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【目的】克隆草原短尾羊Brachyury基因(即T基因)编码区(CDS),并制备Brachyury蛋白特异性多克隆抗体,为草原短尾羊短尾表型机制研究提供重要的试验材料。【方法】提取草原短尾羊16 d胚胎的组织RNA,反转成cDNA,以cDNA为模板,采用PCR方法克隆草原短尾羊Brachyury基因CDS全长序列。将Brachyury基因CDS全长序列连接至pEASY-Blunt E1载体,构建原核表达载体pEASY-Blunt E1-Brachyury,并进行Nhe Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切鉴定。将原核表达载体导入RosettagamiB(DE3)大肠杆菌,并进行IPTG诱导表达,对表达产物进行回收纯化。利用纯化后的表达产物免疫6周龄日本大耳白兔,用间接ELISA(iELISA)法测定血清多克隆抗体效价。以制备的多克隆抗体为一抗,采用Western blot法检测草原短尾羊16,20,25和30 d胚胎中Brachyury蛋白的表达水平。【结果】克隆了1 335 bp的草原短尾羊Brachyury基因CDS全长序列,成功构建了原核表达载体pEASY-Blunt E1-Brachyury,表达获得了49.16 ku的重组Brachyury蛋白。成功制备了重组Brachyury蛋白多克隆抗体,抗体效价达1∶1 500,该多克隆抗体可以特异性识别草原短尾羊胚胎中的Brachyury蛋白。草原短尾羊16 d胚胎中Brachyury蛋白的表达量最高。【结论】成功制备草原短尾羊Brachyury蛋白兔血清多克隆抗体,抗体效价为1∶1 500,该多克隆抗体可以特异性识别草原短尾羊胚胎中的Brachyury蛋白。 相似文献
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监测兽用抗菌药使用情况是了解细菌耐药性的必要工作。为了解全球兽用抗菌药使用情况,分析了世界动物卫生组织(WOAH)第6版《兽用抗菌药使用情况监测报告》。分析发现:2020年美洲较多国家/地区允许使用抗菌药饲料添加剂,但趋向使用黄霉素等不易产生耐药性的非重要抗菌药;亚太地区允许使用抗菌药物添加剂的国家/地区数量下降最多,对使用抗菌药添加剂的管理日趋规范;亚太地区养殖量与美洲相当,是欧洲的2倍,但2018年兽用抗菌药总用量是美洲的2倍、欧洲的6倍,单位动物用量是美洲的1.5倍、欧洲的2倍,总体用药量和单位用药量均偏高。值得肯定的是,亚太地区兽用抗菌药使用量下降幅度最大,较2016年下降59%,是美欧地区同比降幅的2倍,兽用抗菌药减量控制效果明显。 相似文献
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促早发、保稳长、增后劲是夺取棉花高产优质的关键。早发有利于延长有效开花结铃期 ,增加优质棉比例 ,有利于抗灾夺丰收 ;稳长可以趋利避害 ,协调营养生长和生殖生长的关系 ,促进结铃分布均匀 ,提高中下部和内围节结铃率 ;增后劲能充分利用后期的有利气候条件 ,促使棉花上部多结铃 ,提高后期铃重。因此促早发、保稳长、增后劲是增加单位面积总铃数、铃重和改善纤维品质的三个重要关键 ,应着重抓好以下几点 :1 提高土壤肥力 ,改善生育环境这是实现早发稳长增后劲的基础。提高土壤肥力 ,一方面要提高土壤养分含量 ,另一方面要增强土壤保肥保… 相似文献
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不同密、肥水平下苏棉9号的生育特点 总被引:3,自引:0,他引:3
不同密、肥水平下苏棉9号生育主要特点有:株高、果枝台数、主茎果枝节间距等随密度和施肥量的增加而增加;果枝节位数随密度下降(或施肥量增加)而增加;单株结铃数(率)随密度增加而下降;棉铃的分布以中、下部和内围铃为主;伏秋桃比一般在6∶4~7∶3之间,稀植(或高肥)条件下霜后花和僵瓣花的比例增加以及增密的效益比增肥的效益要高等特点。合理密植、控制氮肥用量,可协调营养生长和生殖的关系,控制主茎节间距和果枝长度,减少外围果节的结铃数,改善田间通风透光条件,提高结铃率,促进早熟,提高品质,提高种植苏棉9号的效益。 相似文献
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