逆转录病毒载体介导的猪瘟病毒E2基因在真核细胞中表达及动物免疫试验     

许信刚  胡建和  张彦明 《中国农学通报》2005,21(5):20-20

利用DNA重组技术将猪瘟病毒(CSFV)石门株囊膜蛋白E2基因插入逆转录病毒载体pBABE-puro 中构建成重组逆转录病毒载体pBABE-puro-E2,该重组逆转录病毒表达载体与pVSVg质粒经磷酸钙共转染法将其转入293GP细胞中包装逆转录病毒假病毒。用包装的假病毒感染SP2/0细胞,经嘌呤霉素筛选阳性细胞后进行流式细胞技术(FACS)分析,结果表明CSFV E2基因在SP2/0细胞膜上成功表达。将表达E2蛋白的SP2/0细胞腹腔免疫BALB/c小鼠,用流式细胞仪检测证明,成功诱导小鼠产生了抗E2蛋白的抗体。为下一步利用细胞免疫小鼠研制抗猪瘟病毒单克隆抗体打下基础。  相似文献   

猪瘟病毒DNA疫苗的构建及动物免疫试验   总被引：1，自引：0，他引：1  

许信刚  胡建和  张彦明 《中国农学通报》2005,21(3):9-9

利用DNA重组技术将猪瘟病毒（CSFV） C株E2囊膜蛋白全长基因克隆到真核表达载体pcDNA4.0的CMV启动子下游,采用磷酸钙转染法将重组质粒转入293T细胞,流式细胞仪(FACS)检测293T细胞瞬时表达了E2囊膜蛋白。将构建的重组质粒肌肉注射BALB/c小鼠,用流式细胞仪和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测证明成功诱导小鼠产生了抗E2蛋白的抗体,为下一步利用DNA疫苗免疫小鼠研制抗猪瘟病毒单克隆抗体打下基础。  相似文献   

抗菌肽BSN-37的抑菌活性及其稳定性分析     

张炜  杭柏林  司素锦  宁春妹  李杰  胡建和 《中国畜牧兽医》2019,(1)

试验旨在研究抗菌肽BSN-37的抑菌活性和稳定性。采用微量倍比稀释法测定抗菌肽BSN-37的最小抑菌浓度(MIC),菌落计数法分析抗菌肽BSN-37对大肠杆菌CVCC1568的杀菌动力学特征,扩散法测定抗菌肽BSN-37的盐离子稳定性、酸碱稳定性、血清稳定性、胰酶稳定性、热稳定性、反复冻融稳定性、室温保持稳定性、药效保持时间稳定性。结果显示,抗菌肽BSN-37对革兰氏阴性菌(大肠杆菌和沙门氏菌)的MIC为1.5625～25μg/mL,对革兰氏阳性菌(枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌)的MIC为1.5625～12.5μg/mL,对真菌(白色念珠菌)没有活性;抗菌肽BSN-37可在90min内完全杀灭大肠杆菌CVCC1568;除了Fe2+和胰酶会影响抗菌肽BSN-37的抑菌活性外,在75～100℃的高温、150～250mmol/L高浓度盐离子(Na+、K+、Ca2+和Mg2+)、20%～25%饱和浓度的Cu2+、pH 4～10、20%～25%的血清、10～12次的反复冻融、10～12d室温保存等条件下仍能保持较好的抑菌活性,药效保持时间可达7.5d。本试验结果表明,抗菌肽BSN-37具有替代抗生素成为新抗菌药物的潜力,为抗菌肽BSN-37的临床应用提供了理论依据。  相似文献   

鸡马立克氏病的综合防治     

魏刚才  胡建和  何宏轩  班世灿 《养禽与禽病防治》1996,(9)

鸡马立克氏病的综合防治魏刚才，胡建和，何宏轩，班世灿（河南职业技术师范学院牧医系４５３６００）目前对养鸡业危害严重的马立克氏病以其独特的发病特点和不易治疗性使养鸡者蒙受巨大损失，甚至使鸡场倒闭。疾病的防治原则是“防重于治”，这对马立克氏病尤为重要。近...  相似文献   

猪源奇异变形杆菌的分离鉴定与耐药性分析     

董萌萌  徐彦召  杭柏林  杨磊  孙亚伟  王青  胡建和 《中国兽医杂志》2018,(5)

