检测牛轮状病毒抗体间接ELISA方法的建立   总被引：3，自引：0，他引：3  

曹竹婷  杨少华  杨宏军  高运东  王长法  简子健  仲跻峰 《中国预防兽医学报》2009,31(3)

利用CsCI密度梯度离心化的牛轮状病毒作为包被抗原,建立了检测牛轮状病毒抗体的间接酶联免疫吸附试验(EuSA).用牛病毒性腹泻病毒、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌制备的对照包被抗原与牛轮状病毒阴性和阳性血清反应,其结果均无交叉反应,说明该方法具有良好的特异性,可用于牛轮状病毒抗体的检测.  相似文献   

新疆牛源金黄色葡萄球菌抗菌素敏感性调查   总被引：2，自引：0，他引：2  

高攀  王登峰  李建军  王治才  简子健 《新疆农业科学》2012,(11):2134-2139

[目的]了解新疆奶牛乳房炎中金黄色葡萄球菌的药物敏感性情况,为该病治疗的临床用药提供参考。[方法]2009年以来对乌鲁木齐市、昌吉、呼图壁、奎屯、伊犁和库尔勒6地区16个奶牛养殖场乳房炎奶样分离金黄色葡萄球菌,用纸片扩散法进行抗菌素敏感性检测。[结果]共分离143株金黄色葡萄球菌,临床药敏试验显示,新疆70%以上分离株对红霉素、青霉素、复方新诺明、多西环素、四环素耐药,40%的菌株对氯霉素、环丙沙星和庆大霉素耐药;并且67.1%菌株同时对5种以上抗菌素耐药,10.5%的菌株对所测试的10种抗菌素耐药。此外,发现了19.6%的牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。[结论]新疆奶牛乳房炎病例中的金黄色葡萄球菌对当前临床上允许使用的多种类型的抗菌素呈现严重的多重耐药,使用抗菌素进行奶牛乳房炎的防治难以取得理想的疗效。这类菌株的存在和蔓延将对新疆奶牛养殖业的健康发展和奶制品的安全构成威胁,建议在选择奶牛乳房炎治疗的抗生素时,应以流行菌株的耐药性为依据。  相似文献   

甲壳素、油乳剂和蜂胶对鸡新城疫疫苗免疫调节作用的研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

张莉  尹燕博  崔尚金  简子健  邓普辉  刘尚高 《中国预防兽医学报》2004,26(2):136-138

本实验以肉用AA雏鸡和蛋用罗曼雏鸡为实验动物,从细胞免疫和体液免疫首次研究了甲壳素对鸡新城疫疫苗的免疫调节作用,并与油乳剂和蜂胶佐剂加以比较,以观察不同免疫佐剂对鸡新城疫的免疫调节作用.试验结果表明,三种佐剂的疫苗在肉鸡组免疫后5～10 d,蛋鸡组免疫后5～15 d,甲壳素疫苗组HI抗体效价显著高于其它组;在肉鸡组免疫后15～37 d,蛋鸡组免疫后22～50 d,油乳剂疫苗组HI抗体效价显著高于其它组.用三种不同佐剂的疫苗免疫后,肉鸡和蛋鸡甲壳素疫苗组的细胞免疫水平显著高于其它组.  相似文献   

牛巴贝斯虫GST-MSA-2c融合蛋白抗象间接ELISA检测方法的初步建立     

沈炯玉  马素贞  简子健  吕伟 《新疆农业大学学报》2009,32(2):58-62

以纯化的牛巴贝斯虫GST-MSA-2c融合蛋白作为检测抗原,通过优化ELISA反应条件,初步建立了检测牛巴贝斯虫血清特异性抗体的间接ELISA方法。方阵试验确定的GST-MSA-2C抗原的最适包被浓度为2.5μg／mL,血清最佳稀释倍数为20倍,ELISA阳性反应的临界值为OD450≥0.347,批内和批间重复试验的变异系数均小于10％。经对多例血清检测表明,所建ELSIA检测法重复性好、特异性强、灵敏度高。  相似文献   

狂犬病病毒SRV9株N、P、G和L蛋白基因的克隆及表达载体构建   总被引：2，自引：0，他引：2  

魏玉荣  易忠  符子华  马素贞  王晓萍  简子健  魏婕  王海烽  朱晶晶 《新疆农业科学》2009,46(2):354

以狂犬病病毒RNA为模板,采用RT-PCR方法克隆获取N、P、G及L蛋白编码基因核苷酸序列,应用定向克隆技术,构建真核表达载体 pcDNA3.1-N、pcDNA3.1-P、pcDNA3.1-G及pcDNA3.1-L.经测序鉴定证实获取的N、P、G及L蛋白区全长核苷酸序列与文献报道的一致,并成功构建了其真核表达载体.  相似文献   

