siRNA抑制牛子宫内膜上皮细胞Nrf2基因的表达研究     

胡修忠  程蕾  余婕  向敏  夏瑜  陶弼菲  周源  王定发  熊海谦 《中国畜牧兽医》2019,(6)

为探讨核因子E2相关因子(nuclear factor E2 related factor,Nrf2)基因沉默及激活后对牛子宫内膜上皮细胞的影响,本试验利用小分子干扰(siRNA)技术及Nrf2的激动剂叔丁基对苯二酚(tBHQ),分别从Nrf2基因的下调和上调表达来研究Nrf2对牛子宫内膜上皮细胞中血红素加氧酶-1(HO-1)和Homebox A10(HOXA10)基因表达的影响。结果显示,经实时荧光定量PCR方法检测,在设计的2条siRNA序列(siRNA-1209和siRNA-1672)中,siRNA-1672在终浓度为75 nmol/L、作用时间24 h时抑制效果较好,抑制效率在80%以上;经Western blotting方法检测,Nrf2蛋白表达水平在转染后96 h极显著下降(P0.01),而HO-1和HOXA10的mRNA表达量分别下降了60%和70%(P0.01),蛋白表达量在96 h后极显著或显著下降(P0.01;P0.05)。此外,经CCK8方法检测,Nrf2基因表达沉默后,牛子宫内膜上皮细胞增殖能力减弱。而在tBHQ激活Nrf2试验中,经Western blotting方法检测,tBHQ终浓度为30μmol/L时Nrf2蛋白表达量最高,极显著高于对照组(P0.01),且HO-1和HOXA10的蛋白表达量与对照组相比也明显上升。结果表明,本试验设计的siRNA-1672能特异性地抑制牛子宫内膜上皮细胞Nrf2的表达,而抑制Nrf2的表达会导致牛子宫内膜上皮细胞增殖能力下降,且Nrf2对牛子宫内膜上皮细胞HO-1和HOXA10基因表达存在调控作用。  相似文献   

油菜常见病虫害的防治     

程蕾 《农家科技》2007,(1):15-15

<正>1．油菜菌核病。①为害与发生特点。油菜菌核病又名油菜菌核软腐病,主要危害油菜的茎、叶、花和菜荚,以茎秆受害损失最大。油菜在开花结荚时,常常一株一株发病枯死,剥开下部茎秆,里面有许多像老鼠屎一样的菌核。苗期发病,先从幼苗的基部发生软腐,以后扩展到全苗,叶片变青灰色似烫伤状腐烂,常常引起成团枯死或整窝枯死;成株  相似文献   

浅析抗氧化理论及抗氧化剂在畜牧业中的应用     

刘晓华  钱运国  孙仁利  夏瑜  王定发  程蕾  吴建英 《饲料博览》2008,(11):29-32

文章对氧化应激的生成、氧化应激对动物机体的损伤和调节作用、营养和氧化应激的关系以及机体对氧化应激的应对措施等方面进行了综述，旨在阐述抗氧化剂在畜牧业中应用的理论依据。  相似文献   

一起饲喂枯草芽孢杆菌产品引起鲜奶不能发酵的原因分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘晓华  王肆玖  程蕾  夏瑜  杜小华 《中国奶牛》2009,(12):43-45

本文就武汉某奶牛场荷斯坦成母牛饲喂台湾产枯草芽孢杆菌产品72h后,鲜牛奶接种乳酸杆菌不能凝聚的现象,进行了原因分析.结果表明,可能是枯草芽孢杆菌及其代谢产物进入瘤胃后干扰了奶牛瘤胃微生物区系,或者某些未知次代谢产物通过血奶屏障进入牛奶,从而影响了乳酸杆菌在牛奶中的增殖速度.  相似文献   

肺炎支原体P1蛋白羧基端基因片段的克隆及原核表达     

王云龙  刘小聪  李玉林  王国强  孙新城  董彩文  程蕾  王继创  邓黎黎  李恒思 《动物医学进展》2012,33(6):45-48

根据GenBank公布的肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)P1蛋白羧基端序列(AF290001.1),设计合成2对特异性引物,采取套式PCR方法,以肺炎支原体培养物中提取的DNA为模板,扩增肺炎支原体P1蛋白羧基端基因序列,将其克隆至pET32a表达载体,构建重组质粒pET32a/P1(3 802～4 695),转化大肠埃希菌BL21-gold,测序验证后IPTG诱导表达,经SDS-PAGE表明重组蛋白表观分子质量与预期一致,可溶性表达产物经Western blot证实重组蛋白具有免疫反应性。  相似文献   

