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按常规方法提取鸡毒支原体参考株(S6-10)、疫苗株(F14-6)及在氟喹诺酮类药物压力下体外筛选出来的耐药株的基因组DNA,扩增各菌株DNA旋转酶gyrA基因片段,并克隆、测序,利用DNASIS分析软件对测序结果进行分析。结果表明,S6-10和F14-6在恩诺沙星或环丙沙星压力下均筛选出不同程度的耐药菌,而且恩诺沙星致鸡毒支原体发生耐药性突变的机率高于环丙沙星,S6-10株耐药突变频率高于F14-6。S6-10筛选出来的耐药菌株发生突变的位置在DNA旋转酶gyrA亚基的第83位(相对于大肠杆菌gyrA亚基中的位置,以下同)和87位上,取代模式为Ser83→Ile、Glu87→Gln,高水平耐药株(Se32M,MIC≥128)除了在第83位发生突变外,在第82位还增加一突变位点(Asp→Gly);F14-6筛选出来的高水平耐药菌株(Fe32M)在DNA旋转酶gyrA亚基的第83、87位发生了双位点突变(Ser83→Ile,Glu87→Gly),而低水平耐药株(Fe8M、Fc8M)在gyrA亚基未发生任何位点突变。 相似文献
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临床分离鸡毒支原体粘附素蛋白编码基因pvpA的分子特征 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】探讨中国临床分离鸡毒支原体粘附素蛋白(PvpA)编码基因pvpA的分子特征,为进一步了解鸡毒支原体致病机制、建立新的鉴别诊断方法奠定基础。【方法】利用巢式PCR法对41株广东、四川和北京地区临床分离的鸡毒支原体和3株参考株的pvpA基因进行扩增并测序,分析中国临床分离株pvpA的基因变异特征。【结果】所有临床分离株pvpA基因分子特征与强毒株S6,BG44T一致,与疫苗株F36完全不同。临床分离株pvpA基因C-末端DR-1、DR-2区域(第670位~第1 056位)GC的含量为53.52%,明显高于鸡毒支原体的平均GC含量;所有临床分离株及S6、BG44T在DR-1和DR-2之间丢失60个碱基。推测该区域编码的氨基酸序列富含脯氨酸,高达30.27%;重复四肽Pro-Arg-Pro-X共出现10次,X为甲硫氨酸6次、甘氨酸1次、天冬酰胺1次、谷氨酰胺2次。而疫苗株F36 PvpA只有DR-1区域,与R株相比间隔25肽缺失了24个肽,DR-2区域全部丢失。【结论】临床分离株pvpA基因变异特征与强毒株S6一致,与疫苗株F36的变异特征有显著差异,可以把pvpA基因作为靶标以建立临床鸡毒支原体流行病调查和诊断的新方法。 相似文献
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在初中语文教学当中写作教学占据了一个重要的部分,学生写作水平的高低直接反映出了学生的学习素质。随着语文新课程教学标准的实施,对学生的写作能力又提出了新的更高的要求。提高学生的写作质量是现今语文教学所要达到的重要目标,不仅需要教师实施积极有效的教学方法,也需要学生配合教师的教学工作,提升教学效率。但是通过对初中语文写作教学的调查研究发现其中存在着不少的问题,本文将对这些问题展开讨论与探究,以期为今后写作教学的进一步实施提供借鉴之处。 相似文献
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本文旨在研究广东地区Ⅰ型鸭疫里氏杆菌流行分布情况及其分子分型特点。2007—2017年,收集广东地区病死鸭、鹅的脑或肝组织等样品,进行菌株的分离、纯化及PCR鉴定等试验;采用玻片凝集的方法对鸭疫里氏杆菌进行Ⅰ型血清型鉴定,并进一步对血清Ⅰ型菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型,用BioNumerics 6.0软件进行聚类分析,比较同源性。结果表明:2007—2017年本实验室共分离保存220株鸭疫里氏杆菌,其中有119株为Ⅰ型血清型,占总分离株的54.09%。PFGE分型得到33种不同的PFGE分型图谱(以相似度≥85%为判断标准),可分为19个簇及14个单一型。血清Ⅰ型是广东地区鸭疫里氏杆菌的优势血清型。Ⅰ型鸭疫里氏杆菌分子型别呈现多样化,菌株之间的同源性差异较高,但存在小范围的克隆传播。 相似文献
