猪瘟兔化弱毒株E~(rns)基因的克隆及序列分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

尹双辉  韩雪清  胡永浩  尚佑军  刘湘涛 《甘肃农业大学学报》2004,39(3):235-238

从兔脾组织中提取猪瘟病毒兔化弱毒株RNA,利用RT-PCR技术,扩增了猪瘟兔化弱毒的第一个囊膜糖蛋白基因Erns,并对其进行了序列分析。核苷酸序列比较发现,CSFV与Brescia株和GPE-株的同源性为94.6 %,与石门毒株和Alfort/A19株的同源性为95.0 %,与ALD株的同源性为95.4 %。根据核苷酸序列推导出氨基酸序列,并进行氨基酸序列同源性比较,结果表明,CSFV与Alfort/A19株和ALD株的同源性为93.8 %,与GPE-株的同源性为93.0 %,与石门毒株和Brescia株的同源性分别为94.7 %和95.2 %。 rns  相似文献   

弯杆菌富集培养试验     

胡永浩 《甘肃农业大学学报》1995,30(1):24-27

本文报道了一种固－液双相培养系统富集培养弯杆菌的方法。这种双相培养系统系由在扁瓶底层制备的胰胨大豆胨琼脂平板与平板上层覆加的改良布氏肉汤所构成。在常规培养条件下，双相培养系统与单纯改良布氏肉汤进行培养对比试验。结果表明，两种培养方法之间存在着显著差异（ｐ＜０．０５），双相培养系统明显地优于单纯改良布氏肉汤。  相似文献   

一种新发鸭病的流行病学调查报告     

范根成  刘东  栾栋祖  李彬  王群义  刘平  邹敏  杜元钊 《中国动物检疫》2011,28(1):68-69

通过对2010年4月份至今,在福建、浙江、山东等地的1612个产蛋鸭群发病情况调查,结果表明该病具有传播快、流行区域广泛、主要发生在产蛋鸭群、产蛋下降明显等流行病学特征,与目前已知的鸭病不同,为一种新发现的急性病毒性传染病。  相似文献   

一种改良的提取猫细小病毒基因重组质粒（pEH20）DNA方法     

胡永浩 《甘肃农业大学学报》1994,(4)

通过对碱变性和ＰＥＧ法提取纯化质粒ＤＮＡ的改进，成功地进行了ｐＥＨ２０ＤＮＡ的制备，得到了高纯度的质粒ＤＮＡ。改进的方法使碱变性法与ＰＥＧ法有机地衔接起来，具有经济、省时、简便、可靠的特点，可用于相关质粒ＤＮＡ的大量制备。  相似文献   

猪口蹄疫病毒对三种动物细胞嗜性的研究   总被引：2，自引：3，他引：2  

吴锦艳  刘湘涛  胡永浩  尚佑军  田宏  孙世琪  尹双辉  冯霞 《甘肃农业大学学报》2005,40(3):306-310

将猪FMDV毒株(O/GD/MSH/86)分别适应牛肾细胞(Bovinekidney,MD-BK)、幼仓鼠肾细胞(Babyhamsterkidney,BHK-21)和猪肾细胞(Porcinekidney,PK-15),研究了FMDV在宿主细胞上的嗜性。结果发现,该毒株在MD-BK细胞上不产生细胞病变(CPE),从细胞液中也未检测到病毒,而在BHK-21和PK-15细胞上能够稳定产生CPE。可见,猪FMDVO/GD/MSH/86毒株不能在MD-BK细胞上增殖,而在BHK-21和PK-15细胞上则增殖较好。  相似文献   