牛环形泰勒虫新疆株Tams1基因真核表达载体的构建及免疫反应性研究     

简子健  苗中秋  马素贞  谷思燚 《新疆农业科学》2009,46(3):651

研究采用PCR 方法从焦虫病患牛的全血基因组中扩增得到846 bp 的Tams1 基因片段,将其克隆至真核表达载pcDNA3.1(+),构建Tams1基因的真核表达质粒.经测序验证后, 将Tams1基因的真核表达质粒尾静脉注射小白鼠进行Tams1 基因的瞬时表达.取接种小鼠的肝脏提取总RNA,采用RT-PCR 扩增目的条带;用重组质粒pcDNA3.1(+)-Tams1 皮下注射免疫小白鼠4 次后,进行免疫抗体检测.试验结果表明重组质粒pcDNA3.1(+)- Tams1含有完整的Tmas1基因片段.用该重组质粒免疫小鼠56 d后,小鼠血清中抗重组质粒pcDNA3.1(+)- Tams1的抗体效价可达1∶12 000以上,说明该重组质粒具有很强的抗原性.经Western-blot检验可得到抗原-抗体复合物产生的特异性条带,说明该重组质粒pcDNA3.1(+)- Tams1具有免疫原性.  相似文献   

建立大鼠实验性子宫内膜炎模型的探讨   总被引：2，自引：0，他引：2  

赵红琼  简子健  姚刚  马素贞  黄燕  卢学忠  王茂生 《新疆农业大学学报》2008,31(3):5-8

通过5%的氨水或3%的冰乙酸刺激大鼠子宫,然后子宫内接种能引起家畜子宫内膜炎的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌的混和病原菌,建立了大鼠实验性子宫内膜炎模型.该模型可用于子宫内膜炎病因学和治疗学的研究.  相似文献   

绵羊双肌臀(Callipyge)基因型的检测   总被引：1，自引：0，他引：1  

武坚  史洪才  张志峰  简子健 《畜牧兽医杂志》2006,25(6):1-4

绵羊的双肌臀(Callipyge,CLPG)基因表型为后臀肌肉增大近30%,是由位于绵羊18号染色体GTL2基因上游32.8kb处存在一个A→G的单核苷酸多态性(SNP)标记(命名为SNPCLPG)产生的,该SNP标记的存在与CLPG表型完全吻合。通过对SNPCLPG的分子检测,期望发现CLPG基因型种羊,为今后选育肉用性状更优异的新品系奠定基础。为此,选择设计合成了2对引物,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法,分别以引进的纯种澳洲陶塞特羊、德国美利奴羊以及陶塞特羊×新疆细毛羊杂交一、二代作为研究样本,进行了SNPCLPG位点的PCR检测。虽然获得了预期的两个497bp和165bp扩增片断,但未检测到CLPG基因型特征性的SNPCLPG突变(A→G)。  相似文献   

新疆猪繁殖与呼吸综合征病毒分离鉴定及Nsp2和ORF5基因遗传变异分析     

张美玲  陆桂丽  薛晶  刘丽雅  简子健  夏俊 《广东农业科学》2014,41(17):106-110

为探索新疆猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的变异特征,利用RT-PCR、ORF5和部分NSP2基因序列进行分析,鉴定从新疆某猪场疑似猪高热病死亡猪肺脏分离出的一株病毒.分离的病毒株被鉴定为PRRSV美洲型,命名为XJ-Q株.该株病毒与香港分离株HK13亲缘关系最近,与国内变异株(HUB1和JXA1)同源性较为亲近.与美洲型标准毒株VR-2332相比,该分离株在481位和532～560位共有30个氨基酸缺失;与国内分离的PRRSV变异株相比,在487～489位有3个氨基酸的独特缺失.结果表明,新疆分离株为PRRSV美洲型,属于新缺失的PRRSV毒株.  相似文献   

K88ac-STⅡ融合基因的克隆与测序   总被引：1，自引：0，他引：1  

张辉  阿合买提·买买提  简子健  王远志  邱家祥 《新疆农业大学学报》2004,27(4):63-66

利用重叠延伸PCR技术将K88ac STⅡ融合基因克隆于T载体上,将重组基因质粒转化到受体菌DH10B中,蓝白斑筛选阳性菌落,通过PCR、NcoI/XcoI酶切后测序,与genbank报道的K88ac结构基因序列进行比对,证明所克隆的目的片段为K88ac STII融合基因。  相似文献