杨树抗虫转基因研究现状和发展趋势     

王红莉  杨华  辜云杰  罗建勋 《四川林业科技》2010,31(6):21-25

杨树以其自身的优势发展迅速,无论是在生态环境的建设还是工业原料方面都做出了巨大的贡献。但是,其最大的天敌——虫害往往使其蒙受严重损失,为解决这一问题,科研人员进行了一系列工作,抗虫转基因便是最理想的一种。综合杨树抗虫转基因的研究现状,本文综述了杨树基因工程中各种抗虫基因的类型、杀虫机理、实验研究及抗虫性。指出杨树抗虫基因工程研发的重要性,进一步探讨了其前景。  相似文献   

环形泰勒虫感染细胞抑制性消减文库的构建及ESTs分析     

赵洪喜  刘军龙  李有全  杨聪山  赵帅阳  刘娟  刘爱红  谢俊仁  田占成  刘志杰  刘光远  殷宏  关贵全  罗建勋 《中国农业科学》2015,48(22):4551-4563

【目的】环形泰勒虫（Theileria annulata）可以感染牛B淋巴细胞、树突状细胞和巨噬细胞,并可使被感染细胞发生转化,体外培养时可获得类似肿瘤样细胞的无限增殖能力。本研究通过构建环形泰勒虫转化和非转化宿主细胞抑制性消减文库,筛选环形泰勒虫裂殖体基因及转化细胞与宿主正常细胞之间的差异表达基因。【方法】以环形泰勒虫裂殖体转化细胞和非感染牛外周血单个核细胞（即非转化宿主细胞）为试验材料,提取总RNA和mRNA,反转录合成cDNA;然后分别作为tester和driver,进行抑制性消减杂交（SSH）,构建环形泰勒虫转化和非转化宿主细胞抑制性消减文库;对随机挑取的阳性克隆进行测序及生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR对文库部分差异基因进行验证。【结果】通过对文库454个阳性克隆进行测序,共获得了有效表达序列标签（ESTs）364条,大小主要分布在350-1 200 bp之间;将这些ESTs序列在GenBank中进行BLASTn网上序列比对,其匹配于192条基因序列;其中包括环形泰勒虫序列60条(11条为虫体蛋白酶基因序列、10条为膜蛋白基因序列、7条为假设蛋白基因序列、5条为凋亡相关虫体蛋白基因序列、5条为核糖体蛋白基因序列、4条为细胞周期蛋白基因序列、4条为虫体抗原基因序列和虫体其它基因序列14条)、牛基因序列131条（其中19条为肿瘤相关蛋白基因序列）和1条未知序列;其中已有功能注释的ESTs 285条,再将已知功能的ESTs通过WEGO软件从生物学过程（biological process）、细胞组成（cellular component）和分子功能（molecular function）3个部分进行GO聚类分析,结果表明,宿主细胞差异基因主要集中在细胞、细胞进程、结合、催化、代谢进程、生物调节等功能方面。另外,通过对部分环形泰勒虫裂殖体转化宿主细胞差异基因进行荧光定量PCR分析,结果表明,肿瘤相关基因HCLS1和SENP5在转化宿主细胞中转录水平分别是非感染牛PBMCs(非转化宿主细胞)的2.06和1.32倍。【结论】利用SSH技术,成功构建了环形泰勒虫感染宿主细胞的抑制性消减文库,筛选获得了转化宿主细胞和环形泰勒虫裂殖体的表达基因,并通过荧光定量PCR分析获得了2个可能参与宿主细胞转化的基因,为进步探索环形泰勒虫与宿主细胞相互作用的分子机制奠定了基础。  相似文献   

川西云杉天然林分布特点和种内群体分化的初步研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

吴远伟  罗建勋  胡庭兴 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2008,36(9):81-86

【目的】系统揭示川西云杉表型变异程度和变异规律。【方法】以川西云杉天然分布区内12个有代表性的群体、每个群体的30个单株为试材,测定其球果、针叶、种鳞和种翅12个性状,采用方差分析、聚类分析方法,对群体间和群体内的表型多样性进行系统比较研究。【结果】川西云杉球果、针叶、种鳞和种翅的表型分化系数均值分别为39.69%,34.19%,27.20%和45.82%,以种鳞的最小,其性状稳定性较高;群体间变异(36.53%)小于群体内变异(63.47%);以川西云杉全分布区内的地理气候因子进行聚类分析,可以将其划分为5个小生态分布区;通过表型性状的聚类分析可以将川西云杉的12个群体划分为3类,白玉群体单独聚为一类,九龙、雅江和色达群体聚为一类,其余8个群体聚为一类。【结论】川西云杉天然林群体内多样性大于群体间多样性,群体内分化明显高于群体间,因此在遗传改良工作中进行优良群体选择和利用时,应该加大对优良个体选择和利用的力度。  相似文献   

牛皮蝇Hypodermin B 基因的克隆及原核表达载体构建   总被引：1，自引：0，他引：1  

唐立刚  杨东英  殷宏  罗建勋  欧阳五庆 《中国牛业科学》2004,30(2):4-6

参照牛皮蝇Hypodermin B(HB)基因的核苷酸序列,设计一对引物,以牛皮蝇总RNA为模板利用RT—PCR扩增牛皮蝇HB基因,并对扩增基因进行克隆测序。序列分析表明,克隆的牛皮蝇HA基因与GenBank中已经登录的核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97．2％和99．3％。同时,将该基因与原核表达载体．PGEX-4T-1连接,构建并获得阳性重组表达载体。  相似文献   