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利用1981 ~ 1993、2012 ~2014年郯城中华银杏物候观测资料,分析了郯城银杏生长气象条件及最佳观赏期特点,结果表明,郯城的气温、地温、光照条件均适合银杏生长发育;5~ 10月的降水量及相对湿度条件也均适合银杏生长发育,但5~10月的月极端最高气温均高于28℃,所以栽培中要注意防御高温.郯城银杏最佳观赏期平均开始时间是10月13 ~ 14日,最早的是10月7日,最晚的是10月19日;最佳观赏期平均持续时间是17 d,最长的是26d,最短的是8d.开始时间与持续时间在0.01水平上显著相关,相关系数为-0.719.开始时间与前期日均温、总降水量、总日照时数等气象要素长期累积效应数据的相关性不明显,与临近一周的日均温、平均气温日较差、降水量等气象要素短期效应数据均呈显著负相关;持续时间与前期总降水量、总日照时数等气象要素长期累积效应数据的相关性不明显,与前期日均温、短期临近一周的日均温、平均气温日较差均呈极显著正相关,与临近一周的降水量、期间日照时数均呈显著正相关. 相似文献
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传统教学中教师起主导作用,教师在教学中既有知识的传授又有情感的交流,师生之间互动性强,教师容易组织好课堂教学。多媒体教学手段弥补了课堂教学时数不足,使抽象问题形象化,易于学生理解和掌握知识点,提高课堂教学效率。但教学中过分依赖多媒体课件,则导致师生之间缺乏互动性,难以发挥教师在课堂上的主导作用和学生的主体作用。结合近年来多媒体教学手段在兽医药理学教学中的实际应用,建议合理运用现代教学技术和手段,使传统教学方式与多媒体教学相辅相成,构筑独具特色的课堂教学结构模式,优化教学效果。 相似文献
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从2014年和2016年保存的来自河南、广东、山东和湖北4个省1 100株食品动物肠道大肠杆菌中筛选出58株blaCTX-M-27阳性菌株,采用药敏试验测定产blaCTX-M-27的大肠杆菌对20种抗生素的敏感性,并用PCR的方法检测其所携带的其他耐药基因;通过脉冲场凝胶电泳分析各菌株之间的亲缘关系,通过接合或转化试验、复制子分型和Southern blot对携带blaCTX-M-27的质粒特征进行分析。结果显示,58株blaCTX-M-27阳性大肠杆菌对除了β-内酰胺类外的其他抗生素,尤其氟喹诺酮类呈现高水平耐药;大多数菌株还同时携带2~3种编码其他抗生素的耐药基因。PFGE分型结果表明,来源于同一采样地及不同省的菌株存在克隆现象,但不同省或来自于同一省份的不同采样地之间的菌株亲缘关系较远;菌株携带的blaCTX-M-27基因全部定位在质粒上,其中38株位于可接合的IncFIB质粒,另外20株位于不可分型的质粒。 相似文献
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广东地区患病食品动物源大肠杆菌ESBLs和AmpC酶流行分布调查 总被引:1,自引:0,他引:1
质粒介导的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶广泛传播和扩散,导致全球范围内肠杆菌科细菌对超广谱头孢菌素类的耐药性发展迅速,引起人们高度重视。食品动物源大肠杆菌可作为耐药基因储库,对细菌耐药性在动物、环境和人之间的传播起着非常重要的作用。本研究从2009年患病的食品动物,包括鸡、鸭、鹅和猪,分离鉴定了315株大肠杆菌,调查ESBLs和AmpC酶在患病食品动物中的流行分布。经双纸片协同扩散实验筛选出61株ESBL阳性菌株,PCR检测共检测出8种blaCTX-M基因,分别为blaCTX-M-14/14b、blaCTX-M-79、blaCTX-M-65、blaCTX-M-27、blaCTX-M-15、blaCTX-M-24、blaCTX-M-98和blaCTX-M-13,其中检出率最高的为blaCTX-M-79,其次为blaCTX-M-14/14b。本研究还检测出1株新的SHV型酶,命名为SHV-135;PCR共检测出5株大肠杆菌携带质粒源CMY-型AmpC酶,其中2株鹅源大肠杆菌携带1个新型CMY酶,命名为CMY-64。本研究表明患病动物分离的大肠杆菌中ESBLs和AmpC酶存在复杂性和多样性,而且新型β-内酰胺酶检出日益增多,提示兽医临床应慎用β-内酰胺类抗生素。 相似文献
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对临床分离和实验室药物压力下筛选的鸡毒支原体耐药株与敏感株进行超微结构的观察和比较.结果显示鸡毒支原体敏感株呈多形性,柔软且有较大的变形性,可清晰观察到细胞膜分为外、中、内三层膜,并可观察到裂殖繁殖方式;有的支原体在繁殖时先在极端产生泡状突起,形成不均等分裂.在恩诺沙星药物压力下敏感株产生耐药性后其外膜显著增厚,导致支原体的多形性减弱或消失,呈现出较为一致的圆形;细胞膜内层周围存在排列整齐、结构紧密、类似微管样的结构,胞内电子密度明显升高.临床分离的耐药株超微结构观察结果与实验室条件下筛选的耐药株一致:凡是超微结构发生变化的,均存在耐药表型,而且高水平耐药株的超微结构变化最为突出.研究结果表明耐药性的产生可导致鸡毒支原体超微结构明显的改变,并可能引起抗原性变异. 相似文献