为了对河南省某猪场疑似细菌感染病例进行确诊,本试验采集了病猪肠道中的样品从中分离到1株革兰阴性短杆菌,进行了培养特性观察、生化试验、药敏试验以及16S rRNA基因序列分析。结果显示,分离菌的生化特性、培养特性基本符合奇异变形杆菌的特征,16S rRNA基因序列与奇异变形杆菌的同源性在98%以上,将该分离菌株命名为ZB17;序列分析表明,该分离菌株与猪源奇异变形杆菌(HQ259935.1和KR133627.1)的同源性最高,与大肠杆菌、沙门菌,克雷伯菌的同源性相对较低;分离株具有较强的致病性和多重耐药性,对复达欣、庆大霉素、奈替米星、阿米卡星敏感;但对氨苄西林、美洛西林、先锋霉素IV、先锋霉素V、先锋霉素VI、卡那霉素、新霉素、四环素、强力霉素耐药。本试验为猪源奇异变形杆菌的分离、鉴定及治疗提供了参考。  相似文献   

1例鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析     

董萌萌  王晓斐  徐彦召  王青  孙亚伟  杭柏林  胡建和 《中国畜牧兽医》2018,(9)

为查明河南省新乡市某规模化蛋鸡场疑似沙门氏菌感染病例的病原,进而制定合理的治疗方案,本研究无菌采集疑似病雏鸡肠管样品,用革兰氏染色、培养特性观察、生化试验、PCR方法对其进行确诊,并进行病原回归试验,采用药敏纸片琼脂扩散法(K-B法)分析分离菌对19种常见抗生素的耐药性。结果显示,本试验成功分离了一株革兰氏阴性短杆菌,该分离菌符合鸡白痢沙门氏菌的培养特性和生化特性;PCR成功扩出invA基因,通过与GenBank数据库比对分析确定该细菌为鸡白痢沙门氏菌;用分离细菌株感染SPF鸡能复制出与自然感染一致的病例,说明鸡白痢沙门氏菌是造成本养鸡场雏鸡发病的主要病原;分离株具有较强的致病性和多重耐药性,对阿米卡星、苯唑青霉素、青霉素耐药,对复达欣、氨苄青霉素、头孢曲松等药物敏感,将敏感抗生素用于临床治疗效果明显。结合以上结果,本研究提出该病的具体防治措施,并取得了较好的效果,为鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定及防治提供了参考,对鸡白痢沙门氏菌病病原的早期诊断和治疗具有重要临床意义。  相似文献   

EM在蜜蜂养殖上的应用   总被引：3，自引：1，他引：2  

杭柏林  李杰  胡建和  刘丽艳 《中国蜂业》2008,59(12)

1992年我同从日本引入EM技术,即有效微生物（Effective Microorganisms,简称EM）应用技术,其效果在农业、畜牧业、环境净化等多方面得到广泛试验和验证。EM是日本琉球大学比嘉照夫教授研制出来的新型复合微生物菌剂,南光合细菌、放线菌、酵母菌、乳酸菌和同氮菌等5科10属80多种微生物复合培养而成,  相似文献   

关于动物微生态学的几点思考     

杭柏林  胡建和  李杰  王丽荣  刘丽艳  王三虎  刘兴友 《中国家禽》2008,30(14)

1 加强动物微生态区系中微生物种类的研究 在动物微生态区系中微生物种类很多,各种不同种类的微生物及其相互之间的互作对动物正常微生态区系有着不同的作用.然而,目前限于研究技术手段的缺陷,对微生物种类的研究主要注重于细菌,而对区系中的病毒、真菌、寄生虫等却缺乏研究.  相似文献   

福尔马林熏蒸雏鸡造成眼部损伤     

魏刚才  郑爱武  胡建和 《养禽与禽病防治》1998,(7)

福尔马林熏蒸雏鸡造成眼部损伤魏刚才，郑爱武，胡建和（河南省职业技术师范学院４５３６００）福尔马林是一种使用方便且价廉的消毒剂。许多孵化场在孵化过程中常用福尔马林熏蒸消毒，但福尔马林有一定的毒性，对人畜有害。出雏器内持续熏蒸或高浓度熏蒸雏鸡会伤害雏鸡呼...  相似文献   

不同日龄鸡法氏囊中TLR15、LY86和TRIM39 mRNA表达水平     

杭柏林  ;胡建和  ;王丽荣  ;李杰  ;尚田田 《现代畜牧兽医》2014,(6):1-5

本研究通过荧光定量PCR方法检测了TLR15、LY86和TRIM39 mRNA在不同日龄鸡法氏囊中的变化。结果显示,10日龄时,TLR15 mRNA的相对表达量显著高于18胚龄时的,10日龄和30日龄时的表达量基本相同;出壳后,LY86 mRNA的表达水平呈下降趋势,30日龄时的表达量极显著低于18胚龄时的;而TRIM39 mRNA在出壳后表达量逐渐增加,30日龄时的表达量极显著高于18胚龄时的。本研究结果表明,TLR15、LY86和TRIM39在鸡法氏囊发育过程中发挥着重要作用。  相似文献