滇杨生长特性研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

罗建勋  郑文  辜云杰  曹小军 《西南林学院学报》2006,26(6):22-25

对四川省美姑县滇杨树高、胸径、材积生长规律研究结果表明:滇杨有较强的生长适应性,25年生树高为29.56 m,胸径为49.4 cm,材积为2.243 5 m3;滇杨造林初期生长相对较缓慢,在10年生时树高和胸径连年生长量到达峰值,之后开始下降但仍保持较高的年生长量;材积连年生长量和平均生长量随着树龄的增大而呈持续增长趋势,25年生时,仍维持较快的增长速度;Logistic曲线对滇杨树高、胸径和材积生长动态有较好的拟合效果.  相似文献   

云杉现有天然林的遗传分化和种源区划分   总被引：1，自引：0，他引：1  

罗建勋  顾万春  姚平 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2005,33(12):78-84

在全分布区现存云杉(picea asperata)天然林资源和表型多样性调查的基础上,分层抽取10个群 体,每群体30个个体,同步进行表型和同工酶两水平遗传多样性研究,并利用方差分析、多重比较、相关分析和聚 类分析对17个表型性状进行了统计。结果表明,云杉种内表型变异丰富,群体间和群体内的遗传变异分别占30％ 和70％左右,群体间的变异主要呈纬度为主的梯度变异;同工酶变异的群体遗传学参数表明,云杉群体间的变异占 总变异的31．78％,群体间的分化大,群体间的遗传距离与地理距离无显著相关关系(P=0．106>0．05)。依据天然 群体表型、同工酶水平遗传分化和聚类分析,并结合天然群体地理生态因子的聚类分析,可将现有云杉天然群体分 为3个种源区和5个亚区。  相似文献   

光秃爱沙木茎和叶片形态解剖结构与抗旱特性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

王雪婧  罗建勋  石大兴  周魏  王莉 《西南农业学报》2007,20(5):1074-1077

为探讨光秃爱沙木(Eremophila glabra)适应干旱的机理,本文对其叶片、叶柄、茎制作石蜡切片,对其相关部位从形态和解剖结构上进行观察和分析。结果表明,光秃爱沙木的解剖结构具有一些典型的耐旱植物特征,如具有表皮毛、腺毛、叶片厚、栅栏组织发达等。  相似文献   

云杉天然群体基因分化与种质资源异地保存抽样策略   总被引：1，自引：0，他引：1  

罗建勋  顾万春  陈少瑜 《西南林学院学报》2007,27(1):5-10

采用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳和水平淀粉凝胶电泳对云杉全分布区10个天然群体的300个个体进行酶电泳分析,研究天然群体的等位基因数量和频率分化,共测定8种酶系统,得到17个清晰酶位点和27个等位基因.10个群体检测到的等位基因数均值为24.7个(变幅为23～27个).据基因频率进行分类,检测到全域基因和广域基因数量分别为19个和7个,分别占总基因的70.37%和25.93%;特有基因只有1个,即铁布群体的Idh-2-C,占总基因的3.7%.10个群体基因频率的均值没有太大差异,相同位点的广域基因频率在群体间均存在差异.通过计算机模拟建立云杉天然群体种质资源保存的群体和群体内个体两个层次的基因捕获曲线.群体的等位基因频率与地理生态因子的相关分析表明:Fdh-2-B基因频率与生态梯度值呈显著负相关(r=-0.661 1*).构建了云杉天然群体核心种质保存的抽样策略,经综合分析,抽取全分布区内铁布、卓尼、阿坝、小金、热务沟、凤县和曲谷7个群体,每个群体保存25个拟式无亲缘关系的个体,可以保护云杉种内95%～99%的基因资源.  相似文献   

攀枝花地区麻疯树天然群体表型多样性研究   总被引：4，自引：3，他引：4  

罗建勋  和献峰  辜云杰  唐平  曹小军  杨培金 《西南林学院学报》2008,28(6):31-35

为揭示攀枝花地区麻疯树现有天然群体的表型变异程度和变异规律,采用巢式方差分析、相关分析、聚类分析等方法,对该地区麻疯树天然分布区具有代表性的5个群体、云南元谋的1个群体种子及叶片性状进行比较分析．结果表明：该地区麻疯树表型性状在群体间和群体内存在丰富的遗传变异;群体间表型分化系数的变幅为22．00％-72．63％,均值为42．01％,群体间变异（42．01％）小于群体内变异（57．99％）;米易和鳃鱼群体的平均变异系数较大,分别为12．81％和12．70％,而拉蚱和同德群体的平均变异系数较小,分别为10．50％和10．36％;鲢鱼和米易群体的重复力分别为0．27和0．29,均低于平均值0．35;利用群体间欧氏距离进行UPGMA聚类分析,把攀枝花地区麻疯树天然群体分为5类,只有鳃鱼和米易群体聚合为一类,其余群体均单独聚为一类．  相似文献   

残缘璃眼蜱人工培育及环形泰勒虫的实验性传播   总被引：1，自引：1，他引：0  

罗建勋  殷宏等 《中国兽医科技》2002,32(6):27-28

将采自内蒙古自治区的残缘璃眼蜱（Hyalomma detritum)饲喂于牛体，观察了成虫，幼虫，若虫在实验室饲喂条件下的生活周期及滞育现象。通过蜱传播试验证实，残缘璃眼蜱饥饿幼虫，若虫吸入病原，其蜕化之若虫，成虫能将环形泰勒虫（Theileria annulata) 传播给敏感动物，而幼虫阶段吸入病原，如若虫阶段在免体饱血，所蜕化产生的饥饿成虫不传播该病。  相似文献