广东省猪大肠杆菌优势血清型O107外膜蛋白的提取     

王文豪  张丹琳  苏丹萍  贺东生 《猪业科学》2012,29(7):88-89

实验室从广东省鉴定的猪大肠杆菌优势血清型O₁₀₇中,选出一株有致病性菌株。通过细菌培养、超声波裂解、N—十二烷基肌氨酸钠处理和超速离心技术提取出大肠杆菌O₁₀₇的外膜蛋白。提取物经SDS—PAGE电泳检测后发现蛋白条带大小与预期的实验结果相同。  相似文献   

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT-PCR鉴别诊断方法   总被引：11，自引：0，他引：11  

赵志权  王福广  郝环颍  张思远  贺东生 《华南农业大学学报》2008,29(3)

为了快速鉴别诊断高致病性猪繁殖与呼吸综合症,参照GeneBank已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的Nsp2基因,设计了1对引物,建立了一种RT-PCR检测方法.该方法可以区分高致病性PRRSV毒株与经典PRRSV弱毒疫苗株,扩增PCV2、PRV、PPV和CSFV等均为阴性.该方法敏感性较高,可以检测到0.2 ng的病毒核酸.  相似文献   

规模化猪场暴发塞内加谷病及SVV HN16株的分离鉴定     

贺东生  罗天霞  苏丹萍  徐帅飞  熊景峰 《猪业科学》2017,(10):72-74

2016年3月,华南某猪场发生水疱性疾病。经实验室PCR诊断,排除FMDV后显示为SVV阳性。使用PK-15细胞进行病毒培养和传代,采用特异性的VP1基因引物扩增该片段,使用DNAMAN7.0和MEGA6.06软件进行同源性分析。结果表明,该病毒可以在细胞上成功繁殖,成功克隆了该病毒的VP1基因,序列长度为694 bp,并进行基因测序和遗传进化分析。序列同源性分析显示:该毒株与国内其他毒株亲缘关系较远,单独形成一个分支。表明该毒株为塞内加谷病毒的新成员,命名为SVV HN16。  相似文献   

猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒多重PCR检测方法的建立   总被引：4，自引：3，他引：1  

赵彦宗  贺东生  张艳萍  苏丹萍 《中国畜牧兽医》2010,37(2):80-83

本研究根据GenBank上已发表的猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)的基因序列,设计了3对特异性引物,扩增PCV2、PRV、PPV,建立了同时检测PCV2、PRV、PPV的多重PCR方法。所扩增特异性产物片段大小分别为350、191、270 bp。该方法特异性强、敏感性高,可以用于猪圆环病、猪伪狂犬病、猪细小病的实验室诊断和流行病学调查。  相似文献   

猪β-干扰素的基因改造表达及其抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性测定     

张显浩  苏丹萍  张艳萍  蒋爱翔  贺东生 《中国畜牧兽医》2011,38(10):63-67

本研究根据GenBank上登录的猪β-干扰素基因成熟肽核苷酸序列(mPoIFNβ),在保持原猪β-干扰素蛋白序列不变的基础上,对猪β-干扰素基因进行了毕赤酵母偏嗜性改造,并构建了毕赤酵母重组表达质粒pPICZαC-PoIFNβ。pPICZαC-PoIFNβ经SacⅠ酶切线性化后,电击转化导入感受态的毕赤酵母菌株X-33中,转化子经YPDS+Zeocin抗性平板筛选和PCR鉴定后获得多株阳性菌株。阳性酵母菌株经甲醇诱导分泌表达了重组PoIFNβ,其表达量约为127.9 mg/L。表达产物经SDS-PAGE和Western blotting检测,结果表明,表达产物为分子质量约25和28 ku的混合物,并且二者都可与PoIFNβ阳性血清结合。以细胞病变抑制法测定重组β-干扰素在BHK-21细胞上的抗水泡性口炎病毒活性为2.8×10³ IU/mL;对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在Marc-145细胞上抗病毒活性达到1.6×10³ IU/mL。  相似文献   

