产气荚膜梭菌菌落多重PCR方法的建立及初步应用     

董洁  杨晓静  苗承霞  沈晶  杨柳  姜艳芬  许信刚 《兽医大学学报》2013,(12):1842-1847

根据GenBank中已发布的产气荚膜梭菌α、β、ε、τ毒素基因序列,分别设计并合成针对4种毒素基因的特异引物,通过优化多重PCR反应条件,建立1种简单的产气荚膜梭菌定型菌落多重PCR方法。结果显示：A、B、C、D、E5型产气荚膜梭菌参考菌株均扩增出了相应的预期目的条带,而大肠杆菌、巴氏杆菌和芽孢杆菌则均未能扩增出相应条带;将单个菌落稀释100倍,仍能扩增出相应的目的片段,该方法对B型和E型参考菌株最低检测量分别为2．6×10^4cfu／mL、1．2×10^4cfu／mL。应用该多重PCR方法从106份样品中检测到30株产气荚膜梭菌且均为A型,其中病死鸡的盲肠内容物分离率为36．5％（19／52）,健康鸡群新鲜粪便样品分离率为20．4％（11／54）。本研究建立的多重PCR方法特异性强,敏感度高,重复性好,可以有效进行产气荚膜梭菌的快速检测及5种血清型的鉴别,对产气荚膜梭菌的感染及食品安全问题的研究均具有重要意义。  相似文献   

IBDV超强毒HZ株VP2基因的克隆和真核表达质粒的构建     

许信刚  李健强  王笑梅  童光志 《中国预防兽医学报》2000,(Z1)

利用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增克隆传染性法氏囊病病毒超强毒（ｖｖＩＢＤＶ）ＨＺ株ＶＰ２基因,并对ＶＰ２基因全序列测定,序列分析和聚类分析,同时将 ＶＰ２基因与真核表达载体 ｐｃＤＮＡ３相连接。结果克隆到 ＶＰ２基因全序列共 １３５６ｂｐ,分析表明ＨＺ株与欧洲超强毒株ＵＫ６６１高度相似,同时将ＶＰ２基因正向插入ｐｃＤＮＡ３的ＣＭＶ启动子下游,得到了ＶＰ２基因的真核表达质粒。为ＩＢＤＶ分子流行病学和基因工程疫苗的研究奠定了物质基础。  相似文献   

规模化猪场3种主要疫病抗体检测结果分析     

周宏超  贾佩  连星  张琪  郭抗抗  许信刚  吴晨晨 《动物医学进展》2022,43(4):124-129

为调查猪场免疫程序的合理性及猪群的免疫成效,论文对陕西省某规模化猪场的猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和猪伪狂犬病(PR)3种传染病进行血清学系统检测,并对检测结果进行分析.检测结果显示,22周龄后备母猪CSF抗体阳性率(30％)低于其他阶段猪群,哺乳母猪CSF抗体阳性率(96％)高于其他阶段猪群,整体猪...  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗临床使用效果评估     

周宏超  贾佩  郭抗抗  许信刚 《动物医学进展》2023,(4):130-133

为评估猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)灭活疫苗的临床使用效果，选用市售A、B两种PRRS灭活疫苗在陕西省某4 800头规模化母猪场开展对比试验。试验选取180头健康妊娠母猪，随机分为3组，在猪场正常生产管理流程下分别在母猪妊娠8周龄免疫A PRRS灭活疫苗、B PRRS灭活疫苗和灭菌生理盐水(对照组)。通过对试验组和对照组生产成绩、疫苗免疫后的抗体水平变化、分娩仔猪14日龄的PRRS母源抗体水平及仔猪PRRS水平传播能力等综合分析，发现A PRRS灭活疫苗免疫组生产成绩优于B PRRS灭活疫苗免疫组和对照组；A PRRS灭活疫苗免疫组母猪及14日龄仔猪抗体水平均高于B PRRS灭活疫苗免疫组和对照组；A PRRS灭活疫苗免疫组仔猪PRRS的水平传播能力低于B PRRS灭活疫苗免疫组和对照组。说明妊娠8周母猪免疫A PRRS灭活疫苗可提高母源抗体对仔猪的保护力，A PRRS灭活疫苗在一定程度上可阻断PRRS在产房的水平传播。  相似文献   

规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染的控制     

周宏超  贾佩  张琪  郭抗抗  许信刚 《动物医学进展》2023,(9):135-140

2022年2月1日，陕西省某规模化母猪场产房仔猪断尾去势液检测猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸阳性，该批仔猪于2022年2月23日断奶至下游育肥猪场，猪群断奶后3 d出现咳嗽、少食、发热等临床症状，根据临床症状、剖检大体病理变化、兽医实验室检测结果诊断为猪繁殖与呼吸综合征病毒和圆环病毒2型混合感染。为迅速控制猪群病情，对该猪场免疫程序及保健方案进行调整，并对猪群进行为期18周的猪繁殖与呼吸综合征和圆环病毒2型病毒血症期和抗体水平的持续跟踪发现，紧急防控方案实施后2周大群趋于稳定，猪繁殖与呼吸综合征疫苗二免后10周猪群的病毒血症消失，圆环病毒2型疫苗二免后猪群的病毒血症虽未消失，但阳性率有所下降，猪繁殖与呼吸综合征的抗体水平在猪群二免后8周趋于稳定，猪群受圆环病毒2型疫苗毒株及野毒的双重刺激，抗体衰减规律较为复杂，从持续的跟踪检测分析发现圆环病毒2型疫苗二免后6周抗体水平有所下降，8周后抗体水平上升并持续至该批猪出栏。  相似文献