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通过PCR技术获得口蹄疫病毒非结构蛋白3B基因,将其克隆至质粒pET-32a(+)和高效可溶性表达质粒pEM中,经PCR筛选,获得阳性重组子pET-3B和pEM-3B,将它们转化大肠杆菌BL21中进行诱导表达,SDS-PAGE及Western-blot检测结果证明,表达的3B融合蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应。蛋白可溶性分析表明,EM-3B融合蛋白绝大部分以可溶形式表达。以此可溶性融合蛋白EM-3B为抗原建立了可区分FMD免疫动物和感染动物的EM-3B-DIVA-ELISA方法,经检测,其特异性为95.0%,敏感性为97.5%,与2个国产试剂盒的符合率分别为96.25%和98.75%。 相似文献
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广东地区鸡毒支原体血清学调查 总被引:1,自引:0,他引:1
应用血清快速平板凝集方法,对广东地区12个非鸡毒支原体免疫的种鸡场及3个鸡毒支原体免疫的种鸡场进行了鸡毒支原体感染的血清学调查。结果显示:不同种鸡场及不同品种的种鸡的MG抗体阳性率高峰期均在11周龄左右,即鸡群的MG感染高峰期均在6周龄左右。 相似文献
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猪呼吸道冠状病毒(PRCV)研究概况 总被引:1,自引:0,他引:1
猪呼吸道冠状病毒病(PorcineDespiratoryCorouavirus,PRC)是由于感染猪呼吸道冠状病毒(PRCV)引起的一种呼吸道疾病。PRCV由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)演化而来的。本文综述了猪呼吸道冠状病毒(PRCV)的特性、基因组结构及主要病毒蛋白、诊断方法、免疫学上的作用等方面在国内外的研究情况。 相似文献
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本文通过PCR技术获得3D基因,使用拼接重叠延伸聚合酶链反应对3D基因内部的EcoRⅠ位点进行定点突变,将突变后的3D基因克隆至原核表达质粒pSOC和T4噬菌体的穿梭质粒pR中,通过PCR及质粒酶切鉴定,分别获得阳性重组子pSOC-3D和pR-3D。将含有3D基因的重组质粒pSOC-3D质粒转化大肠杆菌BL21进行表达,SDS-PAGE检测表达产物。将含有3D基因的重组质粒pR-3D转化T4噬菌体的宿主菌E2,通过同源重组获得重组噬菌体T4-3D,经SDS-PAGE及Western- blot检测,证明展示在T4噬菌体表面的3D融合蛋白能与FMDV感染血清发生特异性反应。 相似文献