抗菌肽与抗生素饲喂肉鸡的效果比较   总被引：45，自引：0，他引：45  

黄永彤  黄自然  黄建清  毕英佐  贺东生 《广东饲料》2004,13(2):24-25

为寻求绿色安全饲料添加剂以提高畜禽及水产动物的生产性能,降低成本,减少对环境的污染,华南农业大学与深圳市艺鹏生物工程有限公司合作,开发抗菌肽(Cecropin)新型饲料添加剂。抗菌肽能促进肉鸡生产性能,对提  相似文献   

新城疫病毒融合蛋白基因片段的构建与鉴定     

贺东生  刘福安  宋长绪  吴红专  王星 《广西农业生物科学》1998,(3)

本文重组和构建了新城疫病毒 ( NDV)融合蛋白基因 ,并对该基因进行了鉴定 :将新城疫病毒 F基因片段经 RT— PCR扩增 ,插入经 Eco R I/ Sal 酶切的克隆载体 p UC18及表达载体 p GEMEX,转化大肠杆菌 JM10 9株。用氨苄青霉素平板法初步筛选克隆 ,再用双酶切法、核酸探针、 PCR及核苷酸序列分析法鉴定 ,表明插入成功并且阅读框架正确  相似文献   

3种猪冠状病毒N基因密码子偏好性及宿主适应机制研究     

孙守湖  陈志飞  郭智轩  俞婷  王修武  李松倍  魏文康  贺东生 《中国畜牧兽医》2023,(6):2403-2413

【目的】研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪丁型冠状病毒(PDCoV)的N基因密码子偏好性差异及其影响因素。【方法】从GenBank数据库中下载上述3种猪冠状病毒(PoCoV)的全基因组序列,通过EMBOSS explorer、CALcal、DAMBE及CodonW等网站及软件计算有效密码子数(ENC)、相对同义密码子使用度(RSCU)等参数并进行ENC绘图、奇偶偏好性和中性绘图分析等。【结果】3种猪冠状病毒的N基因序列的ENC分布在48.99～54.96,其中PEDV、TGEV和PDCoV的ENC分别为53.74±0.61、50.09±0.88和0.72±0.65;RSCU分析显示,3种猪冠状病毒N基因偏好的密码子各不相同,但一般都偏好以U结尾;ENC绘图分析显示,3种猪冠状病毒的N基因数值点均位于标准曲线下方位置;奇偶偏好性分析显示全部散点位于y=0.5以下,且矢量向左下侧偏倚;中性绘图分析显示,3种病毒N基因绘图分析中回归曲线的斜率均接近0。3种猪冠状病毒的S和N基因在牛、猪、犬、人、鸡中的CAI值逐渐增高,RCDI值逐渐降低并接近于1。【结论】P...  相似文献   

DNA—RNA杂交法检测新城疫病毒的研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

贺东生  宋长绪  刘福安  徐立群 《中国动物检疫》1997,14(5):10-11

用光敏生物素标记鸡新城疫ｃＤＮＡ，制备核酸探针，经斑点杂交和碱性磷酸酶显色后，探针同该ｃＤＮＡ的ＰＣＲ产物、ＰＣＲ产物重组子和新城疫强弱毒株呈现阳性反应，与ＩＢＶ、ＩＬＴ、ＭＧ和正常尿囊液等均呈阴性杂交反应，田间病料和杂交试验也表明该ｃＤＮＡ探针是敏感且特异的检测方法。  相似文献   

华南地区致病性猪大肠杆菌的鉴定和血清型分布     

王文豪  苏丹萍  张丹琳  申翰钦  张显浩  陈瑞爱  贺东生 《中国兽医杂志》2013,49(4)

猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的猪肠道传染性疾病,其主要危害1月龄以内的仔猪.根据发病日龄及临床症状可分为仔猪黄痢、仔猪白痢和仔猪水肿3种.该病的发病率与死亡率均很高,给我国的养猪业带来极大的危害.由于大肠杆菌的血清型众多且各疫苗之间交叉免疫保护力低下,预防该病时一定要选择适合当地流行的优势菌株制备的疫苗进行免疫接种,才能起到事半功倍的效果.为了解华南地区猪大肠杆菌病流行情况及其优势血清型的分布情况,以便为该病的防控提供理论依据,我们进行了此项观察,报告如下.  相似文献