H1N1猪流感广东株血凝素基因的克隆与序列分析   总被引：6，自引：1，他引：6  

胡永浩  姚学萍  李海燕  赵有淑  杨焕良  陈化兰 《畜牧兽医学报》2005,36(2):172-176

用RT-PCR方法扩增H1N1亚型猪流感病毒广东分离株A／Swine／GuangDong／711／2001HA基因，对其进行了克隆和测序。结果显示，HA基因全长1771bp．共编码579个氨基酸。A／Swine／Guang Dong／711／2001HA基因编码的氨基酸序列中有8个糖基化位点，5个位于HAl基因的第27、28、40、104和287位点，3个位于HA2基因的21、153和213位点。与H1N1亚型猪流感经典毒株比较后发现，血凝素糖基化位点并不是高度保守的。将A／Swine／Guang Dong／711／2001与自Gen Bank读取的1918年人流感毒株A／South Carolina／1／18、1991年人流感毒株A／MD／12／91和1997年猪流感毒株A／Swine／Wisconsin／238／97等进行核苷酸同源性比较分析，A／Swine／Guang Dong／711／2001与A／SouthCarolina／1／18、A／MD／12／91和A／Swine／Wisconsin／238／97等毒株的核苷酸同源性分别为93．9％、94．7％和93．9％。从系统发生树来看，A／Swine／Guang Dong／711／2001与A／South Carolina／1／18和A／Swine／Wisconsin／238／97的亲缘关系相近。  相似文献   

特异抗体致敏的SPA茵体浓缩新城疫病毒方法在临床诊断中的应用     

包世俊  胡永浩  项光华  姚学萍 《中国动物检疫》2006,23(1)

为提高新城疫临床诊断的准确率,建立了新城疫病毒浓缩方法,将粪便及脑、肺等器官组织病料中的新城疫病毒经特异性抗体致敏的金黄色葡萄球菌(SPA菌)吸附浓缩后,用RT-PCR进行检测.结果表明,所建立的新城疫病毒浓缩方法应用于临床诊断后,可显著提高检测敏感性,从而提高临床诊断的准确率.  相似文献   

动物寄生虫病学实验教学改革探讨   总被引：1，自引：0，他引：1  

赖为民  王淑贤  杨光友  姚学萍 《现代农业科学》2008,(9):137-138

结合新形势下动物寄生虫病学的发展,为培养21世纪创新型复合型人才,对动物寄生虫病学实验教学进行了相应的改革,所取得的一些成绩和经验。  相似文献   

猪流行性腹泻病毒感染的诊断与病毒的初步分离     

蒋梅  杨泽晓  张荣昌  姚学萍  王印 《中国兽医杂志》2012,48(11):37-39

猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起哺乳仔猪腹泻、呕吐、脱水和高致死率为主要特征的一种高度接触性肠道传染病.自1971年首次在英国和比利时报道之后,日本、韩国、加拿大、中国等世界各国相继报道了PED的发生[1-2].该病对全世界的养猪业造成了严重的经济损失.PEDV属于套式病毒(Nidovirales)冠状病毒科(Coronauiridae)冠状病毒属(Coronauirus),基因组核酸为单股正链RNA,有侵染性,长约28 kb[3].病毒颗粒呈球状,有囊膜和纤突,核衣壳呈螺旋状对称[4].1988年瑞士的首次报道PED病毒在Vero细胞上培养获得成功之后,我国的学者也先后在PK-15、Vero、ST等细胞上进行了该病毒分离的报道.  相似文献   

肉鹅巴氏杆菌病的诊治     

杨泽晓  周香  王印  姚学萍  汪开毓 《动物医学进展》2013,34(1):119-122

通过流行病学调查、临床剖检、细菌分离鉴定、生化试验、PCR检测、动物试验和药敏试验对一起鹅巴氏杆菌感染病例进行了确诊,并参考药敏试验结果进行用药治疗,控制疫情。药敏试验结果表明,该巴氏杆菌分离株对菌必治、头孢噻吩、头孢他啶、头孢唑肟和氟苯尼考5种药物较为敏感。  相似文献   

猕猴外周血液中多潜能调控因子Oct4、Nanog和Sox2基因的表达     

余树民  凌占业  姚学萍  曹随忠  杨泽晓  王印  沈留红  彭广能 《中国兽医学报》2013,33(3):389-393

采用半定量RT-PCR对采自幼体(2岁以内)、亚成体(2～5岁)和成体(5岁以上)猕猴共28份外周血样品进行分析.结果显示,幼体和亚成体猕猴所有外周血样品均转录表达Oct4、Nanog和Sox2基因,大部分成体猕猴外周血样品(8/12)表达Oct4、Nanog和Sox2基因,少数样品仅表达Oct4和Sox2(2/12)或Oct4和Nanog(1/12),1份样品不表达3个基因;同一年龄组内,Sox2表达水平均显著高于Oct4和Nanog(P≤0.05),幼体组Oct4和Nanog的表达水平没有显著性差异(P＞0.05),亚成体组和成体组Oct4的表达水平均显著高于Nanog(P≤0.05);在不同年龄组间,Oct4和Nanog表达水平没有显著性差异(P＞0.05),幼体组Sox2表达水平显著高于成体组(P≤0.05).结果表明,在生理条件下Oct4、Nanog和Sox2基因在不同年龄段猕猴外周血中均转录表达,不同基因表达水平存在一定差异,随年龄增加这些基因表达量有降低的趋势.  相似文献   

