LTR强的启动子活性.缺失整个U3区的UTR比仅缺失U3重复区的UTR启动子活性强.[结论]在R区有转录因子的结合位点可引起转录活性下降;U3重复区序列表现出增强子的活性.在5'UTR的下游序列中,包括引物结合区(PBS)和前导序列(Leader)可能有某些转录因子的结合位点引起转录增强,同时在U3重复区的上游和下游序列可能存在某些转录因子的结合位点可减少5'UTR的转录活性.  相似文献   

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活苗(La Sota株+M41株+Re-9株)应用效果研究     

洪素梅  袁月  刘月月  田辉  程艺  张盼涛  王林果  薛景景  刘武杰  田克恭 《畜牧与兽医》2021,(2):88-91

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活苗(La Sota株+M41株+Re-9株)(三联苗(Re-9株))为国内首个采用基因重组H9亚型禽流感疫苗株研制的新支流三联灭活疫苗。为研究疫苗上市后的实际应用效果,使用7日龄AA肉鸡和260日龄产蛋期蛋鸡评价三联苗(Re-9株)有效性。结果显示:肉鸡免疫后14 d即可激发抗体,免疫后21 d,新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、H9亚型禽流感病毒(H9 AIV)的血凝抑制(HI)抗体分别达8.6log2、6.2log2、8.3log2,出栏时仍维持在较高水平;于免疫后14 d抽样进行NDV、H9 AIV攻毒,对照组均100%发病或排毒,免疫鸡均可获得100%保护;在蛋鸡上,免疫三联苗(Re-9株)后28 d,NDV、IBV、H9 AIV的HI抗体效价分别达12.0log2、7.8log2、12.2log2,免疫后6个月仍可以维持在较高水平。结果表明:三联苗(Re-9株)在实际应用中免疫效果较好,本研究将为鸡新城疫、传染性支气管炎、H9亚型禽流感的防控提供有力支撑。  相似文献   

我国生猪产业生物安全探讨     

黄柏成  陈珍珍  肖燕  遇秀玲  田克恭 《猪业科学》2021,38(12):28-30

我国生猪产业发展中,重大疫病的流行可造成产业巨大经济损失,包括2006年暴发的高致病性猪蓝耳病、2011年底开始的由猪伪狂犬病病毒变异株引起的猪伪狂犬病,特别是自2018年8月以来,由非洲猪瘟病毒感染引起的非洲猪瘟疫情使我国养猪业遭受重创。非洲猪瘟病毒传播途径多样,在环境中可长时间存活,难以清除,且目前无疫苗用于预防,因此,非洲猪瘟病毒将与其他疫病一起继续威胁我国生猪产业的发展。  相似文献   

表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒反应器工艺研究     

陈晓  李伟国  宋欢欢  苏晓蕊  王同燕  谭菲菲  田克恭 《中国动物传染病学报》2024,(2):49-57

为建立一套表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒反应器工艺,提高反应器上猪瘟病毒E2蛋白的表达量,以商业化培养基为基础,通过对关键营养组分添加量的DOE试验设计优化,获得一种组合补料配方,并在3 L反应器上对补料方式进行优化,以最大限度提高细胞密度。进一步在反应器上摸索了通气策略,以精确调控猪瘟E2重组杆状病毒培养过程的营养代谢平衡,解决副产物乳酸和氨过度积累导致细胞活力下降的问题。首次使用半连续补料工艺与渗透压动态平衡相结合的补料策略以及定向调节通气的工艺模式,使猪瘟病毒E2蛋白的表达量由130 mg/L增加至520 mg/L,提高了3倍。将3 L反应器工艺在100 L反应器上进行了连续3个批次的验证,结果猪瘟病毒E2蛋白的表达量均大于500 mg/L,收获猪瘟E2蛋白制备的疫苗抗体均在2周后转阳,且抗体水平持续上升,接种后8周抗体阻断率仍维持在80%左右。综上,3 L反应器工艺能够稳定放大至100 L反应器,建立了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组杆状病毒100 L反应器工艺,且100 L反应器上重组蛋白的表达量稳定、免疫原性良好。  相似文献   

猪流行性腹泻病毒单克隆抗体8A3的CHO细胞瞬时表达与稳转细胞池构建     

周丽璇  孙玉洁  张云静  谭菲菲  黄柏成  田克恭 《动物医学进展》2023,(5):1-6

为实现猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)单克隆抗体(monoclonal antibody, mAb)的体外高效表达，首先利用基因工程技术获得了PEDV鼠源mAb 8A3的轻链和重链序列，然后构建真核表达载体pCHO1.0-8A3-H-L,再利用CHO细胞对mAb 8A3进行瞬时表达，最后经稳定转染以获得稳定表达8A3的CHO细胞池。结果显示，CHO细胞表达的mAb 8A3在免疫印迹和间接免疫荧光分析中均可特异性识别PEDV,且具有正确的IgG抗体构型；且CHO细胞表达的mAb 8A3可以中和G2a、G2b和G1基因型PEDV。实现了PEDV mAb 8A3的CHO瞬时转染表达，并获得了稳定表达8A3的CHO细胞池，为PEDV mAb稳定表达细胞系的筛选奠定了基础，同时为PEDV的诊断和治疗提供了新型基因工程抗体材料。  相似文献   

犬腺病毒研究进展     

廖均乐  孙春艳  刘彩红  崔宁宁  刘玉秀  田克恭  张许科 《中国兽医杂志》2023,(2):90-92

<正>犬腺病毒(Canine adenovirus, CAV)分为2个血清型，犬腺病毒1型(Canine adenovirus 1,CAV-1)主要引起犬急性败血性肝炎，熊和狐狸脑炎；犬腺病毒2型(Canine adenovirus 2,CAV-2)主要引起犬科动物传染性喉气管炎和传染性腹泻等。CAV是目前已经发现的哺乳动物腺病毒属中致病性强、感染动物广的双股DNA病毒之一，该病毒在全世界范围内普遍存在，  相似文献   

猪伪狂犬病病毒gB、gC和gD蛋白的表达及诊断抗原筛选     

潘姣姣  王同燕  郭玲花  白小飞  汪志艳  孙杰  徐鑫  王玉宙  郝丽影  邓均华  谭菲菲  田克恭 《动物医学进展》2023,(4):12-19

为研发猪伪狂犬病的免疫学诊断试剂，利用杆状病毒表达系统表达了猪伪狂犬病病毒(PRV)gB、gC和gD蛋白，并对蛋白进行SDS-PAGE和Western blot鉴定；将纯化后的3种蛋白分别制备成不同蛋白类型的疫苗免疫健康仔猪，比较蛋白的免疫原性；将3种蛋白分别作为包被抗原建立间接ELISA方法，检测从不同地区收集的临床血清，与PRV中和试验检测结果进行了比较。结果显示，成功拯救出重组杆状病毒rPRV-gB-His株、rPRV-gC-His株和rPRV-gD-His株，经IFA鉴定，均可与猪伪狂犬病病毒阳性血清发生特异性反应；表达出的蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定，可见大小分别约为120 ku、65 ku和50 ku的蛋白条带；3种蛋白免疫原性比较结果显示gD蛋白疫苗免疫组猪血清中和效价最高(1∶22.4～1∶32.0);3种蛋白建立的间接ELISA方法检测30份临床血清，结果gD蛋白作为包被抗原建立的ELISA方法与PRV中和试验的符合率最高(100.0%)。表明gD蛋白是更好的诊断抗原，可用于PRV抗体检测试剂盒的开发。  相似文献