猪源冠状病毒ORF3和ORF7的克隆及特性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

李建强  柳纪省  程杰  兰喜  胡永浩  吴润  殷相平  李宝玉 《甘肃农业大学学报》2007,42(6):1-7

参照GenBank中Purdue株全序列对TGEV(猪传染性胃肠炎病毒)TS株的ORF3和ORF7各设计1对特异性引物,经RT-PCR扩增分别获得了1 487 bp和516 bp大小的两个片段,与预期结果大小相符.TS株与CHV株、Puedue株、BW021898B株和KT2株的ORF3a核苷酸序列同源性分别为99.1%、93.0%、95.9%、94.4%,相应的氨基酸同源性分别为97.3%、87.8%、93.2%、91.8%,TS株与CHV株、Puedue株、BW021898B株和KT2株的ORF3b核苷酸序列同源性分别为99.5%、98.5%、97.0%、97.8%,相应氨基酸的同源性分别为98.4%、96.3%、94.3%、95.8%,而TS株与PRCVIA1894株的ORF3b核苷酸和氨基酸同源性分别为96.6%和93.9%.TS株ORF7没有发生缺失且和其他毒株有很高的同源性.结果表明:TGEV非结构蛋白高变区在ORF3a第192个碱基至终止密码子之间,TGEV和PRCV在编码ORF3b氨基酸的数量和RNA酶结合位点上有一定的差异.  相似文献   

兔出血症病毒试验感染及临床病理学观察     

刘俊林  胡永浩  伏小平  王若聪  姚学萍  包世俊  项光华 《甘肃农业大学学报》2004,39(4):364-368

以不同日龄及生理状态下的中国白兔为试验动物,经静脉接种、皮下接种、滴鼻和同居感染兔出血症病毒,进行临床检查和病理学观察。结果表明,静脉接种感染的兔潜伏期比其他途径感染的兔短;2月龄以下幼兔有明显的抵抗力,其他月龄的兔均易感,怀孕兔全部发生流产;临床病理学观察以各实质器官的退行性病变及弥散性血管内凝血为主要特征,表现为各组织器官严重出血、水肿,实质细胞广泛性变性、坏死,微血管内大量血栓形成、炎性细胞浸润等。  相似文献   

1株鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及生物学特性研究     

宋新宇  张青  郭莉莉  窦小龙  赵鹏  郎枫  范根成 《中国兽医杂志》2018,(7)

为跟踪传染性支气管炎病流行情况,2015年我们从在江苏某养鸡场疑似传染性支气管炎发病鸡群采集分离到1株疑似传染性支气管炎病毒,对其进行了鉴定和生物学特性研究。结果在鸡胚上连传6代出现鸡胚典型病变,死亡鸡胚全身出血明显,未死鸡胚发育受阻,呈明显的侏儒胚、蜷缩。分离株S1基因RT-PCR扩增可见到清晰的1. 7 kb左右大小的条带,与引物设计的预期结果相符,与Gen Bank中的IBV序列进行比对和分析,从进化树看,分离株属于IBV当前主要流行的QX型。电镜下观察可见直径为80～120 nm,有囊膜和纤突的冠状病毒粒子;经卵磷脂酶C处理后能凝集鸡红细胞,并能特异性地被该分离株的高免血清所抑制;对热、酸碱、胰酶有一定耐受性,对脂溶剂敏感,符合鸡传染性支气管关病毒(IBV)有囊膜的特性;该分离株的最小致病量为102. 0EID50。该毒株灭活苗0. 25 m L/只免疫即可达到良好的免疫效果。以上结果表明,该分离株符合鸡传染性支气管炎病毒的特性。  相似文献   

兰州地方分离PCV毒株ORF2阅读框的测序分析与原核表达鉴定     

傅昱  郝晓芳  卢曾军  孙普  胡永浩  刘在新 《湖南农业科学》2010,(4):23-27

根据GenBank中发表的PCV1和PCV2的ORF2基因序列,设计合成了一对共用引物,用PCR的方法从兰州本地病料中分离出毒株,通过PK-15的增殖,扩增出ORF2序列,测序分析后发现分离毒株序列与PCV1的ORF2序列同源性达到99.1%～99.4%。根据GenBank中PCV2的ORF2序列对目的序列进行了改造、优化和合成后,目的序列和pET-32a载体连接,转化BL21（DE3）细胞后,挑取阳性克隆。对鉴定后的融合质粒用IPTG诱导,裂解液经过SDS-PAGE分析、纯化操作和Western-Bloting分析,表明改造合成ORF2序列在大肠杆菌中得到了表达,并能被PCV2阳性血清所识别。  相似文献   

油佐剂研究进展与质量监控   总被引：1，自引：0，他引：1  

李芳  张荣武  单虎  常维山  范根成  孙健  袁雅平 《中国动物检疫》2010,27(12):70-71

本文介绍了国内外白油质量标准、利用白油制备的油佐剂及油类油佐剂的毒副作用,供疫苗生产厂家在选择白油时参考,并可解释油苗使用过程中出现异常反应的原因。  相似文献