奶牛S100A12基因克隆、原核表达及体外抗菌活性分析     

曹随忠  雍康  姚学萍  崔亚飞  杨德英  余树民  刘宗平 《中国兽医学报》2013,33(6)

克隆奶牛S100A12基因并在大肠杆菌中高效表达.采用RT-PCR扩增奶牛外周血白细胞中S100A12基因,构建原核表达载体pCold TF-S100A12,在大肠杆菌BL21(DE3)中IPTG诱导表达并纯化.SDS-PAGE和Westernblotting分析显示S100A12基因以融合蛋白形式表达,表达量占菌体总蛋白的46.7％,纯化的重组蛋白(80 mg/L).琼脂扩散法测定重组蛋白对乳腺炎主要致病菌大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌活性.结果显示:重组蛋白对大肠杆菌有抗菌活性,而对金黄色葡萄球菌无抗菌活性.本研究为S100A12蛋白抗体制备及基因功能研究奠定了基础.  相似文献   

检测猪瘟病毒胶体金和量子点试纸条的初步研制     

江地科  尹清清  项明源  王印  姚学萍  罗燕  杨泽晓  张鹏飞  张保海  周丽军 《江苏农业学报》2020,36(1):116-121

为建立快速、简便检测猪瘟病毒(CSFV)抗体的方法,本研究采用胶体金和量子点免疫层析技术,将纯化的重组CSFV E2蛋白作为捕捉抗原,以纯化的抗CSFV E2蛋白多克隆抗体和HRP兔抗猪IgG分别包被于硝酸纤维素膜上,作为质控线(C线)和检测线(T线),优化反应条件,制备免疫层析试纸条,用于临床检测。结果表明,制备的2种试纸条都可用于检测CSFV标准阳性血清,使用不同批次试纸条进行检测,结果无差异。2种试纸条与CSFV阳性血清反应呈阳性,与伪狂犬病毒(PRV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和圆环病毒2型(PCV2)反应呈阴性;胶体金试纸条在临床样品中阳性检出率为84.38%(81/96),与CSFV抗体检测ELISA试剂盒检测阳性符合率为92.05%(81/88);量子点试纸条阳性检出率为87.50%(84/96),与ELISA试剂盒检测阳性符合率为95.45%(84/88)。本研究制备的2种试纸条都具有较好的特异性、敏感性、重复性和稳定性。  相似文献   

豪猪源福氏志贺菌的分离鉴定及喹诺酮类耐药基因检测     

张鹏飞  王印  德西措姆  杨泽晓  姚学萍  罗燕  廖倡宇 《中国预防兽医学报》2019,(2):204-208

为调查四川省某规模化豪猪养殖场中豪猪大面积腹泻死亡的原因,本研究采集病死豪猪的肠道内容物和肺脏等病料样品进行细菌的分离纯化,通过培养特性观察、革兰染色镜检、生化鉴定、16S rRNA基因的克隆测序进行鉴定,并对分离菌株进行致病性、耐药性分析,对其喹诺酮类耐药基因进行PCR检测并测序分析。结果显示,分离得到1株革兰阴性菌,该分离株符合福氏志贺菌的培养特性和生化特性,并且其16S rRNA基因序列与福氏志贺菌该基因序列的同源性为99%;对小鼠具有较强致病性;药敏试验结果显示分离株具有多重耐药性,仅对丁胺卡那敏感,对喹诺酮类、四环素类、头孢类、氨基糖苷类、青霉素类和氯霉素类药物均表现为耐药;分离株的DNA促旋酶Ⅱ和拓扑异构酶Ⅳ的喹诺酮耐药决定区均有突变,且携带有质粒介导的喹诺酮耐药基因qnr A和qnr S。本研究是国内首次关于豪猪源福氏志贺菌病的报道,为豪猪养殖中该细菌性疾病的诊断防治等相关研究提供参考。  相似文献   

猪源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及荚膜血清分型     

林星宇  胡凌  王印  杨泽晓  姚学萍  肖璐  任梅渗  曾相杰 《浙江农业学报》2016,28(4):558

为了解各血清型的多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida,Pm）在四川、重庆、云南的流行情况,对2013-2014年间四川、重庆、云南等地8个规模化养殖场的125份病死猪肺炎样品进行细菌分离,并用PCR方法对分离的多杀性巴氏杆菌进行鉴定及荚膜血清分型。结果表明：从有肺炎症状病死猪的肺脏样品中共分离出11株多杀性巴氏杆菌,其中有7株为A血清型（63.6%）,3株为D血清型（27.3%）,1株为F血清型（9.1%）,没有发现B和E血清型。表明在该区域内,猪肺疫主要是由A型Pm感染引起。另外,此次还分离出了1株较少见的F型多杀性巴氏杆菌。该结果可为上述地区巴氏杆菌病的防治提供科学材料。  相似文献