致病性结核杆菌特异性IgG抗体ELISA检测方法的初步建立     

王云龙  周贺娟  李玉林  孙新城  董彩文  王国强  刘旺根  王继创  李恒思  程蕾  白晓静 《动物医学进展》2012,(8):27-30

为建立鉴别致病性结核杆菌感染和卡介苗接种产生的IgG抗体,分别用结核杆菌的混合抗原TB1、TB2和PPD包被,以结核病患者血清为阳性对照,以PPD试验阴性健康人血清作为阴性对照,建立了TB1-ELISA、TB2-ELISA、PPD-ELISA三种检测结核杆菌抗体的方法。20份阳性标本检测结果显示,TB1-ELISA、TB2-ELISA、PPD-ELISA的阳性检出率分别为45%、50%、95%,100份健康人血清标本检测结果显示,TB1-ELISA、TB2-ELISA、PPD-ELISA的符合率为93%、90%、68%。研究工作为研发致病性结核杆菌感染IgG抗体检测试剂奠定了一定基础。  相似文献   

雨雪冰冻灾害天气对武汉地区肉鸭的影响及应对措施     

程蕾  刘晓华  王定发  凌明湖 《湖北畜牧兽医》2009,(2):13-14

1前言2008年1月10日至2月2日，我国出现了自1954年底至1955年初的冬季以来最严重的低温、雨雪、冰冻灾害。大部分地区连续雨雪日数达18-22d，为有气象记录以来最长；连续低温日数达11～22d，为1954年以来最长；平均气温比常年同期平均低4～6℃，为历史同期最低。  相似文献   

大棚豇豆煤霉病的发生与防治技术     

程蕾  程施 《植物医生》2005,18(1):15-15

近年来,随着人民生活水平的提高,新鲜的大棚蔬菜备受青睐.每年镇宁县春豇豆棚室栽培及露地栽培面积在36hm2,其中大棚种植面积3.3 hm2.由于大棚内的生态环境与栽培模式不同于露地栽培,大棚春豇豆煤霉病的发生较露地栽培发生更为严重.  相似文献   

胎次对奶牛产奶性状的影响及性状间相关性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈洪波  程蕾  付荣谱  王定发  刘晓华  凌明湖  胡修忠 《中国奶牛》2014,(14):15-17

为了探讨胎次对奶牛产奶性状的影响,对武汉市某规模化奶牛场连续3年的DHI数据进行了整理和统计,研究了胎次对奶牛总奶量、乳成分、体细胞评分、泌乳天数和高峰奶的影响,并分析了各指标之间的相关性。结果表明:胎次对总奶量、乳蛋白率、体细胞评分、泌乳天数和高峰奶具有显著影响(P<0.05)。其中,第2胎时奶牛总奶量和泌乳天数达到峰值;之后随着胎次的增加,体细胞评分不断上升,而总奶量、高峰奶和泌乳天数总体上呈下降趋势。相关性分析结果表明体细胞评分与高峰奶和总奶量呈极显著负相关(P<0.01),与乳蛋白率和泌乳天数呈极显著正相关(P<0.01),与乳脂率无显著相关(P>0.05)。  相似文献   

精氨酸对干扰素-tau处理牛子宫内膜上皮细胞基因表达的影响     

余婕  胡修忠  向敏  王定发  陶弼菲  夏瑜  陶虎  熊琪  程蕾 《中国畜牧兽医》2021,48(7):2495-2503

试验旨在研究精氨酸（Arg）对干扰素-tau（interferon-tau,IFNT）处理的牛子宫内膜上皮细胞的调控作用及其可能的机制。将牛子宫内膜上皮细胞接种至6孔细胞培养板中,当达到70%~80%融合度时,向细胞培养基中加入不同浓度的IFNT（0、100 ng/mL）,12 h后收集细胞检测未折叠蛋白反应（unfolded protein response,UPR）通路相关基因的表达情况;用不同浓度（0、0.05、0.1、0.2、0.5、1、2 mmol/L）Arg处理牛子宫内膜上皮细胞,24 h后用CCK8法检测其对增殖率的影响,筛选出Arg的最佳作用浓度;将子宫内膜上皮细胞随机分为Arg饥饿组、Arg饥饿+IFNT处理组、Arg添加+IFNT处理组,在Arg饥饿或添加处理6 h后加入100 ng/mL IFNT,IFNT处理12 h后检测UPR通路（BiP、PERK、CHOP、ATF6）、凋亡（BAX、Caspase9）和容受性（HOXA10）相关基因表达情况。结果显示,IFNT刺激可诱导牛子宫内膜上皮细胞UPR通路相关基因BiP、PERK、CHOP、ATF6的表达显著上调;0.5 mmol/L Arg可显著提高牛子宫内膜上皮细胞的增殖率（P<0.05）;Arg缺失可显著上调IFNT诱导下牛子宫内膜上皮细胞中BiP、PERK、CHOP、ATF6和BAX基因mRNA的表达（P<0.05）,并显著下调HOXA10基因mRNA的表达（P<0.05）,但对Caspase9基因mRNA表达无显著影响（P>0.05）。结果表明,Arg缺失可导致牛子宫内膜上皮细胞发生内质网应激,并影响子宫内膜宫受性的建立,可为进一步揭示Arg对牛子宫内膜的调控机制及制定减少妊娠早期胚胎丢失的营养调控策略提供参考。  相似文献